Značaj asaja potencije mRNA
Sa brzim razvojem vakcina i terapija baziranih na mRNA, potrebna su specifična analitička sredstva za testiranje potencije (definisanja njihove biološke aktivnosti), uključujući efikasnost prijevoda mRNA. Ova sredstva su obično bazirana na celijaskoj transfekciji i funkcionalnim asajima ciljnog proteina.
Yaohai Bio-Pharma nudi celijaske asaje potencije za lekove bazirane na mRNA ili proizvode LNP, uključujući celijasku transfekciju (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 celije itd.) i ELISA ili Western Blot (WB) asaje.
Regulativni zahtevi za asajem potencije
Prema promatranjima WHO-a, „Potencija svakog štapa konačne vakcine treba da se odredi pomoću odgovarajuće kvantitativne i validirane funkcionalne metode. Potencijalni in vitro testovi potencije mogu uključivati celiju bazirane transfekcijske sisteme ili testove bez celija.“ USP je preporučio „celijski asaj“ za testiranje potencije mRNA, tj. izraz ciljnog proteina.
Процедура
Korak 1. Transfekcija na osnovu celija sa mRNA ili mRNA-LNP
Celije se kulture i transfekuju mRNA ili mRNA-LNP. Detaljno, mRNA se transfekcija nakon što se smiješa sa transfekcionim reagentom, dok se mRNA-LNP direktno transfekcija u celije. Nakon 24-48 sati, pročisti supernatant koji sadrži izraženi protein centrifugacijom.
Korak 2. Funkcionalni testovi ciljnog proteina
Izvršiti ELISA ili WB asanje kako bi se procenila funkcionalna vezivanja ciljnih proteina.
Studija slučaja
Celočasne Asanje Snage za mRNA Uzorke
Yaohai-BioPharma je razvila metodu celočasne snage za mRNA, koja uključuje kultiviranje stanica, transfekciju stanica i funkcionalne asanje proteina. Transfikovali smo eGFP mRNA, mCherry mRNA, luciferaza mRNA, spike protein mRNA u 293T stanice, i detektirali ciljni protein preko fluorescencije, luminescencije ili bojne signale, WB, ELISA.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
