Plasmid: O mică moleculă circulară de ADN cu un potențial mare

Plasmidele, molecule de ADN circulare mici, servesc ca vectori esențiali pentru recombinația ADN în cercetarea de biologie moleculară și terapia genetică. Rata de producție și calitatea plasmidelor sunt cruciale, proporția de supercoile și conținutul de endotoxine fiind două factori importanți care afectează calitatea plasmidelor.

Subtipuri de plasmide

Plasmidele extrase din Escherichia coli (E. coli) există în diverse subtipuri: forme supercoilate (SC), circulare deschise (OC) și liniare (L) (Figura 1). Printre acestea, plasmidele supercoilate prezintă o stabilitate excelentă, antigenicitate și o eficiență ridicată de transfecție și expresie.

Figura 1. Diagramă schematică a subtipurilor comune de plasmide

În electrofoza pe gel de agaroză a ADN-ului plasmidial, ordinea vitezei de migrație este ADN supercoilat, ADN liniar și ADN circular deschis (Figura 2).

Figura 2. Model de migrație la electrofoza pe gel de agaroză al diferitelor subtipuri de plasmide

Yaohai Bio-Pharma a îmbunătățit continuu procesele și tehniciile sale pentru a se asigura că proporția supercoilată a plasmidelor de grad transfecție este ≥85% și cea a plasmidelor de cercetare este ≥50%. Următoarea este o demonstrație a cazului (Figura 3), unde electrophoreza în gel de agaroză este combinată cu software-ul Gel-Pro Analyzer pentru a detecta proporția supercoilată.

Figura 3. Rezultatele Inspectării Calitativă a Proporției Supercoilată a Plasmidelor

Endotoxin

Endotoxina, un component al peretelui celular al bacteriilor Gram-negative, constă în principal din lipopolisacarida A (LPS-A) ca componentă toxică. În timpul extragerii plasmidei, endotoxina este eliberată în soluția de lizare, afectând grav eficiența transfecției plasmidei în celule. De asemenea, poate activa răspunsurile imune ne-specific ale celulelor, ducând la rezultate false pozitive în experimente.

Yaohai Bio-Pharma adoptează o abordare de "ne-introducere" și "eliminare înaltă", controlând strict utilizarea reagentelor și materialelor care conțin endotoxine în întreaga procesă de purificare. Compania a dezvoltat de asemenea o metodă eficientă de eliminare a endotoxinelor, oferind trei niveluri de conținut al endotoxinelor: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg și ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma deține o linie de servicii de extracție a plasmidilor cu un debit ridicat, fiind capabilă să livreze 1 mg de plasmide extrase în termen de o săptămână. Implicit, efectuează mai mult de șapte teste de control calitativ (QC) pentru a se asigura că sunt livrate plasmide de înaltă calitate și standard în mai multe perspective.

Cautăm activ parteneri instituționali sau individuali la nivel global. Ofertăm cea mai competitivă compensație din industrie. Dacă aveți întrebări, nu ezitați să ne contactați: [email protected]