mRNA sintezuojama in vitro transkripcijos (IVT) metodu iš linijinio plazmidinio DNA (pDNA). Per IVT procedūrą taip pat formuojami kai kurie šalutiniai produktai, įskaitant dvigubai lankstamą RNA (dsRNA), kurie yra nustatyti kaip pagrindiniai innataus imuninių kelio aktyvatorių. Ypač svarbu pašalinti nepurejuimus ir gauti didelius produkto kiekius garsi mRNA tam, kad būtų galima naudoti in vitro/in vivo mRNA tyrimams ir terapijos programoms.
Yaohai Bio-Pharma sukūrė rinkinį mRNA sintezės technologijų, kurios leidžia teikti ypač gryną mRNA , pvz., sekcijos dizainą ir optimizavimą, IVT, šalinimo procesą, liofilizaciją ir lipidinių nanodžiugų (LNP) inkapsuliaciją. Visi produktai išleidžiami pagal griežtas kokybės kontrolės normas. Afiniškasis chromatografavimas (AC), pagrįstas stipriu ir selektyviu sąveika tarp mRNA 3′ polyA uostelio ir stacionariosios fazės oligo dT, yra efektyvus ir masinis mRNA šalinimo strategijos.
Pateikiami rezultatai
| Produktas |
Papildomai Ypač Gryna mRNA
|
| Ilgis |
100~10 000 nukleotidai |
| RNA turinys |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Grynosumas |
A260/A280 |
| Tapatybė ir grynas |
Agaroidinio Gelo Elektroforezė (AGE)
Kapilinis elektroforezis (CE)
|
| Amortizatorius |
Vanduo bez RNazės (dyga) |
| Siuntimas |
Sukelti su šiltojo ledžio; arba normalios temperatūros sąlygomis |
| Sandėliavimas |
● Skystis, lyg ar žemiau -20°C
● Liofilizuotas pulvas, 4°C
|
| PROGRAMA |
LNP formuliacijos kūrimas,
Ląstelių tyrimai, Gyvūnų eksperimentas
|
Kitos pritaikomos parinktys
| 5' Kapas |
● Be kapo
● Cap0, bendras kapavimas
● Cap1, bendras kapavimas
● Cap1, enzymų kapavimas
|
| 5’ UTR\/3’ UTR |
● Gamtos UTR seka
● Mutanto\/Inžinieringa UTR seka
|
| 3' PolyA uodega |
● 100A ~120A uodega (rekomenduojama)
● Segmentuota polyA uodega
● Kitas priedas
|
| Modifikuoti nukleozidai |
● Nepakeistos bazės,
● Pseudourydilas (Ψ),
● N1-Metilpseudaūridinas (N1Ψ),
● 5-metilcitozinas (m5C),
● 5-metilūridinas (m5U),
● 5-metoksiūridinas (5moU),
● 2-tiūridinas (s2U),
● 2′-O-metil-U
● Kiti
|
Praktinis pavyzdys
Sukūrėme daugiaetapį chromatografijos sužadinimo procesą ir paruošome aukštos drąkos ir integriteto (>95%) mRNA.
Figs. Analizė aukštos drąkos mRNA (＞98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
