N-গ্লাইকোসিলেশন সাইট বিশ্লেষণ গ্লাইক্যানের কার্যকলাপ বুঝতে গুরুত্বপূর্ণ। যাওহাই বায়ো-ফার্মা এনজাইমেটিক ক্লিভেজের পর লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি-ম্যাস স্পেক্ট্রোমেট্রি (LC-MS) ব্যবহার করে N-গ্লাইকোসিলেশন সাইট নির্ধারণ করে।
আমরা বিভিন্ন বড় অণুর প্রোটিন গঠন চিত্রণে জড়িত ছিলাম, যাতে রিকম্বিন্যান্ট সাবইউনিট ভ্যাকসিন, ন্যানোবডিস/VHHs/ এক-ডোমেইন অ্যান্টিবডি (sdAbs), অ্যান্টিবডি ফ্র্যাগমেন্ট, হরমোন/পিপটাইড, সাইটোকাইন, গ্রোথ ফ্যাক্টর (GF), এনজাইম, কলাজেন ইত্যাদি অন্তর্ভুক্ত আছে।
N-গ্লাইকোসিলেশন সাইটের জন্য নিয়ন্ত্রণ আইনি প্রয়োজন
ICH Q6B গাইডলাইন অনুযায়ী, "গ্লাইকোপ্রোটিনের জন্য, কার্বোহাইড্রেট প্রমাণ (নির্মূল চিনি, অ্যামিনো চিনি, এবং সিয়ালিক এসিড) নির্ধারণ করা হয়। এছাড়াও, কার্বোহাইড্রেট চেইনের গঠন, অলিগোস্যাকারাইড প্যাটার্ন (এন্টেনারি প্রোফাইল), এবং পলিপেপটাইড চেইনের গ্লাইকোসাইলেশন সাইট(গুলি) সম্ভবত সর্বোচ্চ পরিমাণে বিশ্লেষণ করা হয়।"
বিশ্লেষণাত্মক পদ্ধতি
বিশ্লেষণ |
পদ্ধতি |
এন-গ্লাইকোসিলেশন সাইট |
এনজাইমেটিক ক্লিভেজ পরে তরল ক্রোমাটোগ্রাফি-ম্যাস স্পেক্ট্রোমেট্রি (LC-MS) |
প্রক্রিয়া
১. ট্রাইপসিন বা অন্য প্রোটিয়াস ব্যবহার করে প্রোটিনের এনজাইম ডাইজেস্ট
২. ফ্র্যাগমেন্ট গ্লাইকোপেপটাইড আলাদা করুন
৩. LC-MS দ্বারা N-গ্লাইকোসাইলেশন সাইট নিশ্চিত করুন
৪. ডেটা বিশ্লেষণ করুন