Plasmid: Molekul DNA Sirkular Kecil dengan Potensi Besar

Plasmid, molekul DNA melingkar kecil, berfungsi sebagai vektor penting untuk rekombinasi DNA dalam penelitian biologi molekuler dan terapi gen. Hasil dan kualitas plasmid sangat penting, dengan proporsi superkoil dan kandungan endotoksin menjadi dua faktor penting yang memengaruhi kualitas plasmid.

Subtipe Plasmid

Plasmid yang diekstrak dari Escherichia coli (E. coli) terdapat dalam berbagai subtipe: bentuk superkoil (SC), bentuk sirkuler terbuka (OC), dan bentuk linier (L) (Gambar 1). Di antara semuanya, plasmid superkoil menunjukkan stabilitas, antigenisitas, dan efisiensi transfeksi dan ekspresi yang sangat baik.

Gambar 1. Diagram Skema Subtipe Plasmid Umum

Dalam elektroforesis gel agarosa pada DNA plasmid, urutan kecepatan migrasi adalah DNA superkoil, DNA linier, dan DNA sirkular terbuka (Gambar 2).

Gambar 2. Pola Migrasi Elektroforesis Gel Agarosa pada Berbagai Subtipe Plasmid

Yaohai Bio-Pharma terus meningkatkan proses dan tekniknya untuk memastikan bahwa proporsi superkoil plasmid tingkat transfeksi adalah ≥85% dan proporsi plasmid tingkat penelitian adalah ≥50%. Berikut ini adalah demonstrasi kasus (Gambar 3), di mana elektroforesis gel agarosa dikombinasikan dengan perangkat lunak Gel-Pro Analyzer untuk mendeteksi proporsi superkoil.

Gambar 3. Hasil Pemeriksaan Mutu Plasmid Superkoil Proporsi

Endotoksin

Endotoksin, komponen dinding sel bakteri Gram-negatif, terutama terdiri dari lipopolisakarida A (LPS-A) sebagai komponen toksiknya. Selama ekstraksi plasmid, endotoksin dilepaskan ke dalam larutan lisis, yang sangat memengaruhi efisiensi transfeksi plasmid ke dalam sel. Selain itu, endotoksin dapat mengaktifkan respons imun non-spesifik dalam sel, yang menyebabkan hasil positif palsu dalam percobaan.

Yaohai Bio-Pharma mengadopsi pendekatan "non-introduction" dan "high removal", dengan mengendalikan secara ketat penggunaan reagen dan bahan yang mengandung endotoksin selama proses pemurnian. Perusahaan ini juga telah mengembangkan metode penghilangan endotoksin yang efisien, dengan menawarkan tiga tingkat kandungan endotoksin: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg, dan ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma memiliki lini layanan ekstraksi plasmid berthroughput tinggi, yang mampu mengirimkan 1 mg plasmid yang diekstraksi dalam waktu satu minggu. Secara default, lini layanan ini menyediakan lebih dari tujuh uji kendali mutu (QC) untuk memastikan pengiriman plasmid berkualitas tinggi dan berstandar tinggi dari berbagai perspektif.

Kami juga secara aktif mencari mitra global institusional atau individu. Kami menawarkan kompensasi paling kompetitif di industri. Jika Anda memiliki pertanyaan, jangan ragu untuk menghubungi kami: Alamat: [email protected]