Osnova inkapsulacije je dizajn i razvoj sistema dostave. Pažljivo odgovarani sistem dostave omogućava da molekule circRNA unesu u telo bez degradacije od strane RNA enzima i zatim efikasno budu dostavljene na ciljni mestu, pređu celijaski membranom i oslobode se unutar ćelije.
Lipidne nanocice (LNP) su najbolji dostupni sistem za dostavu, sa prednostima u enkapsulaciji, izražavanju u živom organizmu i bezbednosti u živom organizmu u odnosu na druge sisteme za dostavu. LNP-ovi sa fragmentima nukleinske kiseline lako se šalju u ćelije i formiraju intracelularna tela. Nakon što ulaze u ćeliju, kisela sredina intracelularnog tela protonira i pozitivno nabija glavu jonizovanog lipidnog materijala, tako da se spaja sa unutrašnjom membranom intracelularnog tela i oslobađa ciljnu nukleinsku kiselinu u ćeliju za rad.
Usluga Yaohai Bio-Pharma circRNA se ne prestaje poboljšavati i može pružiti uslugu enkapsulacije circRNA-LNP kako bi se optimizovali relevantni ključni parametri procesa i poboljšala konzistentnost i reprodukcija proizvodnje leka circRNA.
Процес | Detalji usluge | Rok isporuke (Dan) | Isporučivi |
circRNA-LNP Inkapsulacija | Predobrada materijala i tečnosti | 2 | proizvod lekovskog sastojka circRNA-LNP (DP) |
Međufluvidna miksovanja uređaja | |||
Tangencijalno strujanje filtracije | 1 | ||
Sterilna filtracija | |||
kvalitetni kontrola circRNA-LNP | Efikasnost enkapsulacije | 1 | Извештај о тестирању |
Veličina čestica i indeks polidispersnosti | |||
Zeta potencijal |
Brza sinteza, visoka efikasnost R&D i pre-optimizovana rešenja;
Omjer enkapsulacije može biti veći od 90%;
Veličina lipidnih nanocigara može se kontrolisati promenom brzine i omjera uljevanja tekućine;
circRNA-LNP proizvodi se validiraju pomoću in vitro ćelijskog izražavanja i mogu efikasno izraziti ciljni protein.
Pripremaju se LNP-eGFP circRNA uzorci, a različite doze njih (1µg, 2µg i 4µg) direktno se transfiraju u 293T ćelije kako bi se potvrdilo da li mogu izraziti ciljni protein. Nakon 48 sati transfekcije, može se posmatrati jasan fluoresecentski signal, a prisutan je efekat povećanja intenziteta fluorescencije sa dozom.
Lipo-circ_eGFP, sastavljen od liposoma i neobrnute eGFP circRNA, uzima se kao kontrola.