Vergelijkende analyse van gist en E. coli in release testen

In het veld van biofarmaceutica worden Escherichia coli (E. coli) en gist twee veelgebruikte microbiele expressiesystemen die belangrijke uitdagingen hebben aangepakt, zoals industrialisatie en stabiliteit van batch tot batch van biologische producten. Door gebruik te maken van hun voordelen, zoals een duidelijke genetische achtergrond en volwassen technologie, zijn ze ingezet in de productie van verschillende preventieve of therapeutische biologische producten, waaronder het 9-valent HPV-vaccin, GLP-1, insuline en insuline-analogons, interleukine-2, interferon, plasmid DNA bij Yaohai Bio-Pharma.

Gedreven door het behoefte aan meervoudige batches en continue productie, kan de implementatie van een strain bank management systeem en het vaststellen van redelijke release-tests de uniformiteit en stabiliteit van productiestrains waarborgen, waardoor consistentie en kwaliteit van biologische producten gegarandeerd wordt. Aangezien E. coli en gist respectievelijk tot bacteriën en schimmels behoren, verschillen hun moleculaire constructiestrategieën voor ontworpen strains. Specifiek bestaan exogene genen in E. coli voornamelijk als vrije plasmiden, terwijl deze genen in gistexpressiehosts doorgaans worden geïntegreerd in de chromosomen. Daarom vereisen deze fundamentele verschillen variaties in de testitems en releasecriteria die worden toegepast op E. coli- en gistcelbanken.

Yaohai Bio-Pharma heeft meer dan een decennium ervaring in het opbouwen van microbiele celbanken, waaronder die van E. coli en gist. Door gebruik te maken van het robuuste en compliant GMP (Good Manufacturing Practice)-systeem, biedt Yaohai Bio-Pharma een uitgebreide een-stop-oplossing voor de opbouw van stambanken en heeft met succes meer dan honderd gecertificeerde en gekwalificeerde stambanken geleverd aan klanten over de hele wereld. Op basis van uitgebreide ervaring heeft Yaohai Bio-Pharma de belangrijkste overwegingen bij het release testen van E. coli en giststambanken uitgelegd.

Verschillen tussen bacteriën en schimmels

E. coli behoort tot de bacteriën, terwijl gist behoort tot de schimmels. Deze twee organismen tonen verschillende koloniemorfologieën en biochemische kenmerken. Bijvoorbeeld, de Gram-kleuringmethode is geschikt voor het identificeren van E. coli, maar niet voor het identificeren van gist. Ten tweede, op genetisch niveau worden bacteriën gekenmerkt door hun conservatieve 16S rRNA-sequenties, terwijl schimmels 18S rRNA en Internal Transcribed Spacer (ITS)-gebieden bezitten. Het uitvoeren van 16S of 18S in combinatie met ITS-sequencing voor bacteriën of schimmels respectievelijk kan snel informatie over microbiele soorten identificeren. Daarnaast is E. coli gevoelig voor contaminatie door bacteriofagen (virus die bacteriën aanvallen), dus het wordt aanbevolen om bacteriofaagdetectie uit te voeren bij het vrijgeven van E. coli celbanken.

Verschillen in de bestaansvormen van exogene genen

De productie van recombinante biologische producten berust doorgaans op gebuikte bacteriën na modificatie, die meestal microbiele stammen met exogene genen zijn. De bestaansvormen van exogene genen in E. coli en yeast expressiesystemen verschillen. Exogene genen bestaan meestal in de vorm van vrij plasmiden in E. coli, terwijl het yeast expressiesysteem het doelgen integreert in zijn chromosome.

Verschillen in release testen tussen E. coli en gist

Op basis van de voorgaande kenmerken liggen de belangrijkste verschillen in release testitems tussen E. coli en gistcelbanken in koloniemorfologie, biochemische eigenschappen, bacteriofaagdetectie en identificatie van exogene genen.

Op basis van een diepgaand inzicht in ICH Q5D, internationale voorschriften en pharmacopeeën, en meer dan een decennium ervaring met indieningen voor zowel E. coli als gist, heeft het Yaohai Bio-Pharma QC-platform omvattende testprocedures en vrijgevingsstandaarden opgesteld. Yaohai Bio-Pharma heeft stevige samenwerkingen aangegaan met autoritaire instellingen wereldwijd, om ervoor te zorgen dat onze testmethoden en kwaliteitsnormen aansluiten bij de indieningsvereisten van FDA, EMA, NMPA, TGA en andere regelgevingen.

Hieronder heeft Yaohai Bio-Pharma zorgvuldig de specifieke verschillen in vrijgevingscontroles tussen E. coli en gist samengevat voor uw gemak.

Yaohai Bio-Pharma zoekt ook actief naar globale partners, zowel instellingen als individuen, en biedt de meest competitieve vergoeding in de branche. Als u vragen heeft, aarzel dan niet om contact met ons op te nemen: [email protected]