De magie van P. pastoris: het vormgeven van de productie van recombinant eiwit

Recombinante eiwitten, eiwitten die tot expressie worden gebracht in gastheercellen door middel van genetische manipulatietechnieken, hebben wijdverbreide toepassingen gevonden in biomedisch onderzoek, therapie en diagnostiek. De selectie van een geschikt expressiesysteem is een cruciale factor in de succesvolle expressie van recombinante eiwitten.

Yaohai Bio-Pharma kan bogen op meer dan een decennium aan ervaring in de constructie en productie van giststambibliotheken. In dit artikel zal Yaohai ingaan op de details van het Pichia pastoris (P. pastoris) expressiesysteem van recombinant eiwit.

P. pastoris als expressiesysteem van recombinant eiwit

P. pastoris, als methylotrofe gist, is in staat om C1-verbindingen zoals methanol efficiënt te gebruiken, wat het een ideale gastheer maakt voor de productie van recombinante eiwitten. Het proces omvat het introduceren van een vector die het doel-DNA in de gist draagt, waarbij de eukaryotische cellulaire eigenschappen van de gist worden benut om het recombinante eiwit tot expressie te brengen. Het heterologe genexpressiesysteem met P. pastoris als gastheer heeft zich de afgelopen jaren snel ontwikkeld en wordt erkend als een belangrijk en algemeen geaccepteerd hulpmiddel in de moleculaire biologie voor de productie van recombinante eiwitten.

Strategie voor de P. pastoris expressiesysteem

Optimalisatiestrategieën voor P. pastoris fermentatie processen

Om de effectiviteit van fermentatieprocessen te verbeteren, is het integreren van stammanipulaties en het aannemen van verschillende strategieën tijdens P. pastoris-fermentatie cruciaal. Hoewel er veelgebruikte omstandigheden voor P. pastoris-fermentatie bestaan, zijn optimale omstandigheden sterk afhankelijk van het gewenste product, de gebruikte genetische samenstelling en of productregulatie wordt bereikt via een constitutieve of induceerbare promotor. Belangrijke factoren voor succesvolle verbetering, optimalisatie en simulatie in P. pastoris zijn onder meer de aanpassing van fermentatieparameters, selectie van operationele modi en gebruik van wiskundige modellen. Het optimaliseren van het fermentatieproces omvat het nauwkeurig selecteren van parameters zoals temperatuur, pH, mediumsamenstelling en opgeloste zuurstof, evenals het aannemen van geschikte operationele modi zoals continue en fed-batch-fermentatie. Bovendien kunnen metabolische modellen op genomische schaal en wiskundige methoden worden benut om de optimalisatie van het fermentatieproces te verfijnen.

Conclusie

Vergeleken met bacteriën vertoont P. pastoris, als eukaryotisch organisme, unieke voordelen in het fermentatieproces. Daarom wordt P. pastoris erkend als een belangrijk microbieel platform voor de productie van recombinante eiwitten. Om de hoge opbrengst van het gewenste eiwit te bereiken, is procesoptimalisatie noodzakelijk.

De efficiënte en snelle ontwikkeling van celbankieren is cruciaal voor het productlanceringsproces. Als u P. pastoris of andere giststammen nodig hebt, kan Yaohai u uitgebreide ervaring bieden met de constructie van microbiële celbankieren, professionele regelgevingsbegeleiding en one-stop CDMO-services. We hebben een redelijke ontwikkelingsroutekaart ontworpen die de CMC-ontwikkelingscyclus van recombinante biologische producten minimaliseert en tegelijkertijd risico's vermijdt.

We zijn ook actief op zoek naar institutionele of individuele mondiale partners. Wij bieden de meest concurrerende verloning in de branche. Als u vragen heeft, neem dan gerust contact met ons op: [email protected]