LNP lipīdu sastāva noteikšana un daudzums
LNP lipīdu sastāva analīzes nozīme
Lipīdu nanodaļiņas (LNP), kas satur katjonu lipīdus, holesterīnu, fosfolipīdus un PEG konjugāta lipīdus, kalpo kā ievērojamas piegādes sistēmas mRNS zāļu produktiem. LNP stabilitāte un divslāņu plūstamība ir atkarīga no dažādu lipīdu īpašībām un satura, ko izmanto formulēšanas sistēmā. Lipīdu sastāvs ir ļoti svarīgs, lai LNP piegādātu zāles.
Yaohai-BioPharma nodrošina risinājumus mRNS-LNP lipīdu sastāva identificēšanai un kvantitatīvai noteikšanai, izmantojot augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfiju ar uzlādēta aerosola noteikšanas (HPLC-CAD) metodi.
Normatīvās prasības lipīdu sastāvam
Saskaņā ar PVO normatīvajiem apsvērumiem "vakcīnas galīgais sastāvs, tostarp lipīdi, jāapraksta kopā ar komponentu daudzumu katrā noformējumā."
Analītiskā metode
Analīze | Metodes |
Lipīdu sastāvs | HPLC apvienojumā ar Corona Charged Aerosol Detector (CAD) |
Procedūra
1. solis. Lipīdu parauga sagatavošana
Šķīdinātāja izvēle ir ārkārtīgi svarīga lipīdu komponentu analīzei mRNS-LNP zāļu produktos. Šķīdinātājam vajadzētu efektīvi izšķīdināt katru lipīdu komponentu un izjaukt jebkādu mijiedarbību starp lipīdiem un iekapsulēto mRNS. Potenciālie atšķaidītāji ir etanols, etanols/dimetilsulfoksīds (DMSO), etanols/formamīds, etanols/trietilamīna acetāts un citi.
2. solis. HPLC-CAD
LNP lipīdu sastāva testēšanā ir iekļauta apgrieztās fāzes šķidruma hromatogrāfija (RP-HPLC), kas savienota pārī ar uzlādētu aerosola detektoru (CAD). Ņemot vērā, ka lipīdiem trūkst hromoforu un tie neuzsūc ultravioleto (UV) starojumu bez atvasināšanas, iztvaikošana parasti ir sarežģīta. CAD, kas ir jutīgāks, var saskatīt plašāku lipīdu satura spektru. Iepriekš tika izstrādāta īpaši augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfija (UHPLC), kas apvienota ar uzlādēta aerosola detektora (CAD) metodi, un tā tika izmantota lipīdu analīzē mazo traucējošo RNS (siRNS) LNP pētījumos.
3. solis. Datu analīze
Katra lipīda daudzums paraugā ietvēra aprēķinus, kas iegūti no standarta līknes, kas reizināta ar atšķaidīšanas koeficientu. Šis process deva lipīdu saturu katrai mRNS-LNP parauga sastāvdaļai.
LNP lipīdu sastāva analīzes gadījums ar HPLC-CAD
Pamatojoties uz HPLC-CAD, Yaohai-BioPharma ir izstrādājis spēcīgu metodi mRNS-LNP lipīdu komponentu analīzei. Šī metode tika apstiprināta kā lineāra, atkārtojama, precīza, precīza un specifiska LNP preparātiem, kas varētu atbalstīt procesa izstrādi, preparātu izstrādi, stabilitātes testēšanu un mRNS-LNP izdalīšanos.
4 lipīdu hromatogrāfiskais profils ar Yaohai-BioPharma HPLC-CAD metodi
Yaohai-BioPharma HPLC-CAD metodes linearitāte (R2＞0.99)
EN
