Producția de Proteine Recombinante: Surse Inginerate E. coli

Escherichia coli (E. coli) a jucat un rol important în producerea de proteine recombinante în industria biofarmaceutică, fiind primul vector de expresie folosit pentru fabricarea medicamentelor biologice. E. coli se bucură de o creștere rapidă, manipulare genetică ușoară și sinteză rapidă a proteinelor recombinante, printre alte avantaje. Modificări extinse au făcut ca E. coli să fie o alegere optimală pentru expresia de proteine, ceea ce a dus la proiectarea diferitelor strainuri ingineriate ale lui E. coli.

Yaohai Bio-Pharma se specializează în oferirea de servicii de outsourcing complete pentru fermentare, purificare, dezvoltare a procesului de formulare și producție a unei serii de biomedicamente folosind sisteme de expresie E. coli. Având în vedere experiența vastă a lui Yaohai, am rezumat că patru strainuri comune ale lui E. coli sunt utilizate în producerea de proteine recombinante și caracteristicile acestora.

Strainul BL 21

Derivată din linajul E. coli B, ceașcă BL21 lipsește de proteaza Lon și de proteaza membranară externă OmpT. Proteaza Lon degradează în principal proteine exogene, în timp ce OmpT degradează în principal proteinele matricei extracelulare. Lipsa acestor două proteaze cheie poate preveni eficient degradarea proteinelor recombinante.

Ceașcă Origami

Ceașcă Origami, un derivat al E. coli K-12, prezintă mutații în tioreredoxin reductază și glutation reductază, care facilitează formarea proteinelor corect îndreptate care conțin legături disulfur, precum și creșterea solubilității proteinelor. Ceașca Origami, inclusiv Origami, Origami 2 și Origami B, sunt potrivite pentru expresia proteinelor active care conțin legături disulfur.

Ceașcă SHuffle

Șirom strainul SHuffle exprimă constitutiv izomeraza legăturilor disulfur DsbC în citoplasma, promovând formarea de legături disulfur corecte în proteinele oxidadă. Acesta funcționează și ca un chaperon molecular pentru încovoierile proteice, asistând în formarea conformației corecte.

Strainul Rosetta

Strainul Rosetta completează E. coli cu tRNA-uri corespunzătoare codonilor rari, având ca scop îmbunătățirea nivelului de expresie al genelor exogene, în special ale genelor eucariote, în sisteme procarionice. Derivat din BL21 și portând plasmidul pRARE rezistent la clorfenicol, acesta completează șase tRNA-uri corespunzătoare codonilor rari (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, și GGA) care lipsesc inițial în E. coli, oferind o expresie proteinică mai "universală".

Concluzie

Cele trei factori principali pentru o producție de succes a proteinelor recombinante sunt gazdă, vector și condițiile de cultură. Pe baza unei înțelegeri a proprietăților fizico-chimice ale proteinei recombinate, a avantajelor unice ale fiecărui strain și a nevoilor specifice ale experimentului, trebuie să se selecteze gazda cea mai potrivită. De asemenea, factorii precum vectorii plasmidici, temperatura și indusorii ar trebui optimizați pentru a îmbunătăți expresia proteică.

Yaohai Bio-Pharma caută, de asemenea, activ parteneri globali, instituționali sau individuali și oferă cele mai competitive compensații din industrie. Dacă aveți vreo întrebare, nu ezitați să ne contactați: [email protected]