Monoklonala antikropparproducering i E. coli: Förbättringar och möjligheter

Monoklonala antikroppar (mAbs), som är lösliga glykoproteiner av ungefär 150 kDa och består av tyngre och lättare kedjor, används alltmer inom behandling av cancer och autoimmune sjukdomar. Under de senaste åren har produktionsmetoderna för mAbs och deras derivat blivit mer mångsidiga, där Escherichia coli ( E. coli ) har kommit fram som en viktig värd för produktion av antikroppsfragment.

Vid produktion av mAbs står Yaohai Bio-Pharma ut med rika erfarenheter inom forskning och utveckling. Med ett komplett inrättat plattformssystem, modern utrustning och innovativ full-ekologisk expressions teknik erbjuder Yaohai totala tjänster från cellbankskonstruktion till fyllning och slutförande, fullständigt anpassade mAbs för klienter.

Produktionsmetoder för mAbs i E. coli

E. coli erbjuder snabb tillväxt, låga kostnader, enkel hantering och flexibilitet i expression inom cytoplasman, periplasman eller kulturmiljön. Inom E. coli delas antikroppstillverkning främst in i periplasmisk, cytoplasmisk och delvis oxidativ cytoplasmisk production, samt cellfri protein syntes (CFPS)-system. Periplasmisk production har uppnått höga utbyten av funktionsdugliga fullständiga immunoglobulin G (FL-IgG) genom optimerad expression och sekretionsbalans. Cytoplasmisk production möter utmaningar på grund av den reducerande miljön, men funktionell FL-IgG har framgångsrikt exprimerats genom att modifiera stammar för att skapa en oxidativ miljö. CFPS-systemet har uppnått effektiv antikroppstillverkning genom att justera translateringsinitieringsregioner och lägga till chaperonprotein.

Antikroppskaraktärisering och kvalitetskontroll

Kvalitetskontroll av antikroppar omfattar biokemiska, biofysikaliska och biologiska karakteriseringar. Biokemisk karakterisering analyserar antikroppars struktur, sekvens och glykosylation bland annat. Biofysikalisk karakterisering utvärderar homogenitet, löslighet och stabilitet. Biologisk karakterisering validerar antikroppars bioaktivitet, inklusive ADCC och CDC bland annat. Även om deglykosylerade antikroppar producerade i E. coli saknar vissa Fc-effektorfunktioner har studier visat att deras stabilitet är liknande den hos glykosylerade antikroppar och att de visar liknande terapeutisk effekt under testerade förhållanden.

För att återställa eller förstärka immuneffekterna hos deglykosylerade antikroppar kan Fc-domäner konstrueras. Till exempel kan mutanterna som binder till FcɣRI skrivas ut för att förstärka ADCC-effektorfunktionen. Dessa konstruerade antikroppar visar betydande biologiska effekter och terapeutisk potential både in vitro och in vivo.

Slutsats

Sammanfattningsvis har produktionen av deglykosylerade antikroppar i E. coli gjort viktiga framsteg inom området för antikroppsfabrikation, vilket har minskat kostnaderna och förbättrat kvaliteten. Trots att de saknar vissa Fc-effektorfunktioner visar de förbättrade effektorfunktioner och terapeutisk potential genom teknisk design. Det förväntas att fler deglykosylerade antikroppar producerade i E. coli kommer att gå in i kliniska studier i framtiden.

Vi söker också aktivt institutionella eller enskilda globala partner. Vi erbjuder den mest konkurrenskraftiga ersättningen i branschen. Om du har några frågor, tveka inte att kontakta oss på [email protected]