Explorăți Lumea Fascinantă a Precipitării cu Clorură de Litiu

Precipitarea cu clorură de litiu este folosită pe scară largă pentru separarea RNA-ului din soluție.

Iată descompunerea procesului:

1. Pregătirea eșantionului: Începeți cu un eșantion care conține RNA, cum ar fi in vitro amestec de transcripții.

2. Adăugarea clorurii de litiu: Adăugați un volum corespunzător de soluție concentrată de clorură de litiu în soluția de RNA.

3. Incubare: După adăugarea clorurii de litiu, soluția este incubată la o temperatură mică, de obicei în jurul lui -20°C. Acest lucru determină moleculele de RNA să se precipite din soluție.

4. Centrifugare: După incubare, soluția este centrifugată la o viteză ridicată. Acest lucru separă RNA-ul precipitat de restul soluției, care conține impurități.

5. Spălare: Odată ce centrifugarea este finalizată, scoateți cu grijă supernatantul fără a deranja precipitația de RNA. Spălați particulele de RNA cu etanol sau izopropil alcool rece pentru a elimina orice impurități rămase.

6. Rezuspensie RNA: După spălare, precipitatul de RNA este uscat rapid în aer și apoi este rezuspins într-un tampon potrivit, cum ar fi tamponul TE (tampon Tris-EDTA) sau apă distilată. Pipetarea ușoară sau curente eddy pot fi necesare pentru a rezuspinsa RNA cu adecvare.

7. Cuantificare și analiză: În sfârșit, RNA izolat este cuantificat prin spectrocopie ultravioletă sau metoda de fluorescență. Aceasta determină concentrația și pureitatea esantionului de RNA, ceea ce este important pentru aplicații ulterioare, cum ar fi incapsularea LNP și transfecția celulară.

Yaohai Bio-Pharma este experimentată în utilizarea metodei de precipitare cu clorură de litiu în procesul de producție, deoarece aceasta este simplă, de cost redus și produce un RNA de înaltă calitate, potrivit pentru o varietate de aplicații în biologia moleculară. Totuși, este important să se optimizze condițiile (de exemplu, concentrația de clorură de litiu, timpul de incubare, viteza de centrifugare) pentru a obține cele mai bune rezultate pentru un anumit esantion.

În baza platformei noastre puternice și proprii RNASci, oferim de asemenea servicii personalizate de sinteză a RNA, precum și produse catalog mRNA (până la 10 kb), circRNA (până la 4 kb) și LNP. Am dezvoltat un set complet de tehnologii de sinteză a mRNA/circRNA pentru a oferi RNA de înaltă calitate, cum ar fi proiectarea și optimizarea secvențelor, IVT, circularizare, purificare și incapsulare LNP. Toate produsele sunt lansate sub standarde stricte de control al calității.

Yaohai Bio-Pharma este prima și cea mai mare CRDMO biologică dedicată sistemelor de expresie microbienă din Marea Chineză. Ofertăm soluții personalizate complete sau servicii independente, care cuprind sinteza RNA, ingineria și construcția șirurilor, dezvoltarea procesului upstream și downstream, producția substanțelor medicamentoase la nivel GMP sau non-GMP, precum și servicii de umplere și ambalare pentru diferite modalități, cum ar fi mRNA, circRNA, plasmid RNA, proteine recombinante, peptide, enzyme, antibody single domain (sdAbs) și VLPs. Ne angajăm să îndeplinim nevoile clienților noștri globali în domeniul medicamentelor biologice, vaccinurilor și diagnosticului, atât pentru uz uman cât și veterinar.

Yaohai Bio-Pharma caută, de asemenea, activ parteneri instituționali sau individuali globali și oferă cele mai competitive compensații din industrie. Dacă aveți vreo întrebare, nu ezitați să ne contactați: [email protected]