Vandaag is Yaohai zo enthousiast om zijn in vitro transcriptieprotocol voor lange RNA te delen. Het is een effectieve strategie die wetenschappers vaak gebruiken om RNA in het lab te produceren. Op deze manier kunnen onderzoekers een aanzienlijk groot aantal lange RNA's produceren — iets dat essentieel is voor de studie in verschillende biologische velden. Hier bieden we een stapsgewijze handleiding voor de bereiding van lange RNA's via in vitro transcriptie. We zullen ook praten over hoe we het proces kunnen verbeteren en proberen enkele van de problemen aan te pakken waarmee u te maken krijgt bij het synthetiseren van lange RNA's.
Er zijn verschillende essentiële componenten nodig voor in vitro transcriptie, met name lange RNA. U moet een enzym genaamd RNA-polymerase, schrijfmateriaal in de vorm van nucleotidetrifosfaten (NTP's), een buffer om de reactie te ondersteunen en een DNA-template leveren. Hoe u dit stap voor stap doet, vindt u hier:
Verschillende factoren zijn erg belangrijk voor het goed functioneren van de synthese van RNA. Met name de hoeveelheid magnesiumionen in de buffer zelf is belangrijk. RNA-polymerase vereist een aanzienlijke hoeveelheid magnesium om de juiste interactie met de DNA-template en de daaropvolgende vouwing van de RNA te ondersteunen. Een tweede belangrijk aspect om te overwegen is de concentratie van de DNA-template. Specifiek moet u voldoende template-DNA-reactie hebben om goede RNA-opbrengsten te krijgen.
Lang RNA zal natuurlijk zijn eigen problemen met zich meebrengen. Deze problemen kunnen te maken hebben met de afbraak van het RNA, de manier waarop het RNA vouwt beïnvloeden en structuren opbouwen die mogelijk de synthese van het RNA verstoren. Een manier om deze uitdagingen aan te pakken, is door de buffer die u neemt aan te passen. Voor een uitgebreidere structuur van RNA kunnen onderzoekers verschillende speciale chemicaliën toevoegen, zoals DTT en p-mercaptoethanol, om het RNA correct te helpen vouwen en te voorkomen dat het aan elkaar plakt of klontert.
Bovendien zijn niet alle lange RNA-typen hetzelfde en vereisen sommige mogelijk alternatieve synthesemethoden. Er zijn speciale kenmerken die onderzoekers mogelijk aan het RNA moeten toevoegen, zoals het toevoegen van een 5-cap of Poly-A-staart. Als dit nodig is (zoals later wordt uitgelegd), moeten onderzoekers andere enzymen toevoegen, zoals Guanylyltransferase en Poly(A)Polymerase. Men moet ook een geschikt RNA-polymerase-enzym selecteren dat hen op natuurlijke wijze in staat stelt om meer RNA te produceren. Zodra lang RNA moet worden gesynthetiseerd, moeten we de beste conditie identificeren.
Lange RNA's in vitro transcriptEr zijn een aantal belangrijke toepassingen voor het lange RNA in vitro transcript protocol in verschillende onderzoeks-, assay- en therapeutische inspanningen. Het helpt wetenschappers om de structuur van RNA te begrijpen, de manier waarop het werkt en hoe ze genen kunnen modificeren met hedendaagse technologieën. Meer andere dag - de ontdekking van verschillende ziekten en hun therapeutische middelen zoals zeer actuele RNA-therapieën - laten ons geloven hoe nuttig deze lezing-in-technologie kan zijn voor de geneeskunde.
Er zijn veel voordelen aan het gebruik van dit protocol. Een op elektroforese gebaseerde methode is over het algemeen de meest efficiënte en kosteneffectieve manier om grote hoeveelheden lange RNA te produceren. Naast de kwaliteit van RNA is een goede opbrengst ook een belangrijke factor voor onderzoekers om hen te helpen met hun onderzoek, vooral als ze grote hoeveelheden RNA nodig hebben voor experimenten vanwege het hoge inputmateriaal om mee te beginnen. Bovendien is in vitro transcriptie voor lange RNA doorgaans nauwkeuriger en reproduceerbaarder dan chemische synthese of cellulaire synthese van RNA.
