Plasmid: Molekul DNA Lingkaran Kecil dengan Potensi Besar

Plasmid, molekul DNA berbentuk lingkaran kecil, berfungsi sebagai vektor penting untuk rekombinasi DNA dalam penelitian biologi molekuler dan terapi gen. Hasil dan kualitas plasmid sangat krusial, dengan proporsi superkoil dan kandungan endotoksin menjadi dua faktor signifikan yang memengaruhi kualitas plasmid.

Subtipe Plasmid

Plasmid yang diekstraksi dari Escherichia coli (E. coli) hadir dalam berbagai subtipe: bentuk superkoil (SC), lingkaran terbuka (OC), dan linier (L) (Gambar 1). Di antaranya, plasmid superkoil menunjukkan stabilitas, antigenisitas, dan efisiensi transfeksi serta ekspresi yang tinggi.

Gambar 1. Diagram Skematik Subtipe Plasmid Umum

Dalam elektroforesis gel agarosa pada DNA plasmid, urutan kecepatan migrasi adalah DNA superkoil, DNA linier, dan DNA lingkaran terbuka (Gambar 2).

Gambar 2. Pola Migrasi Elektroforesis Gel Agarosa dari Subtipe Plasmid Berbeda

Yaohai Bio-Pharma terus memperbaiki proses dan tekniknya untuk memastikan bahwa proporsi superkoil plasmid kelas transfeksi adalah ≥85% dan untuk plasmid kelas penelitian adalah ≥50%. Berikut ini adalah demonstrasi kasus (Gambar 3), di mana elektroforesis gel agarosa digabungkan dengan perangkat lunak Gel-Pro Analyzer untuk mendeteksi proporsi superkoil.

Gambar 3. Hasil Pemeriksaan Kualitas Proporsi Superkoil Plasmid

Endotoksin

Endotoksin, komponen dinding sel bakteri Gram-negatif, terutama terdiri dari lipopolisakarida A (LPS-A) sebagai komponen toksiknya. Selama ekstraksi plasmid, endotoksin dilepaskan ke dalam larutan lisis, yang secara signifikan memengaruhi efisiensi transfeksi plasmid ke dalam sel. Selain itu, dapat mengaktifkan respons imun non-spesifik pada sel, menyebabkan hasil positif palsu dalam eksperimen.

Yaohai Bio-Pharma menerapkan pendekatan "non-pengenalan" dan "penghapusan tinggi", dengan ketat mengontrol penggunaan reagen dan bahan yang mengandung endotoksin selama proses pemurnian. Perusahaan juga telah mengembangkan metode penghilangan endotoksin yang efisien, menawarkan tiga tingkat kadar endotoksin: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg, dan ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma memiliki jalur layanan ekstraksi plasmid berkapasitas tinggi, mampu menyediakan 1 mg plasmid hasil ekstraksi dalam waktu satu minggu. Secara default, ia menyediakan lebih dari tujuh uji kontrol kualitas (QC) untuk memastikan pengiriman plasmid berkualitas tinggi dan standar tinggi dari berbagai perspektif.

Kami juga secara aktif mencari mitra global, baik lembaga maupun individu. Kami menawarkan kompensasi paling kompetitif di industri. Jika Anda memiliki pertanyaan, silakan hubungi kami: CRO@yaohaibio.cn