Onderzoek de zuiverheid van RNA: Ionenuitwisseling chromatografie

Ion-exchange chromatografie zuivert RNA effectief door moleculen met verschillende ladingen te scheiden. Afhankelijk van hun protonatiestatus op verschillende pH-niveaus kunnen RNA-moleculen positieve of negatieve ladingen dragen. Deze eigenschap wordt gebruikt in ion-exchange chromatografie om de interacties tussen RNA en de stationaire fase te beheersen door de ionensterkte en pH van de oplossing aan te passen, waardoor scheiding wordt bereikt.

Als de eerste en grootste mikrobiële biologische CRDMO in Groot-China biedt Yaohai Bio-Pharma volledige op maat gemaakte oplossingen of losse diensten, variërend van RNA-synthese, stamontwerp en -constructie, ontwikkeling van upstream- en downstream-processen, tot GMP-of non-GMP-niveau productiemiddelenfabricage en vullingsdiensten voor diverse modaliteiten zoals mRNA, circRNA, plasmid RNA, recombinante eiwitten, peptiden, enzymen, enkel domeinanticorpsen en VLP's voor zowel menselijk als veterinaire gebruik.

Laten we de toepassingen van ionenuitwisselchromatografie voor specifieke zuiveringsprocessen onderzoeken.

1. Steekproefbereiding: Los de complexe mengeling die de doelwitbiomoleculen bevat op in een geschikte bufferoplossing. De keuze van pH kan invloed hebben op de ladingstoestand van biomoleculen, wat weer de scheidingsefficiëntie beïnvloedt.

2. Kolomselectie: Kies het juiste type ionenuitwisselkolom op basis van de ladingkenmerken van de doelmoleculen. Algemene kolommateriaalen omvatten cationenuitwisselresins en anionenuitwisselresins, afhankelijk van de lading van de doelmoleculen.

3. Steekproefladen: Laat de voorbereide steekproefoplossing door de chromatografische kolom stromen. De functionele groepen op de ionenuitwisselresin interacteren met de geladen ionen in de steekproef, waardoor verschillende retentietijden ontstaan voor moleculen met verschillende ladingseigenschappen.

4. Elutieproces: Gebruik elutiebufferoplossingen met geleidelijk toenemende ionensterkte of gewijzigde pH om de doelbiomoleculen van de kolom te elueren. Deze elutievoorwaarden wijzigen geleidelijk de interactie tussen biomoleculen en ionenuitwisselingsresins, waardoor zuivering van de doelmoleculen wordt bereikt.

5. Verzameling van gezuiverde doelmoleculen: Verzamel en analyseer de gezuiverde fracties van de doelbiomoleculen op basis van hun adsorptiekenmerken en elutierijvolgorde.

6. Naverwerking: Voer noodzakelijke naverwerkingsstappen uit op de verzamelde doelmoleculen, zoals concentratie, oplosning, herkristallisatie, etc., om het eindproduct met hoge zuiverheid en activiteit te verkrijgen.

Ionenuitwisselingschromatografie is waardevol in de biofarmaceutische en biochemische industrieën vanwege haar vermogen om biomoleculen zoals eiwitten, nucleïnezuur en peptiden effectief te zuiveren, wat hoge zuiverheidsproducten oplevert die essentieel zijn voor onderzoek, diagnostiek en therapeutische toepassingen.

Yaohai Bio-Pharma zoekt ook actief naar globale partners, zowel instellingen als individuen, en biedt de meest competitieve vergoeding in de branche. Als u vragen heeft, aarzel dan niet om contact met ons op te nemen: [email protected]