Yaohai BioPharma is een Top 10 Microbial CDMO die In vitro Transcript Protocol voor Long RNA en regelgevende zaken omvat. We hebben een kwaliteitsmanagementsysteem dat in lijn is met de huidige GMP-normen en wereldwijde regelgeving. Ons team van regelgevende experts is bekwaam in wereldwijde regelgevende kaders om biologische lanceringen te versnellen. We zorgen voor traceerbare productieprocessen, kwaliteitsproducten en voldoen aan de regels van de Amerikaanse FDA en EU EMA. Australia TGA en China NMPA zijn ook tevreden. Yaohai BioPharma heeft de audit ter plaatse van de Qualified Person (QP) van de Europese Unie voor ons GMP-kwaliteitssysteem en onze productiefaciliteit met succes doorstaan. Verder hebben we de eerste certificeringsaudits van het ISO9001-kwaliteitsmanagementsysteem, het ISO14001-milieumanagementsysteem en het ISO45001-managementsysteem voor gezondheid en veiligheid op het werk doorstaan.
Yaohai Bio-Pharma, een top 10 producent van biologische producten, is een specialist in microbiële fermentatie. We hebben een geavanceerde faciliteit opgezet die is uitgerust met moderne faciliteiten en sterke RD-productiemogelijkheden. We hebben vijf productielijnen voor geneesmiddelen die voldoen aan de GMP-vereisten voor microbiële fermentatie en zuivering, evenals twee vul-afwerkingslijnen die geautomatiseerd zijn voor cartridges, vials en voorgevulde spuiten. De beschikbare fermentatieschalen variëren van 100L tot 500L, 1000L en 2000L. In vitro Transcript Protocol voor Long RNA voor via's zijn 1ml tot 25ml, terwijl de voorgevulde spuiten en cartridge-vulspecificaties 1-3ml omvatten. Onze productiewerkplaats is cGMP-conform en garandeert een constante levering van klinische monsters en commerciële artikelen. Onze fabriek produceert grote moleculen die naar de hele wereld worden verzonden.
Yaohai Bio-Pharma heeft ervaring in de productie van biologische producten die zijn gemaakt van micro-organismen. Wij bieden op maat gemaakte RD-oplossingen en productiediensten, terwijl we potentiële risico's minimaliseren. We hebben gewerkt met diverse technieken, zoals recombinante cellulaire subeenheden, vaccins (inclusief peptiden), groeifactoren, hormonen en het In vitro Transcript Protocol voor Long RNA. Wij zijn een specialist in veel micro-organismen zoals extracellulaire en intracellulaire secretie van gist (opbrengsten tot 15 g/l) en intracellulaire oplosbare bacteriën en insluitlichaampjes (opbrengsten tot 10 g/l). We hebben ook een BSL-2-fermentatieplatform ontwikkeld om bacteriële vaccins te maken. We hebben een staat van dienst in het verbeteren van productieprocessen, waardoor de opbrengsten worden verhoogd en de kosten worden verlaagd. We hebben een zeer efficiënt technologieteam om tijdige en hoogwaardige levering van projecten te garanderen. Dit helpt ons om uw unieke producten sneller op de markt te brengen.
Yaohai Bio-Pharma is een toonaangevend bedrijf in In vitro Transcript Protocol voor Long RNA CDMO. Onze belangrijkste focus ligt op de productie van microbiële vaccinaties en therapieën voor de behandeling van huisdieren, menselijke en veterinaire gezondheid. We beschikken over geavanceerde RD- en productietechnologieplatforms die het gehele productieproces bestrijken, van de engineering van microbiële stammen tot celbankverwerking en methodeontwerp tot klinische en commerciële productie, zodat we de succesvolle levering van de meest geavanceerde oplossingen kunnen garanderen. We hebben een enorme hoeveelheid kennis verzameld op het gebied van bioprocessing van microben. Meer dan 200 projecten zijn succesvol afgerond en we helpen onze klanten te voldoen aan regelgevingen zoals die van de Amerikaanse FDA en EU EMA. We helpen ze ook om te navigeren door Australia TGA en China NMPA. We kunnen snel reageren op marktvereisten en aangepaste CDMO-services aanbieden dankzij onze ervaring en expertise.