Șabloane de plasmide ARNm: elemente cheie și strategii de proiectare

Crearea ARNm pentru vaccinuri sau terapii începe cu un șablon plasmid bine conceput. Iată un ghid rapid pentru elementele cheie și modul în care acestea sunt optimizate pentru succes.

Promotorul: Unde începe transcrierea

Promotorul T7 este cea mai populară alegere pentru pornirea sintezei ARNm. Secvența sa clasică, „TAATACGACTCACTATAGGG”, asigură o transcriere eficientă. De-a lungul timpului, oamenii de știință au dezvoltat variații precum șabloanele GG, AG și AT/AU pentru a lucra cu sisteme de plafonare avansate, cum ar fi CleanCap sau platformele ARN cu autoamplificare.

Linearizare: Tăierea plasmidei pentru precizie

Pentru a opri transscrierea la nesfârșit a plasmidei, trebuie tăiată la un anumit loc. Enzimele de tip IIS, cum ar fi BspQⅠ sau BsaⅠ, sunt perfecte pentru această activitate. Ei taie ADN-ul în afara secvenței lor de recunoaștere, fără a lăsa bucăți suplimentare în urmă și păstrând coada poliA crucială.

Planul ARNm: elemente de bază ale succesului

Secvența de ARNm include un capac 5’, regiuni netraduse (UTR), o secvență de codificare (CDS) și o coadă poliA. Iată cum este proiectată fiecare parte:

• UTR-uri: Acestea pot fi împrumutate din gene naturale foarte exprimate (cum ar fi cele din viruși) sau proiectate personalizat folosind algoritmi avansați pentru o performanță mai bună.
• CDS: Oamenii de știință proiectează mai întâi secvența proteinelor, apoi optimizează codul ADN pentru o exprimare eficientă.
• Coada PolyA: O întindere de 100-120 de adenine sau o versiune segmentată, cum ar fi 30A + Linker + 70A, asigură că ARNm rămâne stabil și funcțional.

Stăpânind aceste elemente, cercetătorii pot crea modele puternice de ARNm pentru orice, de la vaccinuri la terapii de ultimă oră. Viitorul medicinei începe aici!

Yaohai Bio-Pharma, este o întreprindere platformă specializată în servicii pentru sisteme de expresie microbiană. Bazându-se pe un deceniu de experiență, Yaohai a dezvoltat o suită cuprinzătoare de tehnologii conforme cu GMP pentru sintetizarea ARNm liniară și circulară, oferind produse ARN de înaltă calitate care cuprind proiectarea și optimizarea secvenței, sinteza genelor, transcripția in vitro (IVT), circularizarea, purificarea ARN și încapsularea LNP.

De asemenea, căutăm în mod activ parteneri instituționali sau individuali la nivel mondial. Oferim cea mai competitivă compensație din industrie. Dacă aveți întrebări, vă rugăm să nu ezitați să ne contactați: [email protected]