Γεια σου. Αναρωτηθήκατε ποτέ πώς οι επιστήμονες μπορούν να κλωνοποιήσουν ένα RNA; Το RNA είναι αυτό το ειδικό μόριο που βρίσκουμε στα κύτταρά μας και κάνει πολλά πράγματα για να παράγει πρωτεΐνες και οι πρωτεΐνες είναι εκεί, ώστε το σώμα μας να μπορεί να κάνει όλα τα σωστά πράγματα. Σε αυτή τη δόση, θα κάνουμε μια περιήγηση στο πολύ πιο περίεργο πρωτόκολλο που χρησιμοποιούν οι ερευνητές: μεταγραφή in vitro. Και το μόνο που σημαίνει είναι ότι οι επιστήμονες παίρνουν RNA και φτιάχνουν πολύ από αυτό σε έναν δοκιμαστικό σωλήνα (που είναι αυτό το μικρό βάζο που χρησιμοποιούν τα εργαστήρια) οπότε αφήστε το να μπούμε σε κάθε βήμα εδώ.
Έχοντας ολοκληρώσει την προηγούμενη ανάρτησή μου, συνειδητοποίησα ότι η τελευταία μπορεί να ήταν λίγο στεγνή. Έτσι, σύμφωνα με τη φόρμα τώρα που είστε καλά και πραγματικά στο διασκεδαστικό τρένο (δημιουργία RNA του sic): Τι αντιδραστήρια andc θα χρειαστούν για το EF σας; Για να το πετύχουμε αυτό, θα χρειαστούμε ειδικές πρωτεΐνες που ονομάζονται ένζυμα, πανομοιότυπες με το προϊόν της Yaohai Κατασκευή ανασυνδυασμένου ενδιάμεσου κινήματος. Καταλύει τις χημικές αντιδράσεις, αυτά τα ένζυμα βοηθούν στη διάσπαση. Τώρα λοιπόν χρειαζόμαστε μόνο το κομμάτι του DNA μας. Αυτή η συνάρτηση είναι το DNA που χρησιμοποιούμε ως πρότυπο για να αντιγράψουμε για το RNA μας. Απαιτούνται επίσης πρόσθετες ρυθμιστικές αλληλουχίες στο RNA, συγκεκριμένα νουκλεοτίδια. Αυτά τα νουκλεοτίδια είναι σαν μικροσκοπικά δομικά στοιχεία που πρέπει να συναρμολογηθούν για να δημιουργήσουν το RNA. Χρησιμοποιούμε επίσης κοντές σωλήνες μικρής διαμέτρου για να γονατίσουμε τη γευστική αξιολόγηση σε άλλες. Τέλος, χρειαζόμαστε ένα μηχάνημα (θερμοκυκλωτή) που να φροντίζει οι αντιδράσεις μας να είναι στη σωστή θερμοκρασία. Επιπλέον, ενδέχεται να χρειαστούμε μερικά εργαλεία και προϊόντα για συγκεκριμένα πειράματα.
Εδώ λοιπόν τα πράγματα αποκλίνουν, έχουμε έναν κλώνο RNA και τώρα μας αρέσει να έχουμε περισσότερα αντίγραφά του, επίσης Conjugate VLP Vaccines Manufacturing που αναπτύχθηκε από την Yaohai. Ο τρόπος για να επιτευχθεί η χρήση άλλου ενζύμου. Τ7 RNA πολυμεράση. Αυτό το μοναδικό ένζυμο, για παράδειγμα, αναγνωρίζει συγκεκριμένες περιοχές εντός του RNA. ένας κώνος άλματος για τη δημιουργία πολλών περισσότερων αντιγράφων του RNA στη διαδικασία. Σε αυτό το σημείο, θα προστεθούν περισσότερα στον κλώνο RNA από την Τ7 RNA πολυμεράση έως ότου δημιουργηθεί μια μάζα μεταγραφής ή μέχρι να του πούμε να σταματήσει.
Αφού απομονώσουμε το RNA όσο το δυνατόν περισσότερο, μετακινηθείτε προς τα κάτω για να δείτε πώς να καθαρίσετε και να αποθηκεύσετε το RNA για μελλοντική χρήση. Rhoades: Μερικές από αυτές τις μεθόδους είναι λίγο πιο ακραίες όσον αφορά την απομόνωση RNA - δεν θα το χρησιμοποιούσατε πάντα, αλλά μερικές φορές χρειάζεται για συγκεκριμένους τύπους πειραμάτων. Μόλις το RNA μας είναι απαλλαγμένο από τυχόν μολυντές, μπορεί να αποθηκευτεί κατεψυγμένο. Με αυτόν τον τρόπο αυτό είναι ασφαλές και μπορούμε στη συνέχεια να το χρησιμοποιήσουμε αργότερα στα διάφορα πειράματα.
