mRNA-plasmidesjablonen: kernelementen en ontwerpstrategieën

Het creëren van mRNA voor vaccins of therapieën begint met een goed ontworpen plasmidetemplate. Hier is een korte handleiding voor de belangrijkste elementen en hoe ze worden geoptimaliseerd voor succes.

De promotor: waar transcriptie begint

De T7-promotor is de populairste keuze voor het starten van mRNA-synthese. De klassieke sequentie, "TAATACGACTCACTATAGGG", zorgt voor efficiënte transcriptie. In de loop der tijd hebben wetenschappers variaties ontwikkeld zoals de GG-, AG- en AT/AU-sjablonen om te werken met geavanceerde capping-systemen, zoals CleanCap of zelfversterkende RNA-platforms.

Linearisatie: het plasmide knippen voor precisie

Om te voorkomen dat het plasmide eindeloos doorgaat met transcriberen, moet het op een specifieke plek worden geknipt. Type IIS-enzymen, zoals BspQⅠ of BsaⅠ, zijn perfect voor deze taak. Ze knippen het DNA buiten hun herkenningssequentie, laten geen extra stukjes achter en behouden de cruciale polyA-staart.

Het mRNA-blauwdruk: bouwstenen voor succes

De mRNA-sequentie omvat een 5'-cap, niet-vertaalde regio's (UTR's), een coderende sequentie (CDS) en een polyA-staart. Dit is hoe elk deel is ontworpen:

• UTR's:Deze kunnen worden geleend van sterk tot expressie komende natuurlijke genen (zoals die in virussen) of op maat worden ontworpen met behulp van geavanceerde algoritmen voor betere prestaties.
• CDS:Wetenschappers ontwerpen eerst de eiwitsequentie en optimaliseren vervolgens de DNA-code voor efficiënte expressie.
• PolyA-staart: Een reeks van 100–120 adenines, of een gesegmenteerde versie zoals 30A + Linker + 70A, zorgt ervoor dat het mRNA stabiel en functioneel blijft.

Door deze elementen onder de knie te krijgen, kunnen onderzoekers krachtige mRNA-sjablonen maken voor alles van vaccins tot geavanceerde therapieën. De toekomst van de geneeskunde begint hier!

Yaohai Bio-Pharma is een platformonderneming die gespecialiseerd is in services voor microbiële expressiesystemen. Gebaseerd op een decennium aan expertise heeft Yaohai een uitgebreide reeks GMP-conforme technologieën ontwikkeld voor het synthetiseren van lineaire en circulaire mRNA, en biedt hoogwaardige RNA-producten die sequentieontwerp en -optimalisatie, gensynthese, in vitro transcriptie (IVT), circularisatie, RNA-zuivering en LNP-incapsulatie omvatten.

We zijn ook actief op zoek naar institutionele of individuele mondiale partners. Wij bieden de meest concurrerende verloning in de branche. Als u vragen heeft, neem dan gerust contact met ons op: [email protected]