Pyöreät RNA:t (circRNA) ovat yksijuosteisten, kovalenttisesti suljettujen RNA:iden luokka ilman 5'- tai 3'-päitä. Tämä ainutlaatuinen ominaisuus voi estää eksonukleaasien aiheuttaman sircRNA:n hajoamisen ja antaa circRNA:lle korkean stabiilisuuden ja translaatiotehokkuuden suhteessa lineaariseen mRNA:han.
sircRNA syntetisoidaan in vitro -kierrossa lineaarisesta RNA-prekursorista. Prosessiin tai tuotteisiin liittyvät epäpuhtaudet voivat johtaa synnynnäiseen immuunivasteeseen, erityisesti lineaariset RNA:t (RNA-prekursorit, lovettu RNA, leikatut intronit). On kriittistä poistaa lineaariset RNA-epäpuhtaudet ja saada korkeat saannot puhdasta sircRNA:ta in vitro/vivo -tutkimukseen ja terapeuttisiin sovelluksiin.
Yaohai Bio-Pharma on kehittänyt joukon sircRNA-synteesiteknologioita erittäin puhtaan sircRNA:n tuottamiseksi, mukaan lukien sekvenssisuunnittelu ja optimointi, in vitro -transkriptio (IVT), kiertosuoritus/syklisointi, puhdistus preparatiivinen korkean suorituskyvyn nestekromatografia (HPLC) ja lipidinanohiukkaset ( LNP) kapselointi. Kaikki tuotteet julkaistaan tiukkojen laadunvalvontastandardien (QC) mukaisesti.
Tuotokset
Tuotteet | Räätälöity erittäin puhdas sircRNA |
Synteesimenetelmä | Ryhmän I intronin itseliitos |
RNA-sisältö | 100 µg ~ 10 mg (OD260) |
Pituus | 50-8,000 XNUMX nukleotidia |
Puhtaus | A260 / A280 |
Tunnista ja Puhtaus | Agaroosigeelielektroforeesi (AGE), korkean suorituskyvyn lipidikromatografia (HPLC) |
puskuri | RNaasi-vapaa vesi (neste) |
Lähetys | Laiva kuivajäällä; tai ympäristön lämpötilan alapuolella |
varastointi | Neste, -20 °C tai alle; Lyofilisoitu jauhe, 4°C |
Hakemus | LNP-formulaation kehittäminen, solupohjaiset määritykset, eläinkoe |
Asiakastapaukset
Kehitimme skaalautuvan puhdistusprosessin pääasiassa preparatiivista HPLC:tä käyttäen ja valmistimme circRNA:ta erittäin puhtaalla (>95 %).
Kuva. Erittäin puhtaan (98 %) sircRNA:n puhdistus ja analyysi