Ποιότητα υλικού εκκίνησης: βεβαιωθείτε ότι το πρότυπο dna σας είναι καθαρό και δεν έχει καεί. Μπορείτε επίσης να συμπληρώσετε με πρόσφατα ανασυσταθέντα νουκλεοτίδια και πρόσφατα αποψυγμένα ένζυμα για να μεγιστοποιήσετε τις πιθανότητες ενός επιτυχημένου πειράματος.
Συνθήκες λεπτής ρύθμισης Όλα τα ένζυμα και τα νουκλεοτίδια τους λειτουργούν καλύτερα σε μια συγκεκριμένη θερμοκρασία και pH μέσα στο σώμα σας, καθώς και το Yaohai's Κόκκινο φθορίζον mRNA. Τώρα τροποποιήστε λίγο την απόχρωση μεταξύ των συνθηκών μέχρι να φτάσετε εκεί που είναι το κλειδί για τη μοναδική σας ρύθμιση.
Η αντίστροφη μεταγραφάση είναι ένα ασυνήθιστο ένζυμο, καθώς δημιουργεί ένα αντίγραφο DNA από ένα μόριο RNA. Χρησιμοποιήσαμε τόσο DNas όσο και ένα πρότυπο DNA (το cDNA) ως είσοδο για τη μέθοδο μεταγραφής in vitro για τη δημιουργία RNA. Ωστόσο, στα περισσότερα πειράματα οι επιστήμονες θα ήθελαν να μεταγράψουν το DNA σε RNA. Η αντίστροφη μεταγραφή είναι όπου παίρνει το όνομά της το ίδιο με Δοκιμή κατανομής mRNA poly-A κατασκευασμένο από τον Yaohai. Είναι ένα ανεκτίμητο εργαλείο σε όλη την επιστήμη - Από τη μελέτη μορίων RNA μέσα στα κύτταρα μέχρι την παραγωγή συμπληρωματικών κλώνων DNA για περαιτέρω πειράματα.
Πειράματα πραγματικής ζωής στα οποία το RNA είναι ένα από τα πιο συχνά χρησιμοποιούμενα μοριακά εργαλεία, μαζί με το προϊόν του Yaohai Παραγωγή εμβολίου VLP σε E. coli. Ποσοτικοί προσδιορισμοί: Αυτές οι δοκιμές μπορούν να αποκαλύψουν την ποσότητα οποιουδήποτε συγκεκριμένου μορίου που υπάρχει σε ένα δείγμα. Για παράδειγμα, οι επιστήμονες μπορούν να συνθέσουν ένα in vitro παρασκεύασμα μεταγραφής αντιγράφων RNA που προέρχεται από ένα στοχευμένο γονίδιο που βρίσκεται μέσα σε ένα κύτταρο. αναζητώντας RNA, το διαγνωστικό μπορεί να εκτελέσει μια αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) για να ενισχύσει αυτά τα αντίγραφα στο δείγμα. Αυτό δίνει τη δυνατότητα στους επιστήμονες να δουν πώς εκφράζονται τα γονίδια στα κύτταρα και επιτρέπει ακόμη και ορισμένες εξαιρετικά υψηλής απόδοσης δοκιμές, όπως η παρουσία βακτηριακής ή ιογενούς λοίμωξης και τη διάγνωση γενετικών διαταραχών.
Το in vitro Transcript Protocol είναι κορυφαίο στο CDMO μικροβιακών βιολογικών προϊόντων. Η εστίασή μας έχει επικεντρωθεί σε εμβόλια και θεραπευτικά που παράγονται από μικροβία που είναι κατάλληλα για τη διαχείριση της υγείας του ανθρώπου, της κτηνιατρικής καθώς και για τα κατοικίδια ζώα. Διαθέτουμε τις πιο αιχμής πλατφόρμες RD και τεχνολογία κατασκευής που καλύπτουν ολόκληρη τη διαδικασία, ξεκινώντας από την ανάπτυξη μικροβιακών στελεχών και τραπεζών κυττάρων, έως την ανάπτυξη διεργασιών και μεθόδων, έως την εμπορική και κλινική παραγωγή που διασφαλίζει την επιτυχή παράδοση καινοτόμων λύσεων. Με την πάροδο του χρόνου, έχουμε συσσωρεύσει τεράστιες γνώσεις για τη βιολογική επεξεργασία με βάση τα μικροβιακά στοιχεία. Πάνω από 200 έργα έχουν ολοκληρωθεί με επιτυχία και βοηθάμε τους πελάτες μας να συμμορφωθούν με κανονισμούς όπως εκείνοι του FDA των ΗΠΑ και του EMA της ΕΕ. Τους βοηθάμε επίσης να πλοηγηθούν στο TGA της Αυστραλίας και στο NMPA της Κίνας. Η επαγγελματική μας τεχνογνωσία και η εκτεταμένη εμπειρία μας επιτρέπουν να ανταποκρινόμαστε γρήγορα στις απαιτήσεις της αγοράς και να παρέχουμε εξατομικευμένες υπηρεσίες CDMO.
