Према централној догми, гласничка РНК (мРНА) је мост за пренос генетског материјала са ДНК на протеине.
мРНА игра биолошку улогу кодирањем протеина ин виво, а зрела мРНА у еукариотским организмима састоји се од пет компоненти: 5' Цап (структура капе), 5' УТР (некодирајући регион), ОРФ (отворени оквир за читање), 3' УТР , и 3' полиА реп (полиаденилатни реп).

Детаљи о услугама
Proces | Опциона услуга | Детаљи услуге | Период испоруке (дан) |
Дизајн и оптимизација секвенце мРНА | Дизајн и оптимизација кодних секвенци | Поравнање ЦДС секвенци Оптимизација ЦДС кодона | 1 |
Дизајн и оптимизација некодирајућих секвенци | Дизајн и оптимизација 5' УТР секвенце Дизајн и оптимизација 3' УТР секвенце дизајн и оптимизација полиА секвенце | 1-2 |
Прилагодљиве опције
5' УТР/3' УТР | - Природа УТР секвенца
- Мутантна/инжењерска УТР секвенца
|
3' ПолиА Таил | - 100А ~120А реп (препоручено)
- Сегментирани полиА реп
- Отхер Цустом таил
|
Уобичајене стратегије за дизајн секвенце мРНА
мРНА компоненте | Биолошке функције | Стратегије оптимизације |
5' Кап | Заштитите мРНК од деградације егзонуклеазама и делујте заједно са полиА репом на 3' крају, протеином који се везује за полиА и протеином фактора иницијације транслације да започне транслацију протеина. | Природна структура Цап1 избегава рецепторе за препознавање образаца и на тај начин смањује природни имуни одговор, што се може постићи ко-транскрипционим затварањем у једном кораку или ензимским затварањем у два корака (погледајте мРНА ензимско затварање и ко-транскрипционо затварање за детаље). |
5' УТР | 5' УТР могу да препознају рибозоми, регулишу транслацију мРНК и утичу на стабилност мРНК. | Садржи Козакове секвенце без веома стабилне секундарне структуре. Природни УТР високо експримираних гена су пожељнији за ин витро транскрипцију (ИВТ) мРНК као што су α-глобин и β-глобин. |
ЦДС | Региони који кодирају протеине и кодирајуће секвенце за антигене, антитела или друге функционалне протеине. | Оптимизација кодона повећава ниво транслације, уз напомену да одређени неоптимални кодони могу играти улогу у савијању протеина. |
3' УТР | Регулише транслацију и стабилност мРНА. | Природни УТР високо експримираних гена су пожељнији за ИВТ мРНК као што су α-глобин и β-глобин. |
3' полиА реп | Регулише експресију протеина и штити структуру капице од деградације. | Потребна је одговарајућа дужина (100-150 бп); кодирање полиА репа на плазмиду шаблона за транскрипцију обезбеђује дефинисанију дужину репа полиА. |
Наше карактеристике
- Разноврсни избор извора УТР
Вишеструки извори високо изражених природних и модификованих УТР библиотека; зрела стратегија модификације УТР;
- Врхунски тим за оптимизацију ЦДС-а
Сарађујте са професионалним тимом за АИ алгоритам да бисте завршили оптимизацију кодона.
- Равномерна полиА реп расподела
Додајте полиА секвенце према ДНК шаблонима да бисте прецизније контролисали дужину мРНА.
- Разноврсне комбинације оптимизације
Остварите ефикасну експресију мРНК са ниском имуногеношћу.
Студија случаја
Дизајн секвенце мРНА са двоструким репортером: мЦхерри-еГФП мРНА
Иаохаи Био-Пхарма услуга мРНА наставља да се надограђује дизајном и оптимизацијом тандем секвенце двоструког репортерског гена, чиме се постиже коекспресија дуалних гена.
Коришћењем конвенционалног трансфекционог реагенса, тандемска секвенца двоструког гена мЦхерри-еГФП мРНА се трансфектује у 293Т ћелије, а два флуоресцентна сигнала мЦхерри (црвени) и појачани зелени флуоресцентни протеин (еГФП) се детектују уз истовремену експресију након 48 сати, и наслагају се график је означен жутом бојом.


Експресија мЦхерри-еГФП мРНА у 293Т ћелији