Ліпідний склад LNP, визначення та кількість
Значення аналізу ліпідного складу LNP
Ліпідні наночастинки (LNP), що містять катіонні ліпіди, холестерин, фосфоліпіди та ПЕГ-кон’юговані ліпіди, служать видатними системами доставки лікарських продуктів мРНК. Стабільність і текучість двошарового шару LNPs залежать від властивостей і вмісту різних ліпідів, що використовуються в системі препаратів. Склад ліпідів дуже важливий для того, наскільки добре ЛНП доставляють ліки.
Yaohai-BioPharma надає рішення для ідентифікації та кількісного визначення ліпідного складу мРНК-LNP за допомогою методу високоефективної рідинної хроматографії з виявленням зарядженого аерозолю (HPLC-CAD).
Нормативні вимоги до ліпідного складу
Відповідно до регуляторних міркувань ВООЗ, «остаточний склад вакцини, включаючи ліпіди, має бути описаний разом із кількістю компонентів у кожній презентації».
Аналітичний метод
Аналіз |
Методи |
Ліпідний склад |
ВЕРХ у поєднанні з детектором зарядженого аерозолю (CAD) |
Процедура
Крок 1. Підготовка зразка ліпідів
Вибір розчинника є надзвичайно важливим для аналізу ліпідних компонентів у лікарських продуктах мРНК-ЛНП. Розріджувач повинен ефективно розчиняти кожен ліпідний компонент і порушувати будь-які взаємодії між ліпідами та інкапсульованою мРНК. Потенційні розріджувачі охоплюють етанол, етанол/диметилсульфоксид (ДМСО), етанол/формамід, етанол/триетиламінацетат та інші.
Крок 2. HPLC-CAD
Обернено-фазова рідинна хроматографія (RP-HPLC) у поєднанні з детектором зарядженого аерозолю (CAD) була включена в тестування ліпідного складу LNP. Враховуючи, що ліпіди не мають хромофорів і не поглинають ультрафіолетове (УФ) випромінювання без дериватізації, випаровування зазвичай є складним завданням. ІХС, будучи більш чутливою, може розрізняти ширший спектр вмісту ліпідів. Раніше метод надвисокоефективної рідинної хроматографії (UHPLC) у поєднанні з методом детектора зарядженого аерозолю (CAD) був розроблений і застосований в аналізі ліпідів для досліджень малих інтерферуючих РНК (siRNA) LNP.
Крок 3. Аналіз даних
Кількість кожного ліпіду в зразку включала розрахунки, отримані за стандартною кривою, помноженою на коефіцієнт розведення. Цей процес дав вміст ліпідів для кожного компонента в зразку мРНК-LNP.
Випадок аналізу ліпідного складу LNP за допомогою HPLC-CAD
На основі HPLC-CAD компанія Yaohai-BioPharma розробила надійний метод аналізу ліпідних компонентів мРНК-LNP. Цей метод підтверджено як лінійний, повторюваний, точний, точний і специфічний для композицій LNP, що може підтримувати розробку процесу, розробку рецептури, тестування стабільності та вивільнення мРНК-LNP.
Хроматографічний профіль 4 ліпідів методом HPLC-CAD Yaohai-BioPharma
Лінійність методу HPLC-CAD Yaohai-BioPharma (R2>0.99)
EN
