Plasmidă: o moleculă circulară mică de ADN cu potențial mare

Plasmidele, molecule circulare mici de ADN, servesc ca vectori esențiali pentru recombinarea ADN-ului în cercetarea în biologie moleculară și terapia genică. Randamentul și calitatea plasmidelor sunt cruciale, proporția supercoilată și conținutul de endotoxină fiind doi factori importanți care afectează calitatea plasmidei.

Subtipuri de plasmide

Plasmidele extrase din Escherichia coli (E. coli) există în diferite subtipuri: forme supercoilate (SC), circulare deschise (OC) și liniare (L) (Figura 1). Printre ele, plasmidele supercoilate prezintă stabilitate excelentă, antigenicitate și eficiență ridicată de transfecție și expresie.

Figura 1. Diagrama schematică a subtipurilor comune de plasmide

În electroforeza pe gel de agaroză a ADN-ului plasmidic, ordinea vitezei de migrare este ADN supercoiled, ADN liniar și ADN circular deschis (Figura 2).

Figura 2. Modelul de migrare prin electroforeză cu gel de agaroză a diferitelor subtipuri de plasmide

Yaohai Bio-Pharma și-a îmbunătățit continuu procesele și tehnicile pentru a se asigura că proporția supercoiled a plasmidelor de grad de transfecție este ≥85% și cea a plasmidelor de grad de cercetare este ≥50%. Următoarea este o demonstrație de caz (Figura 3), în care electroforeza pe gel de agaroză este combinată cu software-ul Gel-Pro Analyzer pentru a detecta proporția supercoilată.

Figura 3. Rezultatele inspecției calității proporției supercoilate cu plasmide

Endotoxina

Endotoxina, o componentă a peretelui celular al bacteriilor Gram-negative, constă în principal din lipopolizaharida A (LPS-A) ca componentă toxică. În timpul extracției plasmidei, endotoxina este eliberată în soluția de liză, afectând grav eficiența transfecției plasmidei în celule. În plus, poate activa răspunsuri imune nespecifice în celule, ducând la rezultate false pozitive în experimente.

Yaohai Bio-Pharma adoptă o abordare de „neintroducere” și „eliminare ridicată”, controlând strict utilizarea reactivilor și a materialelor care conțin endotoxină pe tot parcursul procesului de purificare. Compania a dezvoltat, de asemenea, o metodă eficientă de îndepărtare a endotoxinelor, oferind trei niveluri de conținut de endotoxine: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg și ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma deține o linie de servicii de extracție a plasmidelor de mare capacitate, capabilă să livreze 1 mg de plasmide extrase într-o săptămână. În mod implicit, oferă mai mult de șapte teste de control al calității (QC) pentru a asigura livrarea de plasmide de înaltă calitate, la standarde înalte din mai multe perspective.

De asemenea, căutăm în mod activ parteneri instituționali sau individuali la nivel mondial. Oferim cea mai competitivă compensație din industrie. Dacă aveți întrebări, vă rugăm să nu ezitați să ne contactați: [email protected]