Plasmid: Ett litet cirkelformigt DNA-molekyl med stor potential

Plasmider, små cirkulära DNA-molekyler, fungerar som viktiga vektorer för DNA-rekombination inom molekylärbiologisk forskning och genterapi. Utdelningen och kvaliteten på plasmider är avgörande, där superkedjade proportioner och endotoxininnehåll är två viktiga faktorer som påverkar plasmidkvaliteten.

Plasmidunderityper

Plasmider extraherade från Escherichia coli (E. coli) finns i olika underityper: superkedjade (SC), öppna cirkulära (OC) och linjära (L) former (figur 1). Av dessa utvisar superkedjade plasmider utmärkt stabilitet, antigenicitet och hög transfektions- och expressions-effektivitet.

Figur 1. Schematisk diagram över vanliga plasmidunderityper

Vid agarosgelelektrofores av plasmid-DNA är migrationshastighetsordningen superkedjad DNA, linjär DNA och öppen cirkulär DNA (figur 2).

Figur 2. Agarosgelelektrofores migrationsmönster för olika plasmidunderityper

Yaohai Bio-Pharma har kontinuerligt förbättrat sina processer och tekniker för att säkerställa att superkolvandelen av transfectionsgradiga plasmider är ≥85% och att den av forskningsgradiga plasmider är ≥50%. Följande är ett fallsexempel (figur 3), där agarosgelelektrofores kombineras med Gel-Pro Analyzer-programvara för att upptäcka superkolvandelen.

Figur 3. Kvalitetskontrollresultat av plasmids superkolvandel

Endotoxin

Endotoxin, en komponent i cellväggen hos Gram-negativa bakterier, består främst av lipopolysaccharid A (LPS-A) som dess giftiga komponent. Under extraktion av plasmider släpps endotoxin ut i lösningen för lysning, vilket påverkar allvarligt effektiviteten vid plasmidtransfektion till celler. Dessutom kan det aktivera icke-specifika immunsvar i cellerna, vilket leder till falska positiva resultat i experimenten.

Yaohai Bio-Pharma använder en "icke-introduktion" och "hög borttagning"-metod, strängt kontrollerar användningen av reagenser och material som innehåller endotoxin under hela reningsprocessen. Företaget har också utvecklat en effektiv metod för att ta bort endotoxin, och erbjuder tre nivåer av endotoxininnehåll: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg och ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma har en höghastighets tjänstlinje för plasmidextraktion, vilken kan leverera 1 mg extraherade plasmider inom en vecka. Som standard erbjuder den mer än sju kvalitetskontrolltester (QC) för att säkerställa leverans av högkvalitativa, högstandardplasmider från flera perspektiv.

Vi söker också aktivt globala partnerschaft med institutioner eller enskilda personer. Vi erbjuder den mest konkurrenskraftiga ersättningen inom branschen. Om du har några frågor, tveka inte att kontakta oss: [email protected]