Mendedahkan Dos Optimum RNA Reporter eGFP

Dalam biologi molekul dan bioteknologi, protein pendarfluor hijau yang dipertingkatkan (eGFP) telah muncul sebagai gen wartawan penting kerana keupayaannya menghasilkan pendarfluor hijau terang pada 509 nm. Protein ini, yang asalnya diasingkan daripada obor-obor Aequorea victoria, adalah penanda pengesanan langsung dalam kultur sel mamalia, memudahkan pemantauan dan pengoptimuman kecekapan pemindahan. Walau bagaimanapun, persoalan timbul: apakah dos optimum RNA wartawan eGFP untuk mencapai tahap ekspresi yang diingini?

Penyelidikan telah menunjukkan bahawa keberkesanan RNA wartawan eGFP sangat bergantung pada dosnya, terutamanya dalam konteks RNA bulat (circRNA) dan sistem mRNA (saRNA) yang menguatkan diri. Kajian yang dijalankan oleh pasukan Katrien Remaut di Kumpulan Penyelidikan Nanoperubatan Universiti Ghent telah menyerlahkan hubungan rumit antara dos saRNA dan kecekapan terjemahannya dalam sel retina. Mereka mendapati bahawa dos rendah saRNA, di bawah ambang untuk pengaktifan imun semula jadi, memudahkan ekspresi protein yang cekap. Ini menekankan kepentingan kawalan dos yang tepat dalam memanfaatkan potensi penuh RNA wartawan eGFP.

Dalam aplikasi praktikal, kepekatan mRNA eGFP yang biasa digunakan boleh berkisar daripada mikrogram (μg) kepada nanogram setiap mikroliter (ng/μL). Sebagai contoh, dalam eksperimen pemindahan, dos antara 0.05 μg hingga 0.5 μg mRNA eGFP telah ditunjukkan untuk menghasilkan tahap ekspresi yang ketara dalam pelbagai jenis sel, dengan peratusan sel positif mencapai setinggi 99-100% dalam kes tertentu. Terutama, pada dos di bawah 0.1 μg, saRNA menunjukkan tahap ekspresi yang unggul berbanding dengan mRNA linear, menunjukkan kelebihan penguatan diri.

Fleksibiliti RNA wartawan eGFP bukan sahaja terletak pada pendarfluornya yang cerah dan stabil tetapi juga pada kebolehsuaiannya kepada persediaan eksperimen yang berbeza. Penyelidik boleh memperhalusi dos untuk memenuhi keperluan khusus mereka, memastikan kawalan tepat ke atas tahap ekspresi gen. Ciri ini menjadikan eGFP sebagai alat yang tidak ternilai untuk mengkaji fungsi gen, memantau nasib sel dan mengoptimumkan protokol pemindahan.

Kesimpulannya, dos optimum RNA wartawan eGFP sangat bergantung pada konteks eksperimen dan hasil yang diinginkan. Dengan berhati-hati memilih dos yang sesuai, penyelidik boleh memanfaatkan potensi penuh gen wartawan serba boleh ini, memajukan pemahaman kita tentang mekanisme molekul dan memacu inovasi dalam bioteknologi.

Yaohai Bio-Pharma ialah biologi pertama dan terbesar yang didedikasikan untuk sistem ekspresi mikrob CRDMO di Greater China. Kami komited untuk memenuhi keperluan klinikal dan komersial pelanggan global kami untuk ubat biologi, vaksin dan diagnostik untuk kegunaan manusia dan veterinar.

Kami juga sedang giat mencari rakan kongsi global institusi atau individu. Kami menawarkan pampasan yang paling kompetitif dalam industri. Jika anda mempunyai sebarang pertanyaan, sila hubungi kami: [email protected]