Avslöjar den optimala dosen av eGFP Reporter RNA

Inom molekylärbiologi och bioteknik har förstärkt grönt fluorescerande protein (eGFP) dykt upp som en central reportergen på grund av dess förmåga att producera ljusgrön fluorescens vid 509 nm. Detta protein, som ursprungligen isolerades från maneten Aequorea victoria, är en direkt detektionsmarkör i däggdjurscellkulturer, vilket underlättar övervakning och optimering av transfektionseffektivitet. Men frågan uppstår: vad är den optimala dosen av eGFP-reporter-RNA för att uppnå de önskade uttrycksnivåerna?

Forskning har visat att effektiviteten av eGFP-reporter-RNA starkt beror på dess dosering, särskilt i samband med cirkulärt RNA (circRNA) och självförstärkande mRNA (saRNA)-system. Studier utförda av Katrien Remaut-teamet vid Gents universitets nanomedicinforskningsgrupp har belyst det intrikata förhållandet mellan saRNA-dosering och dess translationseffektivitet i retinala celler. De upptäckte att låga doser av saRNA, under tröskeln för medfödd immunaktivering, underlättar effektivt proteinuttryck. Detta understryker vikten av exakt doseringskontroll för att utnyttja den fulla potentialen hos eGFP-reporter-RNA.

I praktiska tillämpningar kan de vanligaste koncentrationerna av eGFP-mRNA variera från mikrogram (μg) till nanogram per mikroliter (ng/μL). Till exempel, i transfektionsexperiment, har doser som sträcker sig från 0.05 μg till 0.5 μg av eGFP mRNA visat sig ge signifikanta uttrycksnivåer i olika celltyper, med positiva cellprocenter som når så höga som 99-100% i vissa fall. Särskilt vid doser under 0.1 μg visar saRNA överlägsna uttrycksnivåer jämfört med linjärt mRNA, vilket visar sin självförstärkande fördel.

Mångsidigheten hos eGFP-reporter-RNA ligger inte bara i dess ljusa och stabila fluorescens utan också i dess anpassningsförmåga till olika experimentella uppställningar. Forskare kan finjustera dosen för att passa deras specifika behov, vilket säkerställer exakt kontroll över genuttrycksnivåerna. Denna funktion gör eGFP till ett ovärderligt verktyg för att studera genfunktion, övervaka cellöde och optimera transfektionsprotokoll.

Sammanfattningsvis är den optimala dosen av eGFP-reporter-RNA starkt beroende av det experimentella sammanhanget och önskade resultat. Genom att noggrant välja rätt dos kan forskare utnyttja den fulla potentialen hos denna mångsidiga reportergen, främja vår förståelse av molekylära mekanismer och driva innovation inom bioteknik.

Yaohai Bio-Pharma är den första och största biologiska substansen dedikerad till mikrobiellt uttryckssystem CRDMO i Greater China. Vi är fast beslutna att möta de kliniska och kommersiella behoven hos våra globala kunder för biologiska läkemedel, vacciner och diagnostik för humant och veterinärt bruk.

Vi söker också aktivt institutionella eller individuella globala partners. Vi erbjuder den mest konkurrenskraftiga ersättningen i branschen. Om du har några frågor är du välkommen att kontakta oss: [email protected]