Η Yaohai Bio-Pharma έχει εμπειρία στην παραγωγή βιολογικών φαρμάκων που δημιουργούνται από in vitro πρωτόκολλο μεταγραφής. Προσφέρουμε προσαρμοσμένες λύσεις RD και κατασκευής, διασφαλίζοντας παράλληλα ότι δεν υπάρχουν κίνδυνοι. Έχουμε εμπλακεί σε διάφορους τρόπους, όπως εμβόλια υπομονάδας ανασυνδυασμένα, πεπτιδικές ορμόνες, κυτοκίνες, αυξητικούς παράγοντες, ένζυμα αντισωμάτων ενός τομέα, πλασμιδικό DNA MRNA και πολλά άλλα. Είμαστε ειδικοί σε πολλούς μικροοργανισμούς, συμπεριλαμβανομένης της εξωκυτταρικής και ενδοκυτταρικής έκκρισης ζυμομύκητα (αποδόσεις έως 15 g/L) καθώς και για βακτήρια ενδοκυτταρικά διαλυτά και εγκλειστικά (αποδόσεις έως και 10 g/L). Έχουμε επίσης δημιουργήσει μια πλατφόρμα ζύμωσης BSL-2 για τη δημιουργία βακτηριακών εμβολίων. Εστιάζουμε στη βελτίωση των διαδικασιών, στην αύξηση των αποδόσεων των προϊόντων και στη μείωση του κόστους παραγωγής. Χρησιμοποιώντας μια ισχυρή ομάδα τεχνολογίας, μπορούμε να διασφαλίσουμε την άμεση και αξιόπιστη παράδοση του έργου που θα φέρει το προϊόν σας στην αγορά πιο γρήγορα.
Η Yaohai Bio-Pharma, ένας κορυφαίος 10 κατασκευαστής βιολογικών προϊόντων, ειδικεύεται στη μικροβιακή ζύμωση. Έχουμε κατασκευάσει μια σύγχρονη εγκατάσταση με ισχυρές δυνατότητες RD και προηγμένο εξοπλισμό. Διαθέτουμε πέντε γραμμές παραγωγής φαρμακευτικών ουσιών που συμμορφώνονται με τις απαιτήσεις GMP για μικροβιακή ζύμωση και καθαρισμό. Διαθέτουμε επίσης δύο αυτοματοποιημένες γραμμές πλήρωσης φινιρίσματος για φυσίγγια, φιαλίδια και προγεμισμένες σύριγγες. Οι κλίμακες ζύμωσης που είναι διαθέσιμες για χρήση κυμαίνονται από in vitro Transcript Protocol έως 2000L. Οι προδιαγραφές για το γέμισμα ενός φιαλιδίου κυμαίνονται από 1ml έως 25ml. Οι προδιαγραφές πλήρωσης προγεμισμένης σύριγγας ή φυσιγγίου κυμαίνονται από περίπου 1-3 ml. Οι εγκαταστάσεις παραγωγής μας που είναι συμβατές με το cGMP διασφαλίζουν τη συνεχή παροχή κλινικού δείγματος καθώς και εμπορικών ειδών. Το εργοστάσιό μας παράγει μεγάλα μόρια τα οποία αποστέλλονται στον κόσμο.
Το Yaohai BioPharma είναι ένα Top 10 Μικροβιακό CDMO που ενσωματώνει in vitro πρωτόκολλο μεταγραφής καθώς και ρυθμιστικές υποθέσεις. Διαθέτουμε ένα σύστημα διαχείρισης ποιότητας που είναι σύμφωνο με τα τρέχοντα πρότυπα GMP καθώς και με τους παγκόσμιους κανονισμούς. Η ομάδα μας από ειδικούς σε ρυθμιστικά θέματα είναι ικανή σε παγκόσμια ρυθμιστικά πλαίσια για την επιτάχυνση των βιολογικών εκτοξεύσεων. Διασφαλίζουμε ανιχνεύσιμες διαδικασίες παραγωγής προϊόντων ποιότητας, καθώς και συμμόρφωση με τους κανόνες του FDA των ΗΠΑ και του EMA της ΕΕ. Το Australia TGA και το China NMPA είναι επίσης ικανοποιημένοι. Η Yaohai BioPharma πέρασε με επιτυχία τον επιτόπιο έλεγχο του Εξουσιοδοτημένου Ατόμου (QP) της Ευρωπαϊκής Ένωσης για το σύστημα ποιότητας GMP καθώς και τις εγκαταστάσεις παραγωγής μας. Επιπλέον, έχουμε εκκαθαρίσει τους πρώτους ελέγχους πιστοποίησης του Συστήματος Διαχείρισης Ποιότητας ISO9001, του Συστήματος Περιβαλλοντικής Διαχείρισης ISO14001 και του Συστήματος Διαχείρισης Υγείας και Ασφάλειας στην Εργασία ISO45001.