Šiandien Yaohai taip įdomu pasidalinti savo ilgos RNR in vitro transkripcijos protokolu. Tai veiksminga strategija, kurią mokslininkai dažnai naudoja RNR gamybai laboratorijoje. Tokiu būdu tyrėjai gali pagaminti labai daug ilgos RNR – tai būtina tyrimams įvairiose biologinėse srityse. Čia pateikiame nuoseklų ilgų RNR paruošimo in vitro transkripcijos būdu vadovą. Taip pat kalbėsime apie tai, kaip galėtume pagerinti procesą ir bandysime išspręsti kai kurias problemas, su kuriomis susiduriate sintetindami ilgą RNR.
In vitro transkripcijai reikalingi keli esminiai komponentai, ypač ilgoji RNR. Turėsite pateikti fermentą, vadinamą RNR polimeraze, rašymo medžiagą nukleotidų trifosfatų (NTP) pavidalu, buferį, padedantį reakcijai, ir tam tikrą DNR šabloną. Kaip tai padaryti žingsnis po žingsnio, išsamų vadovą rasite čia:
Geram RNR sintezės darbui labai svarbūs keli veiksniai. Svarbiausia, kad magnio jonų kiekis pačiame buferyje yra svarbus. RNR polimerazei reikalingas didelis magnio kiekis, kad būtų palaikoma tinkama sąveika su DNR šablonu ir vėlesnis RNR sulankstymas. Antras svarbus aspektas, į kurį reikia atsižvelgti, yra DNR šablono koncentracija. Tiksliau, turite turėti pakankamai šabloninės DNR reakcijos, kad gautumėte gerą RNR derlių.
Žinoma, ilga RNR turės savo problemų. Šios problemos gali būti susijusios su RNR skilimu, paveikti RNR susilankstymą ir susikaupusias struktūras, kurios gali trukdyti sintetinti RNR. Vienas iš būdų spręsti šiuos iššūkius yra koreguoti naudojamą buferį. Norėdami sukurti išsamesnę RNR struktūrą, mokslininkai gali pridėti įvairių specialių cheminių medžiagų, tokių kaip DTT ir p-merkaptoetanolis, kad RNR tinkamai sulankstytų ir neleistų jai sulipti arba susikaupti.
Be to, ne visi ilgų RNR tipai yra vienodi ir kai kuriems gali prireikti alternatyvių sintezės metodų. Yra specialių funkcijų, kurias mokslininkams gali prireikti įtraukti į RNR, pavyzdžiui, pridėti 5 dangtelį arba poli-A uodegą. Jei to reikia (kaip paaiškinta vėliau), mokslininkai turėtų įtraukti kitus fermentus, tokius kaip guanililtransferazė ir poli(A)polimerazė. Taip pat reikia pasirinkti tinkamą RNR polimerazės fermentą, kuris natūraliai leistų jiems gaminti daugiau RNR. Kai tik bus susintetinta ilga RNR, turėsime nustatyti geriausią būklę.
Ilgų RNR in vitro transkriptas Yra daug pagrindinių ilgo RNR in vitro transkripto protokolo panaudojimo būdų, susijusių su keliais tyrimais, tyrimais ir terapinėmis pastangomis. Tai padeda mokslininkams suprasti RNR struktūrą, jos veikimo būdą ir kaip jie gali modifikuoti genus šiuolaikinėmis technologijomis. Kita diena – įvairių ligų ir jų gydymo būdų, pavyzdžiui, dabartinių RNR terapijų, atradimas – patikėkime, kokia naudinga ši skaitymo technologija gali būti medicinai.
Šio protokolo naudojimas turi daug privalumų. Elektroforezės metodas paprastai yra efektyviausias ir ekonomiškiausias būdas gaminti didelius ilgos RNR kiekius. Be RNR kokybės, geras derlius taip pat yra svarbus veiksnys, padedantis mokslininkams atlikti tyrimus, ypač jei jiems reikia didelio RNR kiekio eksperimentams dėl didelio įvesties medžiagos. Be to, ilgos RNR transkripcija in vitro paprastai yra tikslesnė ir atkuriamesnė nei cheminė RNR sintezė arba ląstelių sintezė.
