Plasmid: Molekul DNA Pekeliling Kecil dengan Potensi Besar

Plasmid, molekul DNA bulat kecil, berfungsi sebagai vektor penting untuk penggabungan semula DNA dalam penyelidikan biologi molekul dan terapi gen. Hasil dan kualiti plasmid adalah penting, dengan perkadaran supercoiled dan kandungan endotoksin menjadi dua faktor penting yang mempengaruhi kualiti plasmid.

Subjenis Plasmid

Plasmid yang diekstrak daripada Escherichia coli (E. coli) wujud dalam pelbagai subjenis: bentuk supercoiled (SC), bulatan terbuka (OC), dan linear (L) (Rajah 1). Antaranya, plasmid bergelung besar mempamerkan kestabilan yang sangat baik, antigenisiti, dan kecekapan pemindahan dan ekspresi yang tinggi.

Rajah 1. Gambarajah Skema Subjenis Plasmid Biasa

Dalam elektroforesis gel agarose DNA plasmid, susunan kelajuan penghijrahan ialah DNA bergelung super, DNA linear, dan DNA bulat terbuka (Rajah 2).

Rajah 2. Corak Penghijrahan Elektroforesis Gel Agarose bagi Subjenis Plasmid Berbeza

Yaohai Bio-Pharma telah terus menambah baik proses dan tekniknya untuk memastikan perkadaran supergegelung plasmid gred transfeksi ialah ≥85% dan plasmid gred penyelidikan ialah ≥50%. Berikut ialah demonstrasi kes (Rajah 3), di mana elektroforesis gel agarose digabungkan dengan perisian Gel-Pro Analyzer untuk mengesan perkadaran supercoiled.

Rajah 3. Keputusan Pemeriksaan Kualiti Plasmid Supercoiled Proportion

Endotoksin

Endotoksin, komponen dinding sel bakteria Gram-negatif, terutamanya terdiri daripada lipopolisakarida A (LPS-A) sebagai komponen toksiknya. Semasa pengekstrakan plasmid, endotoksin dilepaskan ke dalam larutan lisis, menjejaskan kecekapan pemindahan plasmid ke dalam sel dengan teruk. Selain itu, ia boleh mengaktifkan tindak balas imun bukan spesifik dalam sel, yang membawa kepada positif palsu dalam eksperimen.

Yaohai Bio-Pharma mengamalkan pendekatan "bukan pengenalan" dan "penyingkiran tinggi", dengan ketat mengawal penggunaan reagen dan bahan yang mengandungi endotoksin sepanjang proses penulenan. Syarikat itu juga telah membangunkan kaedah penyingkiran endotoksin yang cekap, menawarkan tiga tahap kandungan endotoksin: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg, dan ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma mempunyai talian perkhidmatan pengekstrakan plasmid berkeupayaan tinggi, yang mampu menghantar 1 mg plasmid yang diekstrak dalam masa seminggu. Secara lalai, ia menyediakan lebih daripada tujuh ujian kawalan kualiti (QC) untuk memastikan penghantaran plasmid berkualiti tinggi dan berstandard tinggi daripada pelbagai perspektif.

Kami juga sedang giat mencari rakan kongsi global institusi atau individu. Kami menawarkan pampasan yang paling kompetitif dalam industri. Jika anda mempunyai sebarang pertanyaan, sila hubungi kami: [email protected]