mRNA disintesis melalui transkripsi in vitro (IVT) dari DNA plasmid (pDNA) yang telah dilinierkan. Beberapa produk sampingan juga terbentuk semasa prosedur IVT, termasuk RNA dua jalur (dsRNA) yang dikenal sebagai pencetus utama untuk laluan imun bawaan. Ia amat penting untuk membuang kotoran dan mendapatkan hasil tinggi daripada mRNA bersih untuk penyelidikan mRNA in vitro/vivo dan aplikasi terapi.
Yaohai Bio-Pharma telah membina satu set teknologi sintesis mRNA untuk menyediakan mRNA yang sangat bersih , seperti reka bentuk dan optimasi urutan, IVT, pemurnian, pelaruan, dan pengekapan dalam nanopartikel lemak (LNP). Semua produk dikeluarkan di bawah piawaian kawalan kualiti yang ketat. Kromatografi kekerabatan (AC), berdasarkan kepada interaksi yang kuat dan pilih antara poliA 3′ ekor mRNA dengan fasa tetap oligo dT, adalah strategi pemurnian yang cekap dan boleh diperbesar untuk mRNA.
Hasil Kerja
| Produk |
MRNA Secara Khas Bersih Tinggi
|
| Panjang |
100~10,000 nukleotida |
| Kandungan RNA |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Kekalahan |
A260/A280 |
| Kenalpasti dan Keadaan Kebersihan |
Elektroforesis Gel Agarosa (AGE)
Elektroforesis Kapilari (CE)
|
| Buffer |
Air bebas RNase (cairan) |
| Penghantaran |
Hantar dengan ais kering; atau pada suhu sekitar |
| Penyimpanan |
● Cecair, pada atau di bawah -20°C
● Serbuk liofil, pada 4°C
|
| PERMOHONAN |
Pembangunan formulasi LNP,
Ujian berdasarkan sel, Eksperimen haiwan
|
Pilihan Penyesuaian Lain
| 5' Cap |
● Tidak berpenutup
● Cap0, berpenutup bersamaan
● Cap1, berpenutup bersamaan
● Penutupan enzymatik
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Urutan UTR semula jadi
● Urutan UTR Mutan/Pelakon
|
| ekor PolyA 3' |
● ekor 100A ~120A (dianjurkan)
● Ekor polyA tersegmen
● Ekor suai tersuai lain
|
| Nukleosida dimodifikasi |
● Asas tidak dimodifikasi,
● Pseudouridine (Ψ),
● N1-Metilpseudouridine (N1Ψ),
● 5-metilcitosin (m5C),
● 5-metiluridin (m5U),
● 5-metoksiuridin (5moU),
● 2-tiouridin (s2U),
● 2′-O-metil-U
● Lain-lain
|
Kajian Kes
Kami telah mengembangkan proses pemurnian kromatografi multi-tapak dan menyediakan mRNA dengan keadaan tinggi dan integriti (> 95%).
Kajian mRNA dengan kepuretan tinggi (＞98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
