Controlul calității și aplicațiile proteinelor recombinante

Controlul calității proteinelor recombinante este crucial pentru fiabilitatea și reproductibilitatea datelor experimentale. Fiecare pas, de la proiectarea proiectului la procesul de producție, necesită strategii stricte de control al calității.

Strategii de control al calității

Sectorul industrial aderă la proceduri de operare standard stricte, în timp ce comunitatea academică trebuie să îmbunătățească cunoștințele profesionale pentru a îmbunătăți reproductibilitatea datelor. Proteinele cu aplicații biologice specifice sau caracteristici biochimice necesită strategii personalizate de control al calității (QC).

Exemple și soluții provocatoare

Yaohai Bio-Pharma se mândrește cu o experiență vastă în producerea și purificarea proteinelor recombinate, împreună cu o echipă de experți, asigurându-se că producția ta de proteine ​​este finalizată cu puritate ridicată. Folosind experiența noastră din sute de proiecte, Yaohai rezumă cu amabilitate cum să optimizați purificarea proteinelor.

Proteine ​​care leagă acidul nucleic: Sunt necesare etapele de îndepărtare a acidului nucleic, cum ar fi nucleazele sau precipitarea PEI. Raportul A260nm/A280nm este monitorizat pentru a detecta contaminarea cu acid nucleic.

Mouse Ferritin Heavy Chain 1 pentru cryo-EM: Etapele de purificare trebuie optimizate și trebuie adăugate nucleaze pentru a reduce raportul A260nm/A280nm și pentru a asigura puritatea proteinelor.

Proteina himerică umană dsRBEC: Liza celulară folosește un tampon care conține uree, urmată de repliere pe coloană pentru a obține proteine ​​active funcțional.

Proteinele care leagă cationi divalenți: În timpul exprimării și purificării trebuie adăugați cationi divalenți specifici, iar agenții de chelare trebuie evitați.

Proteine ​​fier-sulf: Imidazolul trebuie evitat pentru a preveni perturbarea grupului [2Fe ± 2S], asigurând plierea și funcționarea corectă a proteinelor.

Fragment solubil de LLT1: Designul mutant optimizează formarea de legături disulfură și plierea proteinelor, rezultând proteine ​​stabile și cu randament ridicat.

Cristalizarea kinazei CLK1: Co-exprimarea cu λ-fosfataza elimină fosfații din situsurile de fosforilare, iar cromatografia de excludere dimensională (SEC) și cromatografia de schimb anionic sunt utilizate pentru a obține CLK1 omogen fără fosforilare heterogenă.

Proteine ​​pentru utilizarea antigenului: Evaluarea purității este necesară pentru a evita contaminarea cu proteine ​​foarte imunogene. Pentru anticorpii epitop structurali, conformația tridimensională a antigenului trebuie menținută.

Proteine ​​predispuse la agregare: Strategii precum screeningul diferitelor tulpini și scăderea temperaturilor de cultivare sunt folosite pentru a limita problemele de agregare și sunt concepute strategii de purificare rapidă.

Îndepărtarea endotoxinelor: Metode precum cromatografia cu sarcină pozitivă și cromatografia de afinitate cu ligand policationi elimină endotoxinele, asigurându-se că nivelurile de LPS sunt sub limitele de aplicare.

Complexe de proteine: Subunitățile sunt exprimate separat și asamblate in vitro sau co-exprimate pentru a forma complexe funcționale. Integritatea complexului este evaluată prin omogenitate și masa molară.

Concluzie

Producția de proteine ​​începe cu design strategic, luând în considerare trăsăturile și aplicațiile biochimice. În timpul expresiei, purificării și QC, condițiile și metodele sunt optimizate pentru stabilitate, neagregare și stare nativă. Proteinele purificate servesc diverse utilizări în aval, cum ar fi caracterizarea biofizică.

De asemenea, Yaohai Bio-Pharma caută în mod activ parteneri instituționali sau individuali la nivel mondial și oferă cea mai competitivă compensație din industrie. Dacă aveți întrebări, vă rugăm să nu ezitați să ne contactați: [email protected]