LNP Lipid Composition Identifiera och kvantitet
Betydelsen av LNP-lipidsammansättningsanalys
Lipidnanopartiklar (LNP), innefattande katjonisk lipid, kolesterol, fosfolipid och PEG-konjugatlipid, fungerar som framträdande leveranssystem för mRNA-läkemedelsprodukter. Stabiliteten och dubbelskiktsfluiditeten hos LNP beror på egenskaperna och innehållet hos de olika lipiderna som används i formuleringssystemet. Lipidernas sammansättning är mycket viktig för hur väl LNP levererar läkemedel.
Yaohai-BioPharma tillhandahåller lösningar för att identifiera och kvantifiera mRNA-LNP-lipidkompositionen med hjälp av högpresterande vätskekromatografi med laddad aerosoldetektion (HPLC-CAD).
Regulatoriska krav för lipidsammansättning
Enligt WHO:s reglerande överväganden, "Den slutliga sammansättningen av vaccinet, inklusive lipiderna, bör beskrivas tillsammans med mängden av komponenterna i varje presentation."
Analytisk metod
Analys |
Metoder |
Lipidkomposition |
HPLC kombinerat med Corona Charged Aerosol Detector (CAD) |
Tillvägagångssätt
Steg 1. Lipidprovberedning
Valet av spädningsmedel är av största vikt för analysen av lipidkomponenter i mRNA-LNP-läkemedelsprodukter. Spädningsmedlet bör effektivt lösa upp varje lipidkomponent och störa alla interaktioner mellan lipider och inkapslat mRNA. Potentiella utspädningsmedel omfattar etanol, etanol/dimetylsulfoxid (DMSO), etanol/formamid, etanol/trietylaminacetat och andra.
Steg 2. HPLC-CAD
Omvänd fas vätskekromatografi (RP-HPLC) parat med en laddad aerosoldetektor (CAD) har införlivats i LNP-lipidsammansättningstestning. Med tanke på att lipider saknar kromoforer och inte absorberar ultraviolett (UV) strålning utan derivatisering, är förångning vanligtvis utmanande. CAD, som är känsligare, kan urskilja ett bredare spektrum av lipidinnehåll. Tidigare formulerades en ultrahögpresterande vätskekromatografi (UHPLC) kopplad med en laddad aerosoldetektor (CAD) metod och användes i lipidanalys för små störande RNA (siRNA) LNP-studier.
Steg 3. Dataanalys
Mängden av varje lipid i provet involverade beräkningar härledda från standardkurvan multiplicerad med utspädningsfaktorn. Denna process gav lipidhalten för varje beståndsdel i mRNA-LNP-provet.
Fall av LNP-lipidsammansättningsanalys med HPLC-CAD
Baserat på HPLC-CAD har Yaohai-BioPharma utvecklat en robust metod för analys av lipidkomponenter i mRNA-LNP. Denna metod validerades för att vara linjär, repeterbar, exakt, exakt och specifik för LNP-formuleringar, vilket kan stödja processutveckling, formuleringsutveckling, stabilitetstestning och mRNA-LNP-frisättning.
Kromatografisk profil av 4 lipider med Yaohai-BioPharmas HPLC-CAD-metod
Linjäriteten hos Yaohai-BioPharmas HPLC-CAD-metod (R2＞0.99)
EN
