Pengeluaran Protein Recombinant: Strain E. coli Dilayan

Escherichia coli (E. coli) memainkan peranan penting dalam menghasilkan protein rekombinan dalam industri bi farmaseutikal, berkhidmat sebagai vektor ungkapan pertama untuk pengeluaran ubat biologi. E. coli mempunyai pertumbuhan pantas, manipulasi genetik yang mudah, dan sintesis pantas protein rekombinan di antara kelebihan lainnya. Pengubahsuaian meluas telah menjadikan E. coli pilihan terbaik untuk ungkapan protein, membawa kepada rekabentuk pelbagai strain E. coli yang direka.

Yaohai Bio-Pharma khusus dalam memberi perkhidmatan pengepalaan satu henti untuk penapisan, pemurnian, pembangunan proses formulasi, dan pengeluaran siri biopharmaceutical menggunakan sistem ungkapan E. coli. Mengenai pengalaman luas Yaohai, kami menyimpulkan bahawa empat strain E. coli yang biasa digunakan untuk pengeluaran protein rekombinan dan ciri-cirinya.

Strain BL 21

Diperoleh daripada garis keturunan E. coli B, strain BL21 tidak mempunyai protease Lon dan protease membran luar OmpT. Protease Lon terutamanya memburuk protein eksogen, manakala OmpT terutamanya memburuk protein matriks ekstraseluler. Kehadiran kedua-dua protease utama ini boleh secara berkesan menghalang pemburukan protein rekombinan.

Strain Origami

Strain Origami, sebuah turunan daripada E. coli K-12, mempunyai mutasi dalam tioridoksin reductase dan glutathione reductase, yang memudahkan pembentukan protein yang dilipat dengan betul mengandungi ikatan disulfida dan meningkatkan kelarutan protein. Strain Origami, termasuk Origami, Origami 2, dan Origami B, sesuai untuk ungkapan protein aktif yang mengandungi ikatan disulfida.

Strain SHuffle

Ketegangan SHuffle mengungkapkan secara konstitutif isomerase ikatan disulfida DsbC di sitoplasma, mempromosikan pembentukan ikatan disulfida yang betul dalam protein yang teroksida. Ia juga berfungsi sebagai chaperon molekular untuk pelipatan protein, membantu dalam pembentukan konformasi yang betul.

Ketegangan Rosetta

Ketegangan Rosetta melengkapkan E. coli dengan tRNA yang sepadan dengan kodon jarang, bertujuan untuk meningkatkan tahap ungkapan gen eksogen, terutamanya gen eukariotik, dalam sistem prokariotik. Terbitan dari BL21 dan membawa plasmid pRARE yang kebal kepada kloramfenikol, ia melengkapkan enam tRNA yang sepadan dengan kodon jarang (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, dan GGA) yang asalnya tidak hadir dalam E. coli, menyediakan pengungkapan protein yang lebih "universal".

Kesimpulan

Tiga faktor utama untuk pengeluaran yang berjaya bagi protein rekombinan adalah hos, vektor, dan keadaan budaya. Berdasarkan pemahaman tentang sifat fizikokimia protein rekombinan, kelebihan unik setiap strain, dan keperluan khusus eksperimen, hos yang paling sesuai harus dipilih. Selain itu, faktor seperti vektor plasmid, suhu, dan pencetus harus dioptimumkan untuk meningkatkan ungkapan protein.

Yaohai Bio-Pharma juga aktif mencari rakan global, sama ada institusi atau perorangan, dan menawarkan ganti rugi paling kompetitif dalam industri. Jika anda mempunyai sebarang soalan, sila hubungi kami: [email protected]