Minicircle DNA: Membuka Masa Depan Terapi Gen

Terapi gen, sebagai pendekatan terapi mutakhir, membawa harapan baru bagi banyak penyakit yang tidak dapat disembuhkan. Di antaranya, DNA minicircle (mcDNA), yang berfungsi sebagai pembawa DNA non-virus, secara bertahap menunjukkan daya tariknya yang unik.

Pengenalan mcDNA

mcDNA berasal dari DNA plasmid (pDNA) dengan menghilangkan sekuens prokariotik dan hanya mempertahankan sekuens eukariotik, sehingga membentuk vektor pengiriman gen yang lebih kecil dan lebih aman. Dibandingkan dengan pDNA, mcDNA secara signifikan mengurangi imunogenisitas, menghindari risiko transfer gen resistensi antibiotik, dan mencapai ekspresi gen yang lebih efisien dalam sel, sehingga meningkatkan kemanjuran pengobatan.

Yaohai Bio-Pharma telah membangun platform produksi yang sesuai dengan GMP untuk plasmid sirkular dan linier, didukung oleh pengembangan proses yang matang dan pengalaman produksi GMP. Yaohai dapat memenuhi berbagai kebutuhan klien, mulai dari penelitian praklinis, pengajuan IND, dan uji klinis, hingga produksi komersial, dan secara efisien memajukan kemajuan proyek.

Proses Produksi mcDNA

Produksi mcDNA melibatkan langkah-langkah seperti amplifikasi plasmid parental (PP), induksi rekombinasi, dan penghilangan pengotor. Saat ini, berbagai sistem rekombinase digunakan untuk produksi mcDNA, termasuk integrase Phage λ, rekombinase Phage P1 Cre, resolvase ParA, dan sistem endonuklease homing PhiC31-integrase/I-SceI. Namun, setiap sistem menghadapi tantangan dalam hal hasil, kemurnian, dan biaya. Untuk meningkatkan hasil, para peneliti mengeksplorasi strategi seperti memodifikasi galur gen dan mengoptimalkan kondisi fermentasi.

Pemurnian mcDNA

Metode pemurnian mcDNA telah berevolusi dari modifikasi tulang punggung menjadi teknik kromatografi baru. Meskipun ada berbagai strategi pemurnian, masalah seperti tingkat pemulihan yang rendah dan biaya yang tinggi tetap ada. Penelitian terkini telah mencapai pemurnian mcDNA yang efisien menggunakan teknik seperti kolom monolitik yang dimodifikasi dengan kadaverin, tetapi pengurangan biaya lebih lanjut dan peningkatan tingkat pemulihan masih diperlukan.

Analisis Kuantitatif mcDNA

Saat ini, analisis kuantitatif mcDNA terutama bergantung pada metode seperti qPCR dan elektroforesis, yang memiliki masalah dengan biaya tinggi dan akurasi terbatas. Penelitian terbaru telah memanfaatkan teknologi kromatografi untuk mencapai analisis kuantitatif mcDNA yang cepat dan akurat, menyediakan cara baru untuk pengendalian kualitas mcDNA.

Prospek Aplikasi dan Tantangan mcDNA

mcDNA menunjukkan prospek aplikasi yang luas dalam terapi gen, vaksin DNA, dan terapi seluler. Namun, masalah seperti hasil yang rendah, biaya yang tinggi, pengendalian mutu yang sulit, dan efisiensi pengiriman in vivo yang terbatas masih perlu diatasi. Di masa mendatang, para peneliti akan fokus pada peningkatan hasil mcDNA, pengurangan biaya, pengoptimalan metode pengendalian mutu, dan pengembangan sistem pengiriman yang lebih efisien untuk mendorong pengembangan mcDNA dalam aplikasi klinis.

Kesimpulan

Sebagai pembawa DNA non-virus yang sedang berkembang, mcDNA memiliki potensi besar dalam terapi gen dan bidang terkait. Meskipun menghadapi banyak tantangan, dengan kemajuan penelitian dan teknologi, mcDNA diharapkan menjadi pembawa DNA non-virus yang paling populer di masa mendatang, yang akan membawa terobosan bagi bidang medis.

Yaohai Bio-Pharma juga secara aktif mencari mitra global baik institusional maupun individu dan menawarkan kompensasi paling kompetitif di industri ini. Jika Anda memiliki pertanyaan, jangan ragu untuk menghubungi kami: [email protected]