LNP Lipid Bileşimi Tanımı ve Miktarı
LNP Lipid Kompozisyon Analizinin Önemi
Katyonik lipit, kolesterol, fosfolipit ve PEG-konjugat lipitten oluşan lipit nanopartikülleri (LNP'ler), mRNA ilaç ürünleri için önemli dağıtım sistemleri olarak hizmet eder. LNP'lerin stabilitesi ve çift katmanlı akışkanlığı, formülasyon sisteminde kullanılan çeşitli lipitlerin özelliklerine ve içeriklerine bağlıdır. LNP'lerin ilaçları ne kadar iyi ilettiği konusunda lipitlerin bileşimi çok önemlidir.
Yaohai-BioPharma, yüklü aerosol saptama (HPLC-CAD) yöntemiyle yüksek performanslı sıvı kromatografisini kullanarak mRNA-LNP lipid bileşimini tanımlamak ve ölçmek için çözümler sağlar.
Lipid Kompozisyonuna İlişkin Düzenleyici Gereksinimler
Dünya Sağlık Örgütü'nün düzenleyici hususlarına göre, "Lipidler de dahil olmak üzere aşının nihai bileşimi, her sunumda bileşenlerin miktarıyla birlikte açıklanmalıdır."
Analitik metod
Analiz |
Yöntemler |
Lipid Bileşimi |
HPLC, Corona Yüklü Aerosol Dedektörü (CAD) ile birleştirildi |
Prosedür
Adım 1. Lipid Numune Hazırlama
Seyreltici seçimi, mRNA-LNP ilaç ürünlerindeki lipit bileşenlerinin analizi için büyük önem taşımaktadır. Seyreltici, her lipit bileşenini etkili bir şekilde çözmeli ve lipitler ile kapsüllenmiş mRNA arasındaki etkileşimleri bozmalıdır. Potansiyel seyrelticiler arasında etanol, etanol/dimetil sülfoksit (DMSO), etanol/formamid, etanol/trietilamin asetat ve diğerleri yer alır.
Adım 2. HPLC-CAD
Yüklü bir aerosol detektörü (CAD) ile eşleştirilmiş ters fazlı sıvı kromatografisi (RP-HPLC), LNP lipit bileşimi testine dahil edilmiştir. Lipidlerin kromofor içermediği ve türetilmeden ultraviyole (UV) radyasyonunu absorbe etmediği göz önüne alındığında, uçuculaştırma genellikle zordur. CAD daha duyarlı olduğundan, daha geniş bir lipit içeriği yelpazesini ayırt edebilir. Daha önce, yüklü bir aerosol detektörü (CAD) yöntemiyle birleştirilmiş ultra yüksek performanslı bir sıvı kromatografisi (UHPLC), küçük girişimci RNA (siRNA) LNP çalışmaları için lipid analizinde formüle edilmiş ve uygulanmıştır.
Adım 3. Veri analizi
Numune içindeki her bir lipidin miktarı, standart eğrinin seyreltme faktörü ile çarpılmasından elde edilen hesaplamaları içermektedir. Bu işlem, mRNA-LNP numunesindeki her bir bileşen için lipit içeriğini ortaya çıkardı.
HPLC-CAD ile LNP Lipid Kompozisyon Analizi Durumu
Yaohai-BioPharma, HPLC-CAD'ye dayanarak mRNA-LNP'nin lipit bileşenlerinin analizi için sağlam bir yöntem geliştirmiştir. Bu yöntemin doğrusal, tekrarlanabilir, kesin, doğru ve LNP formülasyonlarına özel olduğu doğrulandı; bu süreç geliştirmeyi, formülasyon geliştirmeyi, stabilite testini ve mRNA-LNP salınımını destekleyebilir.
Yaohai-BioPharma'nın HPLC-CAD yöntemiyle 4 lipidin kromatografik profili
Yaohai-BioPharma'nın HPLC-CAD yönteminin doğrusallığı (R2>0.99)
EN
