Menyingkap Dos Tepat RNA Pelapor eGFP

Dalam biologi molekul dan bioteknologi, protein fluoresen hijau diperbaiki (eGFP) telah muncul sebagai gen pelapor utama kerana keupayaannya untuk menghasilkan fluoresensi hijau terang pada 509 nm. Protein ini, yang asalnya dipisahkan dari ubur-ubur Aequorea victoria, adalah penanda pengesanan terus dalam budaya sel mamalia, memudahkan pemantauan dan pengoptimuman kecekapan transfeksi. Walau bagaimanapun, soalan yang timbul ialah: apakah dosis optimum RNA pelapor eGFP untuk mencapai tahap ungkapan yang diingini?

Kajian telah menunjukkan bahawa keberkesanan RNA pelapor eGFP sangat bergantung pada dosnya, terutamanya dalam konteks RNA bulat (circRNA) dan mRNA yang memperbesar diri (saRNA). Kajian yang dijalankan oleh pasukan Katrien Remaut di Kumpulan Penyelidikan Nanomedikin Universiti Ghent telah menonjolkan hubungan rumit antara dos saRNA dan kecekapan penterjemahannya dalam sel retina. Mereka mendapati bahawa dos rendah saRNA, di bawah ambang batas untuk pengaktifan imun bawaan, membolehkan ungkapan protein dengan cekap. Ini menekankan kepentingan kawalan dos yang tepat dalam memanfaatkan potensi sepenuhnya RNA pelapor eGFP.

Dalam aplikasi praktikal, kandungan eGFP mRNA yang biasa digunakan boleh berkisar dari mikrogram (μg) hingga nanogram per mikroliter (ng/μL). Sebagai contoh, dalam eksperimen transfeksi, dos yang berkisar dari 0.05 μg hingga 0.5 μg eGFP mRNA telah menunjukkan tahap ungkapan yang signifikan dalam pelbagai jenis sel, dengan peratusan sel positif mencapai sehingga 99-100% dalam beberapa kes. Perlu diperhatikan bahawa pada dos di bawah 0.1 μg, saRNA menunjukkan tahap ungkapan yang lebih baik berbanding mRNA linear, menunjukkan kelebihan self-amplifying-nya.

Kepantasan RNA penyampai eGFP tidak hanya terletak pada fluorescens yang terang dan stabil tetapi juga pada keluwesannya untuk beradaptasi dengan pelbagai susunan eksperimen. Penyelidik boleh menyesuaikan dos untuk memenuhi keperluan spesifik mereka, memastikan kawalan tepat atas tahap ungkapan gen. Ciri ini menjadikan eGFP alat yang sangat bernilai untuk mengkaji fungsi gen, memantau nasib sel, dan mengoptimumkan protokol transfeksi.

Sebagai kesimpulan, dosis optimum RNA pelapor eGFP sangat bergantung pada konteks eksperimen dan hasil yang diinginkan. Dengan memilih dosis yang sesuai dengan teliti, penyelidik boleh memanfaatkan potensi penuh gen pelapor serba guna ini, meningkatkan pemahaman kita tentang mekanisme molekul dan mendorong inovasi dalam bioteknologi.

Yaohai Bio-Pharma adalah yang pertama dan terbesar CRDMO yang diperuntukkan kepada sistem ungkapan mikrobia di rantau Greater China. Kami berdedikasi untuk memenuhi keperluan klinikal dan komersial pelanggan global kami bagi ubatan biologi, vaksin dan dignostik untuk guna manusia dan veterinar.

Kami juga aktif mencari rakan global institusi atau perorangan. Kami menawarkan ganti rugi paling kompetitif dalam industri ini. Jika anda ada sebarang soalan, sila rasa percuma untuk menghubungi kami: [email protected]