Vergelijkende analyse van gist en E. coli bij vrijgavetesten Nederland

Op het gebied van biofarmaceutica zijn Escherichia coli (E. coli) en gist twee veelgebruikte microbiële expressiesystemen die belangrijke uitdagingen hebben aangepakt, zoals industrialisatie en batch-to-batch stabiliteit van biologische producten. Door gebruik te maken van hun voordelen van een duidelijke genetische achtergrond en volwassen technologie, zijn ze gebruikt bij de productie van verschillende preventieve of therapeutische biologische producten, waaronder het 9-valente HPV-vaccin, GLP-1, insuline en insuline-analogen, interleukine-2, interferon, plasmide-DNA in Yaohai Bio-Pharma.

Gedreven door de behoefte aan multi-batch en continue productie, kan het implementeren van een stambankbeheersysteem en het opzetten van redelijke vrijgavetesten de uniformiteit en stabiliteit van productiestammen garanderen, en daarmee de consistentie en kwaliteit van biologische producten garanderen. Aangezien E. coli en gist respectievelijk tot bacteriën en schimmels behoren, verschillen hun moleculaire constructiestrategieën voor gemanipuleerde stammen. Specifiek bestaan ​​exogene genen in E. coli voornamelijk als vrije plasmiden, terwijl deze genen in gistexpressiegastheren doorgaans in de chromosomen zijn geïntegreerd. Bijgevolg vereisen deze fundamentele verschillen variaties in de testitems en vrijgavenormen die worden toegepast op E. coli en gistcelbanken.

Yaohai Bio-Pharma heeft meer dan tien jaar ervaring met het construeren van microbiële celbanken, waaronder die van E. coli en gist. Door gebruik te maken van het robuuste en conforme GMP (Good Manufacturing Practice)-systeem, heeft Yaohai Bio-Pharma een uitgebreide one-stop-oplossing voor de constructie van strainbanken. en heeft met succes meer dan honderd gecertificeerde en gekwalificeerde strainbanken geleverd aan klanten over de hele wereld. Op basis van uitgebreide ervaring heeft Yaohai Bio-Pharma de belangrijkste overwegingen bij het testen van de vrijgave van E. coli en giststambanken.

Verschillen tussen bacteriën en schimmels

E. coli behoort tot de bacteriën, terwijl gist tot de schimmels behoort. Deze twee organismen vertonen verschillende koloniemorfologieën en biochemische kenmerken. De Gram-kleuringsmethode is bijvoorbeeld geschikt voor het identificeren van E. coli, maar niet voor het identificeren van gist. Ten tweede worden bacteriën op genetisch niveau gekenmerkt door hun geconserveerde 16S rRNA-sequenties, terwijl schimmels 18S rRNA en Internal Transcribed Spacer (ITS)-regio's bezitten. Het uitvoeren van 16S of 18S gecombineerd met ITS-sequencing voor respectievelijk bacteriën of schimmels, kan snel microbiële soorteninformatie identificeren. Bovendien is E. coli gevoelig voor contaminatie door bacteriofagen (virussen die bacteriën aanvallen), dus het wordt aanbevolen om bacteriofaagdetectie uit te voeren bij het vrijgeven van E. coli-celbanken.

Verschillen in de bestaansvormen van exogene genen

De productie van recombinante biologische producten is over het algemeen gebaseerd op gemanipuleerde bacteriën na modificatie, wat meestal microbiële stammen zijn met exogene genen. De bestaansvormen van exogene genen in E. coli en gistexpressiesystemen zijn verschillend. Exogene genen bestaan ​​meestal in de vorm van vrije plasmiden in E. coli, terwijl het gistexpressiesysteem het doelgen integreert in zijn chromosoom.

Verschillen in releasetesten tussen E. coli en gist

Op basis van de voorgaande kenmerken liggen de belangrijkste verschillen in vrijgavetestitems tussen E. coli en gistcelbanken in de koloniemorfologie, biochemische eigenschappen, bacteriofaagdetectie en exogene genidentificatie.

Gebaseerd op een diepgaand begrip van ICH Q5D, internationale regelgeving, evenals farmacopee, en meer dan een decennium aan ervaring in indieningen voor zowel E. coli als gist, heeft het Yaohai Bio-Pharma QC-platform uitgebreide testprocedures en vrijgavenormen vastgesteld. Yaohai Bio-Pharma heeft sterke partnerschappen gesmeed met gezaghebbende instellingen internationaal, om ervoor te zorgen dat onze testmethodologieën en kwaliteitsnormen aansluiten bij de indieningsvereisten van FDA, EMA, NMPA, TGA en andere regelgevingen.

Hieronder heeft Yaohai Bio-Pharma voor uw gemak de specifieke verschillen in vrijgavetesten tussen E. coli en gist op een doordachte manier samengevat.

Yaohai Bio-Pharma is ook actief op zoek naar institutionele of individuele wereldwijde partners en biedt de meest concurrerende compensatie in de industrie. Als u vragen heeft, neem dan gerust contact met ons op: [email protected]