Rekombinantinių Baltymų Gamyba: Inžinieriniai E. coli Rūšys

Escherichia coli (E. coli) žaidė svarbų vaidmenį biomedicinos pramone, gamindama rekombinantinius baltymus, ir buvo pirmasis išraiškos vektorius biologinio gydymo gamybai. E. coli yra greitai auganti, lengvai genetiškai modifikuojama ir gali greitai sintezuoti rekombinantinius baltymus, tarp kitų privalumų. Didelės modifikacijos padarė E. coli optimaliu pasirinkimu baltymų išraiškai, o tai pritraukė įvairių inžinerinių E. coli širasų kūrimą.

Yaohai Bio-Pharma specializuojasi vieno langelio išorinėse paslaugose, susijusiose su fermentacijos, šalinimo, formulavimo procesų kūrimu ir gamyba naudojant E. coli išraiškos sistemas. Atsižvelgiant į Yaohai patirtį, apibendrina, kad rekombinantiniams baltymams gaminti naudojamos keturios populiarios E. coli širasys ir jų ypatybės.

BL 21 širas

Išvesta iš E. coli B linijos, BL21 rasa neturi Lon proteazės ir išorinės membranos proteazės OmpT. Lon proteazė pagrindiniu būdu degeneruoja išorinesis baltymus, o OmpT pagrindiniu būdu degeneruoja ekstracelulinio matricos baltymus. Šių dviejų svarbių proteazės stokos gali efektyviai užkirsti kelią rekombinantinių baltymų degradacijai.

Origami rasa

Origami rasa, E. coli K-12 linijos išvestinė, turi mutacijas tioredoxino reduktase ir glutatono reduktase, kurios skatina teisingai susipjovusių disulfidinių jungčių turinčių baltymų formavimąsi ir patobulina baltymų sprendžiamumą. Origami rasa, įskaitant Origami, Origami 2 ir Origami B, yra tinkamos aktyviesiems disulfidinių jungčių turinčių baltymų išraiškai.

SHuffle rasa

SHuffle rūšis konstitutyviai išsisklaido disulfidinio jungiklio izomerezą DsbC citoplazmoje, skatindama teisingų disulfidinių ryšių formavimą oksiduotuose baltymuose. Ji taip pat veikia kaip molekulinis švirkštis baltymų sudedamasis procese, padedant formuoti teisingą konformaciją.

Rosetta rūšis

Rosetta rūšis papildo E. coli tRNA, atitinkančias retus kodonus, siekdama pagerinti endogeninių genų, ypač eukariotinių genų, išraiškos lygį prokariotiniuose sistemose. Išvesta iš BL21 ir nešanti chloramfenikolo atsparaus pRARE plazmido, ji papildo šešis tRNA, atitinkančius retus kodonus (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC ir GGA), kurie pradinėje E. coli buvo nepateikiami, suteikiant daugiau "universalųjų" baltymų išraišką.

Išvada

Tris pagrindiniais veiksmais sėkmingam rekombinantinių baltymų gamybai yra giminys, vektorius ir kultūros sąlygos. Remiantis supratimu apie rekombinantinių baltymų fizikines ir cheminės savybes, kiekvienos rūšies unikalias privalumus ir eksperimento specifinius poreikius, turėtų būti pasirinktas geriausias tinkamas giminys. Be to, reikia optimizuoti plazmidinius vektorius, temperatūrą ir induktorius, kad būtų padidinta baltymų ekspresija.

Yaohai Bio-Pharma taip pat aktyviai ieško visuotinių partnerių, institucijų ar asmenų, ir siūlo geresnį nei konkurentai atlygį šioje srityje. Jei turite klausimų, prašome ją kreiptis: [email protected]