Het benutten van bacteriële IB's voor de productie van recombinante eiwitten

Bacteriële insluitlichamen (IB's) in recombinante eiwitproductie bieden gemakkelijke scheiding, stabiliteit, hoge expressie en afbraakresistentie, en kunnen toxische eiwitten met biologische activiteit tot expressie brengen. Vooruitgang in het begrip van IB opent nieuwe wegen voor verwerking, met uitdagingen en oplossingen die zijn geïdentificeerd voor toekomstig onderzoek.

Yaohai Bio-Pharma heeft meer dan 10 jaar ervaring in de productie van recombinante eiwitten met behulp van microbiële fermentatiesystemen. Ons sterke en professionele team van experts garandeert dat het gezuiverde refolded eiwit 1.5 g/L kan bereiken.

Verwerkingsstrategieën en uitdagingen van IB's

Scheiding van IB's Methoden voor IB-scheiding zijn afhankelijk van de structuur-functie van eiwitten en de toepassingsbehoeften. Fysieke methoden verstoren cellen, maar kunnen de kwaliteit van eiwitten schaden. Enzymatische methoden verbeteren de zuiverheid, maar zijn kostbaar. Zachte detergenten werken voor klassieke IB's, niet voor niet-klassieke. pH-controle is cruciaal voor oplosbaarheid. Elektroforese-afzetting is eenvoudig, maar niet schaalbaar voor biologisch actieve eiwitten.

Oplosbaarheid van IB's Het oplossen van IB's is cruciaal voor het terugwinnen van actieve eiwitten. Sterke denatureermiddelen beschadigen de oorspronkelijke structuur, terwijl niet-denatureermiddelen niet geschikt zijn voor klassieke IB's. Zachte solubilizers kunnen IB's oplossen terwijl ze de eiwitstructuur beschermen, maar niet alle eiwitten. Toekomstig werk heeft betere algoritmen nodig om solubilizers te selecteren.

Renaturatiestrategieën Proteïne-renaturatie is essentieel voor functionaliteit. In vitro-renaturatie kent uitdagingen. De keuze van solubilizers, proteïneconcentratie, omstandigheden en methoden beïnvloeden de uitkomst. Zachte solubilizers beschermen de oorspronkelijke structuur en verbeteren de kwaliteit. Matige concentraties en geoptimaliseerde omstandigheden verminderen aggregatie. Kolomgebaseerde methoden met monolithische matrices bieden een hogere zuiverheid en opbrengst.

Zuivering van gerenatureerde eiwitten Verdere zuivering scheidt verkeerd gevouwen van correct gevouwen eiwitten. Traditionele chromatografie heeft moeite met vergelijkbare eiwitten. Alternatieve methoden bieden voordelen, maar vereisen doeleiwitspecifieke selectie. Het ontwikkelen van een universele zuiveringsmethode blijft een uitdaging.

Conclusie

IB's bieden voordelen bij de productie van recombinante eiwitten, maar vormen uitdagingen bij de verwerking. Met een dieper begrip van de structuur-functie van eiwitten binnen IB's en vooruitgang in scheiding, solubilisatie, renaturatie en zuivering, kan high-throughput recovery van actieve eiwitten binnenkort worden bereikt. Dit zal de kosten verlagen en biofarmaceutisch R&D versnellen, wat de groei van de industrie stimuleert.

Yaohai Bio-Pharma is ook actief op zoek naar institutionele of individuele wereldwijde partners en biedt de meest concurrerende compensatie in de industrie. Als u vragen heeft, neem dan gerust contact met ons op: [email protected]

Voor meer informatie over Yaohai Bio-Pharma kunt u terecht op de website: www.yaohaibio-pharma.com