Utforska den fascinerande världen av litiumkloridutfällningen

Litiumkloridfällning används i stor utsträckning för att separera RNA från lösning.

Här är uppdelningen av processen:

1. Provberedning: Börja med ett prov som innehåller RNA, som t.ex in vitro avskriftsblandning.

2. Tillsats av litiumklorid: Tillsätt en lämplig volym koncentrerad litiumkloridlösning till RNA-lösningen.

3. Inkubation: Efter tillsats av litiumklorid inkuberas lösningen vid låg temperatur, vanligtvis runt -20°C. Detta gör att RNA-molekyler fälls ut ur lösningen.

4. Centrifugering: Efter inkubation centrifugeras lösningen vid hög hastighet. Detta separerar det utfällda RNA:t från resten av lösningen, som innehåller föroreningar.

5. Tvättning: När centrifugeringen är klar, avlägsna försiktigt supernatanten men utan att störa RNA-utfällningen. Tvätta RNA-partiklarna med kall etanol eller isopropylalkohol för att avlägsna eventuella kvarvarande föroreningar.

6. RNA-återsuspension: Efter tvättning lufttorkas RNA-fällningen kort och återsuspenderas sedan i en lämplig buffert, såsom TE-buffert (Tris-EDTA-buffert) eller destillerat vatten. Varsam pipettering eller virvelströmmar kan vara nödvändiga för att återsuspendera RNA:t.

7. Kvantifiering och analys: Slutligen kvantifieras det isolerade RNA:t med ultraviolett spektroskopi eller fluorescensmetod. Detta bestämmer koncentrationen och renheten av RNA-provet, vilket är viktigt för nedströmsapplikationer såsom LNP-inkapsling och celltransfektion.

Yaohai Bio-Pharma är skicklig på att använda litiumkloridutfällningsmetoden i produktionsprocessen eftersom den är enkel, låg kostnad och producerar högkvalitativt RNA som är lämpligt för en mängd olika molekylärbiologiska tillämpningar. Det är dock viktigt att optimera förhållandena (t.ex. litiumkloridkoncentration, inkubationstid, centrifugeringshastighet) för att uppnå bästa resultat för ett visst prov.

Med vår kraftfulla och egenutvecklade RNASci-plattform tillhandahåller vi även skräddarsydda RNA-syntestjänster, såväl som mRNA (upp till 10 kb), circRNA (upp till 4 kb) och LNP-katalogprodukter. Vi har etablerat en komplett uppsättning mRNA/circRNA-syntesteknologier för att tillhandahålla högkvalitativt RNA, såsom sekvensdesign och optimering, IVT, cirkularisering, rening och LNP-inkapsling. Alla produkter släpps under de stränga kvalitetskontrollstandarderna.

Yaohai Bio-Pharma är den första och största biologiska CRDMO dedikerad till mikrobiella uttryckssystem i Stor-Kina. Vi erbjuder skräddarsydda helhetslösningar eller fristående tjänster som sträcker sig från RNA-syntes, stamkonstruktion och konstruktion, uppströms och nedströms processutveckling, till tillverkning av läkemedelssubstanser på GMP- eller icke-GMP-nivå, och fyllnings- och efterbehandlingstjänster för olika modaliteter, såsom mRNA, circRNA, plasmid-RNA, rekombinanta proteiner, peptider, enzymer, enkeldomänantikroppar (sdAbs) och VLP:er. Vi är fast beslutna att möta globala kunders kliniska och kommersiella behov av biologiska läkemedel, vacciner och diagnostik för både humant och veterinärt bruk.

Yaohai Bio-Pharma söker också aktivt efter institutionella eller individuella globala partners och erbjuder den mest konkurrenskraftiga ersättningen i branschen. Om du har några frågor är du välkommen att kontakta oss: [email protected]