Plazmidė: maža žiedinė DNR molekulė, turinti didelį potencialą

Plazmidės, mažos žiedinės DNR molekulės, yra pagrindiniai DNR rekombinacijos vektoriai molekulinės biologijos tyrimuose ir genų terapijoje. Plazmidžių derlius ir kokybė yra labai svarbūs, o superspiralinė dalis ir endotoksinų kiekis yra du svarbūs veiksniai, turintys įtakos plazmidės kokybei.

Plazmidžių potipiai

Iš Escherichia coli (E. coli) išskirtos plazmidės yra įvairių potipių: superspiralinės (SC), atviros apskritos (OC) ir linijinės (L) formos (1 pav.). Tarp jų superspiralinės plazmidės pasižymi puikiu stabilumu, antigeniškumu ir dideliu transfekcijos bei ekspresijos efektyvumu.

1 pav. Įprastų plazmidžių potipių schema

Atliekant plazmidinės DNR elektroforezę agarozės gelyje, migracijos greičio tvarka yra superspiralinė DNR, linijinė DNR ir atvira žiedinė DNR (2 pav.).

2 pav. Įvairių plazmidžių potipių agarozės gelio elektroforezės migracijos modelis

„Yaohai Bio-Pharma“ nuolat tobulino savo procesus ir metodus, siekdama užtikrinti, kad transfekcijos laipsnio plazmidžių superspiralinė dalis būtų ≥85%, o tiriamojo lygio plazmidžių – ≥50%. Toliau pateikiamas atvejo demonstravimas (3 pav.), kuriame agarozės gelio elektroforezė derinama su Gel-Pro Analyzer programine įranga, siekiant aptikti superspiralinę proporciją.

3 pav. Plazmidės superspiralinės proporcijos kokybės patikrinimo rezultatai

Endotoksinas

Endotoksinas, gramneigiamų bakterijų ląstelės sienelės komponentas, daugiausia susideda iš lipopolisacharido A (LPS-A), kuris yra toksiškas komponentas. Plazmidės ekstrahavimo metu į lizės tirpalą išsiskiria endotoksinas, smarkiai paveikiantis plazmidės transfekcijos į ląsteles efektyvumą. Be to, jis gali suaktyvinti nespecifinį imuninį atsaką ląstelėse, todėl eksperimentuose gaunami klaidingi teigiami rezultatai.

Yaohai Bio-Pharma taiko „neįvedimo“ ir „didelio pašalinimo“ metodą, griežtai kontroliuojant reagentų ir medžiagų, turinčių endotoksinų, naudojimą viso valymo proceso metu. Bendrovė taip pat sukūrė efektyvų endotoksinų šalinimo metodą, siūlantį tris endotoksinų kiekio lygius: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg ir ≤0.005 EU/µg.

„Yaohai Bio-Pharma“ turi didelio našumo plazmidžių ekstrahavimo paslaugų liniją, galinčią tiekti 1 mg ekstrahuotų plazmidžių net per savaitę. Pagal numatytuosius nustatymus ji suteikia daugiau nei septynis kokybės kontrolės (QC) testus, kad būtų užtikrintas aukštos kokybės, aukšto standarto plazmidžių pristatymas iš kelių perspektyvų.

Taip pat aktyviai ieškome institucinių ar individualių pasaulinių partnerių. Mes siūlome konkurencingiausią atlyginimą pramonėje. Jei turite klausimų, nedvejodami susisiekite su mumis: [email protected]