Evoluția terapiei genice: ADN nou și optimizare

În domeniul aplicațiilor ADN, ADN-ul plasmid (pDNA) a fost întotdeauna foarte favorizat datorită stabilității sale excepționale, ușurinței de producție, depozitare și transport. Cu toate acestea, pe măsură ce cercetarea științifică continuă să avanseze, au apărut treptat o serie de noi tipuri de ADN, cum ar fi ADN-ul Minicircle (mcDNA), ADN-ul Doggybone (dbDNA) și ADN-ul Close-Ended (ceDNA), deschizând noi căi pentru terapia genică. și alte domenii de ultimă oră.

mcDNA

mcDNA este derivat din procesul de recombinare a plasmidelor parentale, cu elemente bacteriene eliminate în timp ce păstrează structura circulară. Procesul său de preparare se bazează pe activități enzimatice specifice, cum ar fi integraza φC31, obținând o eficiență mai mare de recombinare. O caracteristică notabilă a mcDNA este lipsa de secvențe bacteriene, permițându-i să se bazeze pe purtători mici de ADN, îmbunătățind astfel expresia genelor.

dbDNA

dbDNA are o conformație dublu catenară închisă, prezentând bucle mici monocatenar la ambele capete și este complet lipsită de secvențe bacteriene și gene de rezistență la antibiotice. Dimensiunea sa mai mică facilitează livrarea mai ușoară în celule și nuclee, prezentând în același timp rezistență completă la nuclează. Forma inițială a dbDNA conține doar elementele necesare pentru expresia genelor, omițând secvențe inutile, posedând astfel capacități puternice de transfecție a genelor și niveluri mai ridicate de expresie a proteinelor.

ceDNA

ceDNA este un construct ADN dublu catenar, liniar, covalent, cu capăt închis, care conține gena țintă și alte elemente de reglare a expresiei. Capetele sale sunt repetiții terminale inversate (ITR), oferind o capacitate de construcție de mii de baze, depășind cu mult limitele vectorilor tradiționali ai virusului adeno-asociat (AAV). Structura ITR a ceDNA este crucială pentru intrarea în nucleu, iar modelul său de expresie este în concordanță cu epizomii neintegrați. În plus, procesul de preparare a ceDNA este rapid și rentabil, făcându-l potrivit pentru cercetarea terapiei genice în domenii precum bolile rare, vaccinurile și oncologia.

Optimizarea ADN-ului

În ceea ce privește optimizarea ADN-ului, cercetătorii sporesc expresia genelor transgenice prin optimizarea componentelor intrinseci ale ADN-ului plasmid. Simultan, markerii de selecție sunt înlocuiți, cum ar fi înlocuirea ampicilinei cu kanamicina, pentru a reduce riscurile autoimune. Mai mult, sistemul de selecție a zaharozei este, de asemenea, utilizat pentru a înlocui markerii de selecție tradiționali. În ceea ce privește optimizarea codonilor, cercetătorii îmbunătățesc nivelurile de expresie a proteinelor prin modificarea utilizării codonilor, luând în considerare pe deplin preferința gazdei pentru expresia secvenței genelor. În timpul procesului de optimizare, cercetătorii trebuie să acorde atenție, de asemenea, părtinirii codonilor, stabilității structurii secundare a ARNm, evitarea elementelor cu acțiune trans și situsurilor enzimelor de restricție și echilibrului conținutului GC.

Pe scurt, dezvoltarea de noi tipuri de ADN și optimizarea ADN-ului au oferit noi oportunități și provocări pentru domenii precum terapia genică. Yaohai Bio-Pharma a stabilit platforme de producție GMP atât pentru plasmide circulare, cât și pentru plasmide linearizate. De asemenea, Yaohai poate oferi dezvoltarea proceselor și optimizarea diferitelor tipuri de ADN, inclusiv aceste noi tipuri de ADN, îndeplinind diferitele nevoi ale clienților.

De asemenea, Yaohai Bio-Pharma caută în mod activ parteneri instituționali sau individuali la nivel mondial și oferă cea mai competitivă compensație din industrie. Dacă aveți întrebări, vă rugăm să nu ezitați să ne contactați: [email protected]