Genų terapijos evoliucija: nauja DNR ir optimizavimas

DNR taikymo srityje plazmidinė DNR (pDNR) visada buvo labai mėgstama dėl savo išskirtinio stabilumo, lengvo gamybos, saugojimo ir transportavimo. Tačiau moksliniams tyrimams toliau tobulėjant, pamažu atsirado naujų DNR tipų, tokių kaip Minicircle DNR (mcDNA), Doggybone DNR (dbDNA) ir Close-Ended DNR (ceDNA), kurie atveria naujas galimybes genų terapijai. ir kitose pažangiausiose srityse.

mcDNA

mcDNR gaunama iš tėvų plazmidžių rekombinacijos proceso, kai bakteriniai elementai pašalinami išlaikant apskritą struktūrą. Jo paruošimo procesas priklauso nuo specifinės fermentinės veiklos, tokios kaip φC31 integrazė, pasiekianti didesnį rekombinacijos efektyvumą. Svarbus mcDNR bruožas yra tai, kad joje nėra bakterijų sekų, todėl ji gali pasikliauti mažais DNR nešikliais ir taip pagerinti genų ekspresiją.

dbDNA

dbDNA turi uždarą dvigrandę konformaciją, kurios abiejuose galuose yra mažos vienos grandinės kilpos, joje nėra bakterijų sekų ir atsparumo antibiotikams genų. Mažesnis jo dydis palengvina patekimą į ląsteles ir branduolius, kartu demonstruodamas visišką atsparumą nukleazėms. Pradinėje dbDNR formoje yra tik būtini genų ekspresijai elementai, praleidžiant nereikalingas sekas, todėl turi galingas genų transfekcijos galimybes ir aukštesnius baltymų ekspresijos lygius.

ceDNA

ceDNA yra sukonstruota dvigrandė, linijinė, kovalentiškai uždaro galo DNR konstrukcija, turinti tikslinį geną ir kitus ekspresiją reguliuojančius elementus. Jo galai yra apversti terminaliniai pasikartojimai (ITR), užtikrinantys tūkstančių bazių konstrukciją, gerokai viršijančią tradicinių adeno-associated virus (AAV) vektorių ribas. CeDNR ITR struktūra yra labai svarbi norint patekti į branduolį, o jos ekspresijos modelis atitinka neintegruotus epizodus. Be to, ceDNR paruošimo procesas yra greitas ir ekonomiškas, todėl jis tinka genų terapijos tyrimams tokiose srityse kaip retos ligos, vakcinos ir onkologija.

DNR optimizavimas

Kalbant apie DNR optimizavimą, mokslininkai pagerina transgeninių genų ekspresiją optimizuodami plazmidės DNR vidinius komponentus. Tuo pačiu metu pakeičiami atrankos žymenys, pavyzdžiui, ampicilinas pakeičiamas kanamicinu, siekiant sumažinti autoimuninę riziką. Be to, sacharozės atrankos sistema taip pat naudojama tradiciniams atrankos žymenims pakeisti. Kalbant apie kodono optimizavimą, mokslininkai pagerina baltymų ekspresijos lygius, keisdami kodono naudojimą, kartu visiškai atsižvelgdami į šeimininko pirmenybę genų sekos ekspresijai. Optimizavimo proceso metu mokslininkai taip pat turi atkreipti dėmesį į kodono paklaidą, mRNR antrinės struktūros stabilumą, trans-veikiančių elementų ir restrikcijos fermentų vietų vengimą bei GC kiekio pusiausvyrą.

Apibendrinant galima teigti, kad naujų DNR tipų kūrimas ir DNR optimizavimas suteikė naujų galimybių ir iššūkių tokioms sritims kaip genų terapija. Yaohai Bio-Pharma sukūrė GMP gamybos platformas tiek žiedinėms, tiek linijinėms plazmidėms. „Yaohai“ taip pat gali teikti įvairių DNR tipų procesų kūrimą ir optimizavimą, įskaitant šiuos naujus DNR tipus, tenkinančius skirtingus klientų poreikius.

Yaohai Bio-Pharma taip pat aktyviai ieško institucinių ar atskirų pasaulinių partnerių ir siūlo konkurencingiausią atlygį pramonėje. Jei turite klausimų, nedvejodami susisiekite su mumis: [email protected]