Utnyttja bakteriell IB för rekombinant proteinproduktion

Bakteriella inklusionskroppar (IB) i rekombinant proteinproduktion erbjuder enkel separation, stabilitet, högt uttryck och nedbrytningsmotstånd och kan uttrycka toxiska proteiner med biologisk aktivitet. Framsteg i IB-förståelse öppnar nya vägar för bearbetning, med utmaningar och lösningar identifierade för framtida forskning.

Yaohai Bio-Pharma har mer än 10 års erfarenhet av produktion av rekombinanta proteiner med hjälp av mikrobiella fermenteringssystem. Vårt starka och professionella team av experter garanterar att det renade återveckade proteinet kan nå 1.5 g/L.

Bearbetningsstrategier och utmaningar för IBs

Separering av IB Metoder för IB-separation beror på proteinstruktur-funktion och applikationsbehov. Fysiska metoder stör cellerna men kan skada proteinkvaliteten. Enzymatiska metoder förbättrar renheten men är kostsamma. Skonsamma tvättmedel fungerar för klassiska IBs, inte icke-klassiska. pH-kontroll är avgörande för lösligheten. Elektroforesavsättning är enkel men inte skalbar för biologiskt aktiva proteiner.

Solubilisering av IBs Solubilisering av IBs är avgörande för att återvinna aktiva proteiner. Starka denatureringsmedel skadar den naturliga strukturen, medan icke-denatureringsmedel inte är lämpliga för klassiska IB. Milda solubiliseringsmedel kan lösa upp IBs samtidigt som de skyddar proteinstrukturen, men inte alla proteiner. Framtida arbete behöver bättre algoritmer för att välja solubiliseringsmedel.

Renatureringsstrategier Proteinrenaturering är avgörande för funktionalitet. In vitro-renaturering står inför utmaningar. Val av solubiliseringsmedel, proteinkoncentration, förhållanden och metoder påverkar resultatet. Milda solubiliseringsmedel skyddar den inhemska strukturen och förbättrar kvaliteten. Måttliga koncentrationer och optimerade förhållanden minskar aggregationen. Kolumnbaserade metoder med monolitiska matriser ger högre renhet och utbyte.

Rening av renaturerade proteiner Ytterligare rening separerar felveckade från korrekt vikta proteiner. Traditionell kromatografi kämpar med liknande proteiner. Alternativa metoder erbjuder fördelar men kräver målproteinspecifikt urval. Att utveckla en universell reningsmetod är fortfarande en utmaning.

Slutsats

IB erbjuder fördelar i rekombinant proteinproduktion men utgör bearbetningsutmaningar. Med en djupare förståelse för proteinstrukturens funktion inom IB:er och framsteg inom separation, solubilisering, renaturering och rening, kan återhämtning av aktiva proteiner med hög genomströmning snart uppnås. Detta kommer att sänka kostnaderna och påskynda biofarmaceutisk FoU, vilket driver industrins tillväxt.

Yaohai Bio-Pharma söker också aktivt efter institutionella eller individuella globala partners och erbjuder den mest konkurrenskraftiga ersättningen i branschen. Om du har några frågor är du välkommen att kontakta oss: [email protected]

För mer information om Yaohai Bio-Pharma, vänligen se webbplatsen: www.yaohaibio-pharma.com