VLP technologijos taikymas žmogaus ir veterinariniuose vakcinuose

Praėjusią savaitę mes trumpai pateikėme VLP (Virus-like Particles) savybių, veikimo mechanizmų (MoA) ir išreikšties sistemų aprašymą. VLP yra virūsiniai struktūrinių baltymų molekulos, kurios neturint virūsinių genetinių duomenų. Be to, jų privalumai apima nanomastį, automatinę sudėtį, kartotinus paviršiaus epitopus, lengvą genetinę ir chemine ženklų modifikaciją bei natūralią imunogeniškumą. Taigi, VLP yra labai svarbios vakcinos kūrimo srityje.

Šiame straipsnyje mes išsamiąja kalba pasakysime apie VLP taikymą vakcinose. VLP vakcinos dizainas yra svarbus kūrybai efektyvesnių ir saugesnių VLP vakcinų. Yaohai Bio-Pharma sėkmingai pateikė daugybę VLP vakcinų ir daugiau nei 100 CMC rekombinantinių baltymų projektų globaliniams klientams žmogaus ir gyvūnų sveikatos srityse. Remiantis Yaohai plačiu patirtimi, mes apibendrinome pagrindinius aspektus VLP vakcinos dizainui, užtikrinant griežtą kontrolią prieš kiekvieną veiksnių gamyboje. Šie kritiniai aspektai apima dydį ir formą, paviršiaus krūvį, antigeno išraišką, vidinį paviršių, taip pat genetinius ir cheminius VLP modifikacijų tipus.

1. Dydis ir forma

Dydis ir forma VLP yra svarbūs veiksniai, nustatančios jų imunologinius poveikius. Idealūs VLP turėtų turėti panašias dimensijas, formą ir receptorių susiejimo šablonus kaip gamtiniai virusai, leidžiant jiems būti pažįstami ir sutrikdyti iš imuninio sistemos, geriau aktyvavus imunines ląstelės. Šiuo metu dauguma VLP yra dydžio nuo 10 iki 200 nm. Šis idealus dydžio intervalas gali skatinti laisvą VLP difuziją per limfokanalo sieną ir lengvesnę jų sužadinimą antigenų pateikiančiomis ląstelėmis, tokiais kaip dendritinės ląstelės ir makrofagai, taip efektyviau sukeldami imunines atsakas. Be to, VLP dydis taip pat nustato, ar jos gali būti efektyviai sutrikdytos ir apdorotos antigenų pateikiančiomis ląstelėmis.

2. Paviršiaus krūvis

Išorinio VLP krūvio potencialiai įtakoja VLP dalelių suvedimą į imuninius ląstelius bei modifikuoja imunines atsakas. Palyginti su neigiamai ar neutraliai krūvomis VLP, kationiniai VLP tarei sukels didesnį jų suvedimą į ląsteles, kas gali būti paaiškinta elektrostatiniais sąveikojimais tarp VLP ir anioninio fosfolipidų dvikamienio ląstelių membranose. VLP su teigiamu išoriniu krūviu gali uždengti jų neigiamai krūvotus turinus, padarant juos lengviau sergančius ląstelėmis. Tačiau per didelis išorinis krūvis gali sukelti nespecifinį susijungimą bei galimą toksišką reakciją. Todėl išorinio krūvio reikia atsargiai reguliuoti siekiant optimalių imuninių poveikių ir saugumo.

3. Antigenų išraiška

Pasirinkus viralinio antigeno su aukšta imunogeniškumo lygiu ir užtikrus jų tinkamą išraišką ant VLP paviršiaus yra kritiška veiksmingoms vakcinoms projektuoti. T-cell epitopams, pateikiami VLP, nėra būtina, kad antigenas būtų atskleistas išoriniam paviršiui, nes VLP bus degradiuojami lizosomoje-endocytine sistemoje antigeno pateikiančiųjų ląstelių, o gauti epitopo peptidai bus pateikiami T-limfocitų receptoriams. Todėl antigenas gali būti įterptas į slaptą vietą viduje VLP. Optimalus įterpimo vieta turi būti nustatyta struktūrinė analizė, kad nebūtų paveikta VLP struktūros integritetas arba jo imunogeniškumas.

Kontroliuojant, reikalingas tiesioginis B-limfocitų receptorių ir B-limfocitų epitopų sąveika, kad būtų suaktyvintas B-limfocitų receptorių susijungimas ir antikorpės gamyba. Todėl B-limfocitų epitopai turi būti VLP paviršiaus atviruose vietovėse, geriausiai imunologiniuose dominančiuose regionuose. Be to, VLP paviršiaus ciklai arba išoriniai N-terminalo/C-terminalo pozicijos yra puikios įterpimo vietos, nes šios vietai galima pritaikyti didesnių dydžių antigenus.

4. Turinio pasirinkimas

VLP rinkinio vidus dažnai naudojamas saugoti genetinę medžiagą, kuri yra svarbi virūsų daugardymuisi ir struktūrinėje stabilumui. Naudojant nanoreaktorių arba rekombinantinius metodus, į VLP rinkinio vidų taip pat gali būti įkelti neigiamai krūvęs nukleorūgščiai ar kitos imunologinės priedos. VLP rinkinio vidaus paviršius gali apsaugoti turinį nuo enzymų induotos degradacijos, gerinti šių medžiagų absorbciją tiksliniais ląstelėmis bei išleisti imunines priedas, kad būtų pagerinta VLP imunogeniškumas. Korte, šie derinimai padeda stiprinti imunines atsakas, stebėti VLP platinimosi organizme, bei valdyti jų išleidimą ir pristatymą.

5. Cheminiai ir genetiniai derinimai

Per genetinį modifikavimą į VLP galima įvesti užsienio antigenus. Bendras genetinio modifikavimo procesas apima kodono optimizavimą antigeno ir VLP genams atsižvelgiant į reikalavimus, kurie yra būtini eukariotiniam arba prokariotiniam išreikšimo sistemai, tada vykdomas sujungto geno dirbtinis sintezavimas ir rekombinantinio chimerinio baltymo gamyba.

Cheminis modifikavimas pagrindiniu būdu remiasi kovaleniais ryšiais tarp VLP ir antigenų. Kovalentinius ryšius daugiausia sudaro VLP paviršiuje esantys funkciniai grupės, kurie gali būti natūralūs arba dirbtinai įvedami. Cheminis modifikavimas suteikia daugiau lankstumo, tačiau jo reakcijos procesas yra sunkesnis kontroliuoti ir atkartoti palyginti su genetiniu modifikavimu.

Išvada

Dėl VLP vakcinos gamybos Yaohai Bio-Pharma yra patikima platforma su dideliu patirties mastu ir griežtomis gamybos procedūromis. Dėl giliausios supratimo šiais pagrindiniais klausimais, susijusiais su VLP vakcinos dizainu, Yaohai Bio-Pharma užtikrina, kad VLP vakcina būtų pritaikyta siekiant maksimalios veiksmingumo ir saugumo, kad atitiktų klientų poreikius. Yaohai Bio-Pharma siekia puikumo kiekvienoje gamybos etape, užtikrinant savo VLP vakcinos kokybę ir saugumą, todėl jie tampa klientų pasirinktu sprendimu.

Yaohai Bio-Pharma taip pat aktyviai ieško globalių institucinių ar asmeninių partnerių ir siūlo konkurencingiausias atlygas pramone. Jei turite klausimų, prašome jų nehesitantinti pateikti: [email protected]