Plasmid: Molekul DNA Bulat Kecil dengan Potensi Besar

Plasmid, molekul DNA bulat kecil, berfungsi sebagai vektor utama untuk rekombinasi DNA dalam penyelidikan biologi molekul dan terapi gen. Kandungan dan kualiti plasmid adalah sangat penting, dengan nisbah supercoiled dan kandungan endotoksin menjadi dua faktor utama yang mempengaruhi kualiti plasmid.

Subtipe Plasmid

Plasmid yang diekstrak daripada Escherichia coli (E. coli) wujud dalam pelbagai subtipe: bentuk supercoiled (SC), bulatan terbuka (OC), dan linear (L) (Rajah 1). Di antaranya, plasmid supercoiled menunjukkan kestabilan, antigenikiti, dan kecekapan transfeksi serta ungkapan yang tinggi.

Rajah 1. Gambar Rajah Subtipe Plasmid Biasa

Dalam elektroforesis gel agarosa bagi DNA plasmid, susunan kelajuan migrasi adalah DNA supercoiled, DNA linear, dan DNA bulatan terbuka (Rajah 2).

Rajah 2. Pola Migrasi Elektroforesis Gel Agarosa bagi Subtipe Plasmid Berbeza

Yaohai Bio-Pharma telah terus memperbaiki proses dan tekniknya untuk memastikan bahawa nisbah supercoil bagi plasmid tahap transfeksi adalah ≥85% dan bagi plasmid tahap penyelidikan adalah ≥50%. Berikut ialah satu demonstrasi kes (Rajah 3), di mana elektroforesis gel agarosa digabungkan dengan perisian Gel-Pro Analyzer untuk mengesan nisbah supercoil.

Rajah 3. Keputusan Pemeriksaan Kualiti Nisbah Supercoil Plasmid

Endotoksin

Endotoksin, suatu komponen dinding sel bakteria Gram-negatif, terutamanya terdiri daripada lipopolisakarida A (LPS-A) sebagai komponen toksiknya. Semasa pengekstrakan plasmid, endotoksin dilepaskan ke dalam larutan lisis, yang secara ketara mempengaruhi kecekapan transfeksi plasmid ke dalam sel. Selain itu, ia boleh mengaktifkan tanggapan imun tak spesifik dalam sel, menyebabkan positif palsu dalam eksperimen.

Yaohai Bio-Pharma mengambil pendekatan "tidak memperkenalkan" dan "pengeluaran tinggi", dengan ketat mengawal penggunaan reagen dan bahan yang mengandungi endotoksin sepanjang proses pemurnian. Syarikat itu juga telah membangunkan kaedah pengeluaran endotoksin yang cekap, menawarkan tiga tahap kandungan endotoksin: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg, dan ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma memiliki lini perkhidmatan pengekskan plasmid berterusan yang tinggi, mampu memberikan 1 mg plasmid yang diekstrak dalam tempoh satu minggu. Secara lalai, ia menyediakan lebih daripada tujuh ujian kawalan kualiti (QC) untuk memastikan penghantaran plasmid berkualiti tinggi dan piawai tinggi dari pelbagai aspek.

Kami juga aktif mencari rakan global institusi atau perorangan. Kami menawarkan ganti rugi paling kompetitif dalam industri ini. Jika anda ada sebarang soalan, sila rasa percuma untuk menghubungi kami: [email protected]