Producția de proteine ​​recombinante: tulpini de E. coli produse prin inginerie

Escherichia coli (E. coli) a jucat un rol semnificativ în producerea de proteine ​​recombinate în industria biofarmaceutică, servind drept primul vector de expresie pentru fabricarea medicinei biologice. E. coli se mândrește cu creșterea rapidă, manipularea genetică convenabilă și sinteza rapidă a proteinelor recombinante, printre alte avantaje. Modificările extinse au făcut din E. coli o alegere optimă pentru exprimarea proteinelor, conducând la proiectarea diferitelor tulpini de E. coli.

Yaohai Bio-Pharma este specializată în furnizarea de servicii de outsourcing unice pentru fermentarea, purificarea, dezvoltarea procesului de formulare și producerea unei serii de produse biofarmaceutice folosind sisteme de exprimare a E. coli. În ceea ce privește experiența vastă a Yaohai, am rezumat că patru tulpini comune de E. coli sunt utilizate pentru producerea de proteine ​​recombinante și caracteristicile acestora.

Tulpina BL 21

Derivată din descendența E. coli B, tulpinii BL21 nu are proteaza Lon și proteaza membranei exterioare OmpT. Proteaza Lon degradează în principal proteinele exogene, în timp ce OmpT degradează în principal proteinele matricei extracelulare. Absența acestor două proteaze cheie poate preveni eficient degradarea proteinelor recombinante.

Tulpina origami

Tulpina Origami, un derivat al E. coli K-12, are mutații în tioredoxin reductază și glutation reductază, care facilitează formarea proteinelor pliate corect care conțin legături disulfură și sporesc solubilitatea proteinelor. Tulpina Origami, inclusiv Origami, Origami 2 și Origami B, sunt potrivite pentru exprimarea proteinelor active care conțin legături disulfură.

Tulpina amestecată

Tulpina Shuffle exprimă constitutiv izomeraza legăturii disulfurice DsbC în citoplasmă, promovând formarea legăturilor disulfurice corecte în proteinele oxidate. De asemenea, servește ca un chaperon molecular pentru plierea proteinelor, ajutând la formarea conformației corecte.

Tulpina Rosetta

Tulpina Rosetta suplimentează E. coli cu ARNt corespunzând codonilor rari, având ca scop îmbunătățirea nivelului de expresie al genelor exogene, în special al genelor eucariote, în sistemele procariote. Derivat din BL21 și purtând plasmida pRARE rezistentă la cloramfenicol, acesta suplimentează șase ARNt corespunzători codonilor rari (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC și GGA) absenți inițial în E. coli, oferind o expresie a proteinei mai „universală”.

Concluzie

Cei trei factori principali pentru producerea cu succes a proteinelor recombinante sunt gazda, vectorul și condițiile de cultură. Pe baza înțelegerii proprietăților fizico-chimice ale proteinei recombinante, a avantajelor unice ale fiecărei tulpini și a nevoilor specifice ale experimentului, ar trebui selectată cea mai potrivită gazdă. În plus, factori precum vectorii plasmidii, temperatura și inductorii ar trebui optimizați pentru a îmbunătăți expresia proteinei.

De asemenea, Yaohai Bio-Pharma caută în mod activ parteneri instituționali sau individuali la nivel mondial și oferă cea mai competitivă compensație din industrie. Dacă aveți întrebări, vă rugăm să nu ezitați să ne contactați: [email protected]