Plazmid DNA, kao u vitro transkripcija (IVT) šablon, je važan sirovina za proizvodnju mRNA. Visoka dobijanja, visoka čistoća i visoka oporavljivost plazmida DNA su glavna cilj tijekom razvoja procesa plazmida.
Yaohai Bio-Pharma pruža jednoznačno rešenje za razvoj plazmida, uključujući gore tok (fermentacija), dolje tok (čišćenje) proces razvoja, karakterizaciju procesa i validaciju procesa. Imamo obiman iskustva u poboljšanju plazmida dobijanja i izdvajanju istog iz složenih matrica razvijajući i optimizujući proces fermentacije, čišćenja i uklanjanja nepoželjnih tvari.
Osnovni bioproces za proizvodnju plazmida uključuje: Escherichia coli (E. coli) fermentaciju, skupljanje ćelija i alkalne liže, clarifikaciju, koncentraciju, trokorak proces hromatografije (hvat, srednje čišćenje i poliranje), i koncentraciju.
Detalji usluge | Jedinične operacije | Parametri |
E. coli fermentacija |
Slatki šešir | Sastav sredstava, antibiotik, zapremina insekulacije, temperatura rasta, i druge. |
Fermentor (7 L) |
Antibiotik, zapremina insekulacije, temperatura rasta, pH, rasutljeni kisik (DO), način hranića (npr., fed-batch), hrana za fermentaciju, vreme fermentacije, i druge. |
|
Skupljanje ćelija | Mikrofiltracija | Standard E. coli proces skupljanja |
Lizis ćelija | Rezuspensioniranje ćelija, alkalna liža, neutralizacija | Odnos alkalne koncentracije, vreme liže |
Prosvetljenje | Filtracija | Pružno filtriranje, 20 µm i filter od 5 µm (poželjno) |
Koncentracija | Ultrafiltriranje, tangencijalno strujno filtriranje | Veličina pora (ili NMWC), Transmembrana pritisak (TMP), Flux, odnos zapremine filtrata do površine membrane |
Hromatografija u tri koraka | Hromatografija po veličini (SEC), ili gel filtraciona hromatografija (GFC) | Dužina i prečnik kolone, sastav bufera, zapremina za ubacivanje, sastav mobilne faze (adsorpcija i desorpcija), pH, brzina protoka, uvodni, vezivanje, praćenje i eluicijski uslovi. |
Afini hromatografija (AF) | ||
Hromatografija anionskog izmenjenika (AEX) | ||
Koncentracija | Ultrafiltriranje, tangencijalno strujno filtriranje | Veličina pora (ili NMWC), Transmembrana pritisak (TMP), Flux, odnos zapremine filtrata do površine membrane |
Više rešenja za proces čišćenja bioloških sastojaka |