বায়োফার্মেসিউটিক্যাল উৎপাদনের জন্য N-গ্লাইক্যান প্রোফাইলিং অত্যাবশ্যক। যাওহাই বায়ো-ফার্মা Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) ব্যবহার করে N-গ্লাইক্যান প্রোফাইলিং সার্ভিস প্রদান করে যেখানে ছাঁটা এবং লেবেলযুক্ত গ্লাইক্যান থাকে। N-গ্লাইক্যান নমুনা প্রস্তুতকরণের সাধারণ ধাপগুলি গ্লাইকোপ্রোটিন (GP) এর বিচ্ছেদ, ডি-গ্লাইকোসিলেশন, শোধন, লেবেলিং/ডেরিভাটাইজেশন এবং Solid Phase Extraction (SPE) অন্তর্ভুক্ত।
আমরা বিভিন্ন বড় অণুর প্রোটিন গঠন চিত্রণে জড়িত ছিলাম, যাতে রিকম্বিন্যান্ট সাবইউনিট ভ্যাকসিন, ন্যানোবডিস/VHHs/ এক-ডোমেইন অ্যান্টিবডি (sdAbs), অ্যান্টিবডি ফ্র্যাগমেন্ট, হরমোন/পিপটাইড, সাইটোকাইন, গ্রোথ ফ্যাক্টর (GF), এনজাইম, কলাজেন ইত্যাদি অন্তর্ভুক্ত আছে।
N-গ্লাইক্যান প্রোফাইলিং-এর জন্য নিয়ন্ত্রণ প্রয়োজন
ICH Q6B গাইডলাইন অনুযায়ী, "গ্লাইকোপ্রোটিনের জন্য, কার্বোহাইড্রেট বিষয়ক (নিরপেক্ষ চিনি, অ্যামিনো চিনি এবং সিয়ালিক এসিড) নির্ধারণ করা হয়। এছাড়াও, কার্বোহাইড্রেট চেইনের স্ট্রাকচার, অলিগোস্যাকারাইড প্যাটার্ন (অ্যান্টেনারি প্রোফাইল), এবং পলিপিপটাইড চেইনের গ্লাইকোসিলেশন সাইট(গুলো) যতটা সম্ভব বিশ্লেষণ করা হয়।"
বিশ্লেষণাত্মক পদ্ধতি
বিশ্লেষণ |
পদ্ধতি |
এন-গ্লাইক্যান প্রোফাইলিং |
ফ্রিড এবং লেবেলড গ্লাইক্যানের লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি-ম্যাস স্পেক্ট্রোমেট্রি (LC-MS) বিশ্লেষণ |
প্রক্রিয়া
1. পিপটাইড N-গ্লাইকোসিডেজ F (PNGase F) দ্বারা গ্লাইক্যানের এনজাইমেটিক মুক্তি
2. 2-অ্যামিনোবেনজামাইড (2-AB) দ্বারা মুক্ত গ্লাইক্যানের ডেরিভেটাইজেশন
3. যদি বড় পরিমাণে ডিটারজেন্ট, অয়ানভোলাইল লবণ, বা ফ্রি অ্যামিনো গ্রুপ সহ উপাদান থাকে তবে TSK Amide - 80 কলামে N-গ্লাইক্যানের শোধন
4. ফ্লোরেসেন্ট 2-অ্যামিনোবেনজামাইড (2-AB) দ্বারা লেবেলিং
5. লেবেলড N-গ্লাইক্যানের LC-MS বিশ্লেষণ
6. ডেটা বিশ্লেষণ