Kawalan Kualiti dan Aplikasi Protein Rekombinan

Kawalan kualiti protein rekombinan adalah penting untuk kebolehpercayaan dan kebolehpulihannya data eksperimen. Setiap langkah, dari reka bentuk projek hingga proses pengeluaran, memerlukan strategi kawalan kualiti yang ketat.

Strategi Kawalan Kualiti

Sektor perindustrian mengikuti prosedur operasi piawai yang ketat, manakala komuniti akademik perlu meningkatkan pengetahuan profesional untuk membaiki kebolehpulihan data. Protein dengan aplikasi biologi tertentu atau ciri-ciri biokimia memerlukan strategi kawalan kualiti (KK) yang disesuaikan.

Contoh Tantangan dan Penyelesaian

Yaohai Bio-Pharma mempunyai pengalaman luas dalam pengeluaran dan pemurnian protein rekombinan, bersama-sama dengan pasukan pakar, memastikan pengeluaran protein anda selesai dengan keadaan kepekatan tinggi. Dengan menggunakan pengalaman kami dari ratusan projek, Yaohai dengan berbaik hati merangkum bagaimana memoptimumkan pemurnian protein.

Protein Pengekisan Asid Nukleik: Langkah-langkah pengalihan asid nukleik, seperti nulease atau penurunan PEI, adalah perlu. Nisbah A260nm/A280nm dipantau untuk mengesan pencemaran asid nukleik.

Ferritin Berat Tikus Rantai 1 untuk kriyo-EM: Langkah-langkah pemurnian perlu dioptimumkan, dan nulease perlu ditambah untuk mengurangkan nisbah A260nm/A280nm dan memastikan kepuretan protein.

Protein Kimerik Manusia dsRBEC: Pemecahan sel menggunakan penyangga yang mengandungi urea, diikuti dengan pelipatan semula pada kolom untuk mendapatkan protein yang aktif secara fungsional.

Protein-Protein Mengikat Kation Divalen: Kation divalen tertentu mesti ditambah semasa ungkapan dan pemurnian, dan ejen kelasi harus dielakkan.

Protein Besi-Sulfur: Imidazole harus dielakkan untuk mengelakkan gangguan [2Fe ± 2S] cluster, memastikan lipatan dan fungsi protein yang betul.

Fragmen Larut LLT1: Reka bentuk mutan mengoptimalkan pembentukan ikatan disulfida dan lipatan protein, menghasilkan protein yang stabil dan berkelimpahan tinggi.

Kristalisasi Kinase CLK1: Pengungkapan bersama dengan fosfatase λ mengalih keluar fosfat dari tapak fosforisasi, dan kromatografi pengecualian saiz (SEC) serta kromatografi pertukaran anion digunakan untuk mendapatkan CLK1 homogen tanpa fosforisasi heterogen.

Protein untuk Penggunaan Antigen: Penilaian kepurenan adalah perkara yang perlu untuk mengelakkan pencemaran dengan protein imunogenik yang tinggi. Untuk antibodi epitop struktur, konformasi tiga dimensi antigen mesti dipertahankan.

Protein Rentan Menggumpal: Strategi seperti penyaringan strain yang berbeza dan menurunkan suhu budidaya digunakan untuk membataskan isu penggumpalan, dan strategi pemurnian pantas direka bentuk.

Pembuang Endotoksin: Kaedah seperti kromatografi cas positif dan kromatografi afiniti ligand polikation mengalih keluar endotoksin, memastikan tahap LPS di bawah had aplikasi.

Kompleks Protein: Subunit dinyatakan secara terpisah dan dirakamkan in vitro atau diungkapkan bersama untuk membentuk kompleks yang berfungsi. Kebulatan kompleks dinilai melalui kehomogenan dan jisim molar.

Kesimpulan

Pengeluaran protein bermula dengan reka bentuk strategik, dengan mempertimbangkan ciri-ciri biokimia dan aplikasi. Semasa pengungkapan, pemurnian, dan kawalan kualiti, keadaan dan kaedah dikoptimalkan untuk kestabilan, tiada penggumpalan, dan keadaan asli. Protein yang telah dipurifikasikan digunakan untuk pelbagai tujuan lanjut, seperti penjenisan biofizik.

Yaohai Bio-Pharma juga aktif mencari rakan global, sama ada institusi atau perorangan, dan menawarkan ganti rugi paling kompetitif dalam industri. Jika anda mempunyai sebarang soalan, sila hubungi kami: [email protected]