Kawalan Kualiti dan Aplikasi Protein Rekombinan

Kawalan kualiti protein rekombinan adalah penting untuk kebolehpercayaan dan kebolehulangan data eksperimen. Setiap langkah, daripada reka bentuk projek hingga proses pengeluaran, memerlukan strategi kawalan kualiti yang ketat.

Strategi Kawalan Kualiti

Sektor perindustrian mematuhi prosedur operasi standard yang ketat, manakala komuniti akademik perlu meningkatkan pengetahuan profesional untuk meningkatkan kebolehulangan data. Protein dengan aplikasi biologi tertentu atau ciri biokimia memerlukan strategi kawalan kualiti (QC) yang disesuaikan.

Contoh dan Penyelesaian Mencabar

Yaohai Bio-Pharma menawarkan pengalaman yang luas dalam pengeluaran dan penulenan protein rekombinan, ditambah dengan pasukan pakar, memastikan pengeluaran protein anda dilengkapkan dengan ketulenan yang tinggi. Dengan memanfaatkan pengalaman kami daripada beratus-ratus projek, Yaohai dengan hormatnya merumuskan cara mengoptimumkan penulenan protein.

Protein Pengikat Asid Nukleik: Langkah penyingkiran asid nukleik, seperti nuklease atau pemendakan PEI, adalah perlu. Nisbah A260nm/A280nm dipantau untuk mengesan pencemaran asid nukleik.

Tetikus Ferritin Heavy Chain 1 untuk cryo-EM: Langkah penulenan perlu dioptimumkan, dan nuklease perlu ditambah untuk mengurangkan nisbah A260nm/A280nm dan memastikan ketulenan protein.

Chimeric Protein Manusia dsRBEC: Lisis sel menggunakan penampan yang mengandungi urea, diikuti dengan lipatan semula pada lajur untuk mendapatkan protein aktif berfungsi.

Kation Divalen Pengikat Protein: Kation divalen khusus mesti ditambah semasa ekspresi dan penulenan, dan agen pengkelat harus dielakkan.

Protein Besi-Sulfur: Imidazole harus dielakkan untuk mengelakkan gangguan gugusan [2Fe ± 2S], memastikan lipatan dan fungsi protein yang betul.

Serpihan Larut LLT1: Reka bentuk mutan mengoptimumkan pembentukan ikatan disulfida dan lipatan protein, menghasilkan protein yang stabil dan hasil tinggi.

Penghabluran Kinase CLK1: Ekspresi bersama dengan λ-phosphatase menghilangkan fosfat dari tapak fosforilasi, dan kromatografi pengecualian saiz (SEC) dan kromatografi pertukaran anion digunakan untuk mendapatkan CLK1 homogen tanpa fosforilasi heterogen.

Protein untuk Penggunaan Antigen: Penilaian ketulenan adalah perlu untuk mengelakkan pencemaran dengan protein yang sangat imunogenik. Untuk antibodi epitope struktur, konformasi tiga dimensi antigen mesti dikekalkan.

Protein Mudah Terkumpul: Strategi seperti menyaring strain yang berbeza dan menurunkan suhu penanaman digunakan untuk mengehadkan isu pengagregatan, dan strategi penulenan pantas direka bentuk.

Penyingkiran Endotoksin: Kaedah seperti kromatografi cas positif dan kromatografi pertalian ligan polikasi mengeluarkan endotoksin, memastikan tahap LPS berada di bawah had penggunaan.

Kompleks Protein: Subunit dinyatakan secara berasingan dan dipasang secara in vitro atau dinyatakan bersama untuk membentuk kompleks berfungsi. Integriti kompleks dinilai dengan kehomogenan dan jisim molar.

Kesimpulan

Pengeluaran protein bermula dengan reka bentuk strategik, dengan mengambil kira ciri dan aplikasi biokimia. Semasa ekspresi, penulenan dan QC, keadaan dan kaedah dioptimumkan untuk kestabilan, bukan pengagregatan dan keadaan asal. Protein yang disucikan menyediakan pelbagai kegunaan hiliran, seperti pencirian biofizikal.

Yaohai Bio-Pharma juga sedang giat mencari rakan kongsi global institusi atau individu dan menawarkan pampasan paling kompetitif dalam industri. Jika anda mempunyai sebarang pertanyaan, sila hubungi kami: [email protected]