De Magie van P. pastoris: Vormgeving van Recombinante Proteïneproductie

Recombinant eiwitten, welke in gastcellen worden uitgedrukt door middel van genetische technieken, hebben talrijke toepassingen gevonden in biomedisch onderzoek, therapie en diagnostiek. De keuze van een geschikt expressiesysteem is een cruciale factor voor het succesvolle uiten van recombinant eiwit.

Yaohai Bio-Pharma heeft meer dan een decennium ervaring in de constructie en productie van yeast strain libraries. In dit artikel zal Yaohai ingaan op de details van het Pichia pastoris (P. pastoris) expressiesysteem voor recombinant eiwit.

P. pastoris als expressiesysteem voor recombinant eiwit

P. pastoris, als een methylotrofe gist, is in staat om C1-verbindingen zoals methanol efficiënt te gebruiken, wat het een ideaal gastorganisme maakt voor de productie van recombinante eiwitten. Het proces bestaat uit het introduceren van een vector die het doel-DNA draagt in de gist, waarbij gebruik wordt gemaakt van de eukaryotische cel-eigenschappen van de gist om het recombinante eiwit uit te drukken. Het systeem voor heterologe genexpressie met P. pastoris als gastorganisme heeft zich snel ontwikkeld in de recente jaren en wordt erkend als een belangrijk en algemeen geaccepteerd hulpmiddel in de moleculaire biologie voor de productie van recombinante eiwitten.

Strategie voor de P. pastoris expressiesysteem

Optimalisatie strategieën voor P. pastoris fermentatieprocessen

Om de effectiviteit van fermentatieprocessen te verbeteren, is het integreren van stroommanipulaties en het aannemen van verschillende strategieën tijdens de P. pastoris-fermentatie cruciaal. Hoewel er algemeen gebruikte voorwaarden bestaan voor P. pastoris-fermentatie, zijn optimale voorwaarden sterk afhankelijk van het gewenste product, de gebruikte genetische samenstelling en of productregulering wordt bereikt via een constitutieve of inducibele promotor. Sleutelfactoren voor succesvolle verbetering, optimalisatie en simulatie in P. pastoris omvatten aanpassingen van fermentatieparameters, selectie van operationele modi en het gebruik van wiskundige modellen. Het optimaliseren van het fermentatieproces houdt in dat er nauwkeurig wordt gekozen bij parameters zoals temperatuur, pH, mediumcompositie en opgeloste zuurstof, evenals het aannemen van geschikte operationele modi zoals continue en fed-batch fermentatie. Bovendien kunnen genomegrootschalige metabolische modellen en wiskundige methoden worden ingezet om de optimalisatie van het fermentatieproces verder te verfijnen.

Conclusie

In vergelijking met bacteriën toont P. pastoris, als een eukaryotisch organisme, unieke voordelen tijdens het fermentatieproces. Daarom wordt P. pastoris beschouwd als een belangrijke microbische platform voor de productie van recombinante eiwitten. Om een hoge opbrengst van het gewenste eiwit te bereiken, is procesoptimalisatie noodzakelijk.

Het efficiënt en snel ontwikkelen van celbanken is cruciaal voor het productielanceringproces. Als u P. pastoris of andere giststrengen nodig hebt, kan Yaohai u uitgebreide ervaring bieden in de constructie van microbiele celbanken, professioneel regulatoir advies, alsook volledige CDMO-diensten. We hebben een redelijke ontwikkelingsroadmap ontworpen die de CMC-ontwikkelingscyclus van recombinante biologische producten minimaliseert terwijl risico's worden vermeden.

Wij zoeken ook actief naar instellingen of individuen als wereldwijde partners. Wij bieden de meest concurrerende vergoeding in de industrie. Als u vragen heeft, aarzel dan niet om contact met ons op te nemen: BD@yaohaibio.cn