Plasmid: En liten cirkulär DNA-molekyl med stor potential

Plasmider, små cirkulära DNA-molekyler, fungerar som väsentliga vektorer för DNA-rekombination inom molekylärbiologisk forskning och genterapi. Utbytet och kvaliteten på plasmider är avgörande, med supercoiled proportion och endotoxininnehåll är två signifikanta faktorer som påverkar plasmidens kvalitet.

Plasmidsubtyper

Plasmider extraherade från Escherichia coli (E. coli) finns i olika undertyper: supercoiled (SC), öppen cirkulär (OC) och linjär (L) former (Figur 1). Bland dem uppvisar supercoiled plasmider utmärkt stabilitet, antigenicitet och hög transfektion och expressionseffektivitet.

Figur 1. Schematiskt diagram över vanliga plasmidsubtyper

I agarosgelelektrofores av plasmid-DNA är ordningen för migrationshastigheten supercoiled DNA, linjärt DNA och öppet cirkulärt DNA (Figur 2).

Figur 2. Agarosgelelektroforesmigreringsmönster för olika plasmidsubtyper

Yaohai Bio-Pharma har kontinuerligt förbättrat sina processer och tekniker för att säkerställa att andelen supercoiled av plasmider av transfektionsgrad är ≥85 % och andelen av forskningsklassade plasmider är ≥50 %. Följande är en falldemonstration (Figur 3), där agarosgelelektrofores kombineras med programvaran Gel-Pro Analyzer för att detektera den superspolade proportionen.

Figur 3. Kvalitetsinspektionsresultat av plasmid Supercoiled Proportion

endotoxin

Endotoxin, en komponent i cellväggen hos gramnegativa bakterier, består i första hand av lipopolysackarid A (LPS-A) som sin toxiska komponent. Under plasmidextraktion frisätts endotoxin i lyslösningen, vilket allvarligt påverkar effektiviteten av plasmidtransfektion in i celler. Dessutom kan det aktivera ospecifika immunsvar i celler, vilket leder till falska positiva resultat i experiment.

Yaohai Bio-Pharma använder en "icke-introduktion" och "högt avlägsnande" tillvägagångssätt, som strikt kontrollerar användningen av reagenser och material som innehåller endotoxin under hela reningsprocessen. Företaget har också utvecklat en effektiv metod för att avlägsna endotoxiner, som erbjuder tre nivåer av endotoxinhalt: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg och ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma har en plasmidextraktionsservicelinje med hög genomströmning, som kan leverera 1 mg extraherade plasmider på så snabbt som en vecka. Som standard tillhandahåller den mer än sju kvalitetskontrolltester (QC) för att säkerställa leverans av högkvalitativa, högstandardiserade plasmider från flera perspektiv.

Vi söker också aktivt institutionella eller individuella globala partners. Vi erbjuder den mest konkurrenskraftiga ersättningen i branschen. Om du har några frågor är du välkommen att kontakta oss: [email protected]