Evoluția Terapiei Genice: DNA Nou și Optimizare

În domeniul aplicațiilor DNA, DNA plasmidic (pDNA) a fost întotdeauna foarte apreciat din cauza stabilității sale excepționale, ușurinii de producție, stocare și transport. Cu toate acestea, pe măsură ce cercetarea științifică continuă să progreseze, o serie de noi tipuri de DNA, cum ar fi DNA Minicircle (mcDNA), DNA Doggybone (dbDNA) și DNA Close-Ended (ceDNA), au început să apară, deschizând noi căi în terapia genetică și alte domenii de vârf.

mcDNA

mcDNA provine din procesul de recombinație al plasmidelor părinte, eliminând elementele bacteriene, dar păstrând structura circulară. Procesul său de pregătire se bazează pe activități enzymice specifice, cum ar fi φC31 integrase, realizând o eficiență mai mare de recombinație. O caracteristică remarcabilă a mcDNA este lipsa secvențelor bacteriene, permițându-i să se bazeze pe portabili DNA mici, ceea ce îmbunătățește expresia genetică.

dbDNA

dbDNA are o conformație dublu șirată închisă, cu bucle mici singur șir la ambele capete și este complet liber de secvențe bacteriene și gene de rezistență la antibiotice. Dimensiunea sa mai mică permite o introducere mai ușoară în celule și nuclee, în timp ce arată o rezistență completă la nuclease. Forma inițială a dbDNA conține doar elementele necesare pentru expresia genetică, excluzând secvențele inutile, de aceea posedă capacități puternice de transfecție genetică și niveluri mai ridicate de expresie a proteinelor.

ceDNA

ceDNA este un construct de ADN cu șiruri simple, liniar, închis covalent, care conține genul țintă și alte elemente regulate de expresie. Extremitățile sale sunt repetări terminale inverse (ITR), oferind o capacitate de construcție de mii de baze, depășind cu mult limitele vectorilor tradiționali de virus adenoasociat (AAV). Structura ITR a ceDNA este crucială pentru intrarea în nucleu, iar modelul său de expresie este consistent cu episomele neintegrare. În plus, procesul de pregătire al ceDNA este rapid și cost eficient, făcându-l potrivit pentru cercetarea terapiei gene în domenii precum boli rare, vaccine și oncologie.

Optimizare ADN

În ceea ce privește optimizarea DNA-ului, cercetătorii îmbunătățesc expresia genelor transgenice prin optimizarea componentelor intrinseci ai DNA-ului plasmid. Simultan, marcatorii de selecție sunt înlocuiți, de exemplu prin substituirea ampicilinului cu kanamicină, pentru a reduce riscurile autoimune. De asemenea, se utilizează sistemul de selecție cu zahăruri pentru a înlocui marcatorii tradiționali de selecție. În ceea ce privește optimizarea codonilor, cercetătorii îmbunătățesc nivelurile de expresie a proteinelor prin modificarea utilizării codonilor, luând în considerare preferințele gazdei pentru expresia secvențelor genetice. Pe parcursul procesului de optimizare, cercetătorii trebuie să acorde atenție bias-ului de codon, stabilității structurii secondare a mRNA-ului, evitării elementelor transacționale și a siturilor enzyme de restricție, precum și echilibrului conținutului de GC.

În rezumat, dezvoltarea de noi tipuri de ADN și optimizarea ADN-ului au oferit noi oportunități și provocări pentru domenii precum terapia genetică. Yaohai Bio-Pharma a creat platforme de producție GMP atât pentru plasmide circulare, cât și pentru cele linearizate. Yaohai poate oferi, de asemenea, dezvoltare și optimizare a proceselor pentru diferite tipuri de ADN, inclusiv aceste noi tipuri de ADN, îndeplinind nevoile diferitelor clienți.

Yaohai Bio-Pharma caută, de asemenea, activ parteneri globali, instituționali sau individuali și oferă cele mai competitive compensații din industrie. Dacă aveți vreo întrebare, nu ezitați să ne contactați: [email protected]