„Yaohai BioPharma“ yra 10 geriausių mikrobų CDMO, apimantis ilgosios RNR in vitro transkripto protokolą, taip pat reguliavimo reikalus. Mes turime kokybės valdymo sistemą, kuri atitinka dabartinius GMP standartus ir pasaulinius reglamentus. Mūsų reguliavimo ekspertų komanda išmano pasaulines reguliavimo sistemas, kad paspartintų biologinį paleidimą. Užtikriname atsekamus gamybos procesus kokybiškus produktus, taip pat atitinkančius JAV FDA ir ES EMA taisykles. Australijos TGA ir Kinijos NMPA taip pat patenkinti. „Yaohai BioPharma“ sėkmingai išlaikė mūsų GMP kokybės sistemos ir gamybos įmonės Europos Sąjungos kvalifikuoto asmens (QP) auditą vietoje. Be to, atlikome pirmuosius ISO9001 kokybės vadybos sistemos, ISO14001 aplinkosaugos vadybos sistemos ir ISO45001 darbuotojų saugos ir sveikatos vadybos sistemos sertifikavimo auditus.
Yaohai Bio-Pharma, 10 geriausių biologinių produktų gamintojų, yra mikrobinės fermentacijos specialistas. Įkūrėme pažangią įrangą, aprūpintą modernia įranga ir stipriomis RD gamybos galimybėmis. Turime penkias vaistinių medžiagų gamybos linijas, atitinkančias GMP mikrobinės fermentacijos ir gryninimo reikalavimus, taip pat dvi automatizuotas kasečių, buteliukų, taip pat užpildytų švirkštų užpildymo užbaigimo linijas. Galimos fermentacijos svarstyklės skiriasi nuo 100L iki 500L, 1000L ir 2000L. In vitro Transcript Protocol for Long RNA for vias yra nuo 1 ml iki 25 ml, o užpildytų švirkštų ir kasetės užpildymo specifikacijos apima 1–3 ml. Mūsų gamybos cechas atitinka cGMP reikalavimus ir garantuoja nuolatinį klinikinių mėginių bei komercinių prekių tiekimą. Mūsų gamykla gamina dideles molekules, kurios siunčiamos į pasaulį.
Yaohai Bio-Pharma turi patirties gaminant biologinius preparatus, kurie yra sukurti iš mikroorganizmų. Siūlome pagal užsakymą sukurtus RD sprendimus ir gamybos paslaugas, sumažindami galimą riziką. Mes dirbome su įvairiomis technikomis, tokiomis kaip rekombinantiniai ląstelių subvienetai, vakcinos (įskaitant peptidus), augimo faktoriai, hormonai ir ilgosios RNR In vitro transkripto protokolas. Esame daugelio mikroorganizmų, tokių kaip mielių tarpląstelinis ir tarpląstelinis sekretas (išeiga iki 15g/l) ir tarpląstelinio tirpių bakterijų bei inkliuzinio kūno (išeiga iki 10g/l), specialistas. Taip pat sukūrėme BSL-2 fermentacijos platformą bakterinėms vakcinoms kurti. Turime patirties tobulindami gamybos procesus, taip didindami derlių ir mažindami išlaidas. Turime labai efektyvią technologijų komandą, kuri užtikrina savalaikį ir kokybišką projektų pristatymą. Tai padeda mums greičiau pateikti rinkai jūsų unikalius produktus.
„Yaohai Bio-Pharma“ yra ilgo RNR CDMO in vitro transkripto protokolo lyderė. Mūsų pagrindinis dėmesys buvo skiriamas mikrobinių vakcinų ir terapinių preparatų, skirtų naminiams gyvūnėliams, žmonių ir veterinarijos sveikatai gydyti, gamyba. Turime pažangiausias RD ir gamybos technologijų platformas, apimančias visą gamybos procesą nuo mikrobų padermių inžinerijos iki ląstelių bankininkystės apdorojimo ir metodų kūrimo iki klinikinės ir komercinės gamybos, todėl galime užtikrinti sėkmingą pažangiausių sprendimų pristatymą. Esame sukaupę didžiulį žinių bagažą biologinio apdorojimo mikrobų srityje. Sėkmingai įgyvendinta daugiau nei 200 projektų ir mes padedame savo klientams laikytis tokių reglamentų, kaip JAV FDA ir ES EMA. Taip pat padedame jiems naršyti Australijos TGA ir Kinijos NMPA. Dėl savo patirties ir kompetencijos galime greitai reaguoti į rinkos poreikius ir pasiūlyti individualizuotas CDMO paslaugas.