Onderzoek de zuiverheid van RNA: ionenuitwisselingschromatografie

Ionenuitwisselingschromatografie zuivert RNA effectief door moleculen met verschillende ladingen te scheiden. Afhankelijk van hun protonatiestatus bij verschillende pH-niveaus, kunnen RNA-moleculen positieve of negatieve ladingen dragen. Deze eigenschap wordt gebruikt in ionenuitwisselingschromatografie om interacties tussen RNA en de stationaire fase te controleren door de ionensterkte en pH van de oplossing aan te passen, waardoor scheiding wordt bereikt.

Als de eerste en grootste CRDMO voor microbiële biologische producten in Groot-China biedt Yaohai Bio-Pharma op maat gemaakte totaaloplossingen of afzonderlijke diensten, variërend van RNA-synthese, stamengineering en -constructie, upstream- en downstream-procesontwikkeling tot GMP- of niet-GMP-niveau productie van geneesmiddelen en fill & finish-diensten voor diverse modaliteiten, zoals mRNA, circRNA, plasmide-RNA, recombinante eiwitten, peptiden, enzymen, enkelvoudige domeinantilichamen en VLP's voor menselijk en veterinair gebruik.

Laten we eens kijken naar de toepassingen die ionenuitwisselingschromatografie biedt voor specifieke zuiveringsprocessen.

1. Monsterbereiding: Los het complexe mengsel met de doelbiomoleculen op in een geschikte bufferoplossing. De keuze van de pH kan de ladingstoestand van biomoleculen beïnvloeden, en daarmee de scheidingsefficiëntie.

2. Kolomselectie: Kies het juiste type ionenuitwisselingskolom op basis van de ladingskarakteristieken van de doelmoleculen. Veelvoorkomende kolommaterialen zijn kationenuitwisselingsharsen en anionenuitwisselingsharsen, afhankelijk van de lading van de doelmoleculen.

3. Monster laden: laat de voorbereide monsteroplossing door de chromatografische kolom gaan. De functionele groepen op de ionenuitwisselingshars interacteren met de geladen ionen in het monster, wat resulteert in verschillende retentietijden voor moleculen met verschillende ladingseigenschappen.

4. Elutieproces: Gebruik elutiebufferoplossingen met geleidelijk toenemende ionsterkte of gewijzigde pH om de doelbiomoleculen uit de kolom te elueren. Deze elutieomstandigheden wijzigen geleidelijk de interactie tussen biomoleculen en ionenuitwisselingsharsen, waardoor zuivering van de doelmoleculen wordt bereikt.

5. Verzamelen van gezuiverde doelmoleculen: Verzamel en analyseer de gezuiverde fracties van de doelbiomoleculen op basis van hun adsorptiekarakteristieken en elutievolgorde.

6. Nabewerking: Voer de nodige nabewerkingsstappen uit op de verzamelde doelmoleculen, zoals concentreren, oplossen, herkristalliseren, enz., om het eindproduct met een hoge zuiverheid en activiteit te verkrijgen.

Ionenuitwisselingschromatografie is waardevol in de biofarmaceutische en biochemische industrie vanwege de mogelijkheid om biomoleculen zoals eiwitten, nucleïnezuren en peptiden effectief te zuiveren. Hierdoor ontstaan ​​zeer zuivere producten die essentieel zijn voor onderzoek, diagnostiek en therapeutische toepassingen.

Yaohai Bio-Pharma is ook actief op zoek naar institutionele of individuele wereldwijde partners en biedt de meest concurrerende compensatie in de industrie. Als u vragen heeft, neem dan gerust contact met ons op: [email protected]