Monoklonal antikroppsproduktion i E. coli: framsteg och framtidsutsikter

Monoklonala antikroppar (mAbs), som är lösliga glykoproteiner på cirka 150 kDa bestående av tunga och lätta kedjor, används i stor utsträckning vid behandling av cancer och autoimmuna sjukdomar. Under de senaste åren har produktionsmetoderna för mAbs och deras derivat blivit olika, med Escherichia coli (E.coli) framträder som en viktig värd för produktion av antikroppsfragment.

När det gäller produktion av mAbs utmärker Yaohai Bio-Pharma med rik FoU-erfarenhet. Med en mogen plattform, avancerad utrustning och innovativ heltekologisk uttrycksteknik erbjuder Yaohai one-stop-tjänster från cellbankskonstruktion till fill&finish, helt anpassade mAbs för kunder.

Framställningsmetoder för mAbs i E. coli

E. coli erbjuder snabb tillväxt, låga kostnader, enkel drift och flexibilitet i uttryck inom cytoplasman, periplasman eller odlingsmediet. I E. coli kategoriseras antikroppsproduktion huvudsakligen i periplasmatisk, cytoplasmatisk och semioxiderad cytoplasmisk produktion, såväl som cellfri proteinsyntes (CFPS) system. Periplasmatisk produktion har uppnått höga utbyten av funktionellt fullängds immunglobulin G (FL-IgG) genom optimerat uttryck och sekretionsbalans. Cytoplasmatisk produktion står inför utmaningar på grund av den reducerande miljön, men funktionell FL-IgG har framgångsrikt uttryckts av tekniska stammar för att skapa en oxidativ miljö. CFPS-systemet har uppnått effektiv antikroppsproduktion genom att justera translationsinitieringsregioner och lägga till chaperoneproteiner.

Antikroppskarakterisering och kvalitetskontroll

Kvalitetskontroll av antikroppar inkluderar biokemiska, biofysiska och biologiska karakteriseringar. Biokemisk karakterisering analyserar bland annat antikroppsstruktur, sekvens och glykosylering. Biofysisk karakterisering utvärderar homogenitet, löslighet och stabilitet. Biologisk karakterisering validerar antikroppsbioaktivitet, inklusive ADCC och CDC, bland andra. Även om deglykosylerade antikroppar producerade i E. coli saknar vissa Fc-effektorfunktioner, har studier visat att deras stabilitet liknar den för glykosylerade antikroppar och de uppvisar liknande terapeutisk effekt under testade förhållanden.

För att återställa eller förstärka immuneffekterna av deglykosylerade antikroppar kan Fc-domäner konstrueras. Till exempel kan mutanter som binder till FcɣRI screenas för att förbättra ADCC-effektorfunktionen. Dessa konstruerade antikroppar visar signifikanta biologiska effekter och terapeutisk potential både in vitro och in vivo.

Slutsats

Sammanfattningsvis har produktionen av deglykosylerade antikroppar i E. coli gjort viktiga framsteg inom området antikroppsproduktion, vilket minskar kostnaderna och förbättrar kvaliteten. Även om de saknar vissa Fc-effektorfunktioner, uppvisar de genom teknisk design förbättrade effektorfunktioner och terapeutisk potential. Det förväntas att fler deglykosylerade antikroppar producerade i E. coli kommer att gå in i kliniska studier i framtiden.

Vi söker också aktivt institutionella eller individuella globala partners. Vi erbjuder den mest konkurrenskraftiga ersättningen i branschen. Om du har några frågor är du välkommen att kontakta oss på [email protected]