Att använda bakteriella IBs för produktion av rekombinant protein

Bakteriella inklusionskroppar (IBs) vid produktion av rekombinant protein erbjuder enkelhet i separation, stabilitet, hög expression och resistens mot nedbrytning, och kan uttrycka toxiska proteiner med biologisk aktivitet. Förbättrade insikter om IBs öppnar nya möjligheter för bearbetning, med utmaningar och lösningar som identifierats för framtida forskning.

Yaohai Bio-Pharma har mer än 10 års erfarenhet av produktion av rekombinanta proteiner med hjälp av mikrobiella färdesystem. Vår starka och professionella gruppen av experter garanterar att den renade och omfaldade proteinen kan nå 1,5 g/L.

Bearbetningsstrategier och utmaningar för IBs

Separation av IBs Metoder för IB-separation beror på proteinstrukturens funktion och tillämpningsbehov. Fysiska metoder stör celler men kan skada proteinkvaliteten. Enzymbaserade metoder förbättrar renhet men är kostsamma. Mjuka tvättmedel fungerar för klassiska IB:n, inte för icke-klassiska. pH-kontroll är avgörande för löslighet. Elektroforesedeposition är enkel men inte skalbar för biologiskt aktiva proteiner.

Lösning av IB:n Att lösna IB:n är avgörande för återvinning av aktiva proteiner. Starka denaturanter skadar den nativa strukturen, medan icke-denaturanter inte är lämpliga för klassiska IB:n. Mjuka lösare kan dissolvera IB:n samtidigt som de skyddar proteinstrukturen, men inte för alla proteiner. Framtida arbeten behöver bättre algoritmer för att välja lösare.

Renatureringss strategier Proteinrenaturering är avgörande för funktionalitet. In vitro-renaturering möter utmaningar. Val av solubilisator, proteinkoncentration, villkor och metoder påverkar resultatet. Milda solubilisatorer skyddar den nativa strukturen och förbättrar kvaliteten. Måttliga koncentrationer och optimerade villkor minskar aggregering. Kolumnbaserade metoder med monolitiska matriser erbjuder högre renhet och utbyte.

Renaturering av proteiner Ytterligare renad skiljer ut missfoldade från korrekt foldade proteiner. Traditionell kromatografi kämpar med liknande proteiner. Alternativa metoder erbjuder fördelar men kräver val specifikt för målproteinet. Att utveckla en universell renytmethode förblir en utmaning.

Slutsats

IB:n erbjuder fördelar vid produktion av rekombinant protein men ställer också till med bearbetningsutmaningar. Med en djupare förståelse av proteinkonstruktion-funktion inom IB:n och framsteg inom separation, lösningsförmåga, renaturering och reningsprocesser kan höghastighetsåtervinning av aktiva proteiner snart uppnås. Detta kommer att sänka kostnaderna och påskynda forskning och utveckling inom bioteknik, vilket driver branschens tillväxt.

Yaohai Bio-Pharma söker också aktivt efter globala partner, både institutioner och enskilda personer, och erbjuder den mest konkurrenskraftiga ersättningen i branschen. Om du har några frågor, tveka inte att kontakta oss: [email protected]

För mer information om Yaohai Bio-Pharma, vänligen se webbplatsen: www.yaohaibio-pharma.com