Ontdek de fascinerende wereld van de lithiumchloride-neerslag

Lithiumchlorideprecipitatie wordt veel gebruikt om RNA uit oplossing te scheiden.

Dit is hoe het proces verloopt:

1. Monstervoorbereiding: Begin met een monster dat RNA bevat, zoals in-vitro transcriptiemengsel.

2. Toevoeging van lithiumchloride: Voeg een passend volume geconcentreerde lithiumchloride-oplossing toe aan de RNA-oplossing.

3. Incubatie: Na het toevoegen van lithiumchloride wordt de oplossing geïncubeerd bij een lage temperatuur, over het algemeen rond de -20°C. Hierdoor slaan RNA-moleculen neer uit de oplossing.

4. Centrifugatie: Na incubatie wordt de oplossing gecentrifugeerd op hoge snelheid. Dit scheidt het neergeslagen RNA van de rest van de oplossing, die onzuiverheden bevat.

5. Wassen: Zodra het centrifugeren is voltooid, verwijdert u voorzichtig de supernatant, maar zonder de RNA-precipitatie te verstoren. Was de RNA-deeltjes met koude ethanol of isopropylalcohol om alle resterende onzuiverheden te verwijderen.

6. RNA-resuspensie: Na het wassen wordt het RNA-precipitaat kortstondig aan de lucht gedroogd en vervolgens opnieuw gesuspendeerd in een geschikte buffer, zoals TE-buffer (Tris-EDTA-buffer) of gedestilleerd water. Voorzichtig pipetteren of wervelstromen kunnen nodig zijn om het RNA adequaat te resuspenderen.

7. Kwantificering en analyse: Ten slotte wordt de geïsoleerde RNA gekwantificeerd door ultravioletspectroscopie of fluorescentiemethode. Dit bepaalt de concentratie en zuiverheid van het RNA-monster, wat belangrijk is voor downstreamtoepassingen zoals LNP-incapsulatie en celtransfectie.

Yaohai Bio-Pharma is bedreven in het gebruik van de lithiumchlorideprecipitatiemethode in het productieproces omdat het eenvoudig, goedkoop is en hoogwaardige RNA produceert die geschikt is voor verschillende toepassingen in de moleculaire biologie. Het is echter belangrijk om de omstandigheden te optimaliseren (bijv. lithiumchlorideconcentratie, incubatietijd, centrifugatiesnelheid) om de beste resultaten voor een bepaald monster te bereiken.

Vertrouwend op ons krachtige en gepatenteerde RNASci-platform, bieden we ook op maat gemaakte RNA-syntheseservices, evenals mRNA (tot 10 kb), circRNA (tot 4 kb) en LNP-catalogusproducten. We hebben een complete set mRNA/circRNA-synthesetechnologieën ontwikkeld om RNA van hoge kwaliteit te leveren, zoals sequentieontwerp en -optimalisatie, IVT, circularisatie, zuivering en LNP-encapsulatie. Alle producten worden vrijgegeven onder de strenge kwaliteitscontrolenormen.

Yaohai Bio-Pharma is de eerste en grootste biologische CRDMO die zich toelegt op microbiële expressiesystemen in Groot-China. Wij bieden end-to-end one-stop-oplossingen op maat of stand-alone services variërend van RNA-synthese, stamengineering en -constructie, upstream- en downstream-procesontwikkeling, tot GMP- of non-GMP-niveau productie van geneesmiddelen en fill & finish-services voor diverse modaliteiten, zoals mRNA, circRNA, plasmide-RNA, recombinante eiwitten, peptiden, enzymen, enkelvoudige domeinantilichamen (sdAbs) en VLP's. Wij zetten ons in om te voldoen aan de klinische en commerciële behoeften van wereldwijde klanten op het gebied van biologische geneesmiddelen, vaccins en diagnostiek voor zowel menselijk als veterinair gebruik.

Yaohai Bio-Pharma is ook actief op zoek naar institutionele of individuele wereldwijde partners en biedt de meest concurrerende compensatie in de industrie. Als u vragen heeft, neem dan gerust contact met ons op: [email protected]