5'-এন্ড ক্যাপিং এমআরএনএর একটি অপরিহার্য পরিবর্তন। ক্যাপ স্ট্রাকচার সহ mRNAs, বিশেষ করে Cap1 স্ট্রাকচার, mRNAs ভিভোতে সহজাত ইমিউন রেসপন্স এড়াতে সাহায্য করে, যার ফলে দক্ষ প্রোটিন অনুবাদ হয়।
এনজাইমেটিক ক্যাপিং (দুই-পদক্ষেপ পদ্ধতি) হল mRNA ক্যাপিংয়ের প্রচলিত পদ্ধতি, ইউক্যারিওটিক জীবের ক্যাপিং প্রক্রিয়ার মতো। এনজাইমের একটি সিরিজের ক্রিয়ায়, 7-মিথাইলগুয়ানিন (m7G) একটি 5'-5' ট্রাইফসফেট বন্ডের মাধ্যমে mRNA-এর 5'-এন্ডের সাথে যুক্ত হয় এবং ক্যাপ স্ট্রাকচার ক্যাপ 1 (m7GpppN) গঠনের জন্য মিথাইলেশন পরিবর্তন করে।
প্রাকৃতিক ক্যাপ গঠনের চিত্র
এনজাইমেটিক ক্যাপিং প্রতিক্রিয়া প্রবাহ নিম্নরূপ:
লিনিয়ারাইজড প্লাজমিড ডিএনএ টি 7 পলিমারেজের উপস্থিতিতে ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন (আইভিটি) এর টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহৃত হয় এবং ভ্যাক্সিনিয়া ক্যাপিং এনজাইম এবং 5'-ও ব্যবহার করে এক-ধাপে পরিশোধনের পরে 2' এন্ড-ক্যাপ কাঠামো সহ mRNA গঠিত হয়। -মিথাইলট্রান্সফেরেজ।
পরিষেবার বিবরণ
ঐচ্ছিক পরিষেবা | পরিষেবা বিশদ | প্রসবের সময়কাল (দিন) |
mRNA এনজাইমেটিক ক্যাপিং | এনজাইমেটিক ক্যাপিং প্রতিক্রিয়া | 1 |
ক্যাপিং প্রতিক্রিয়া অপ্টিমাইজেশান - ঐচ্ছিক | প্রতিক্রিয়া উপাদান নকশা এবং অপ্টিমাইজেশান | 3 ~ 7 |
আমাদের বৈশিষ্ট্য
- ক্যাপিং প্রতিক্রিয়া উপাদানের ডিজাইন এবং অপ্টিমাইজেশন
ক্যাপিং প্রতিক্রিয়া উপাদানটি অপ্টিমাইজ করা হয়েছে, এবং mRNA ট্রান্সক্রিপ্টের উত্পাদন ব্যাপকভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে।
- ইন ভিট্রো এক্সপ্রেশন যাচাইকরণ
ক্যাপড mRNA 293T কোষে স্থানান্তরিত হয় এবং লক্ষ্য প্রোটিনের অভিব্যক্তি সনাক্ত করা যায়।
RNaseson পরীক্ষামূলক পরিবেশ এবং ভোগ্য সামগ্রীর কঠোর নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে, mRNA অবক্ষয় কার্যকরভাবে প্রতিরোধ করা হয়।
কেস স্টাডি
ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মার mRNA প্ল্যাটফর্ম একটি নিখুঁত ক্যাপিং প্রতিক্রিয়া প্রক্রিয়া তৈরি করেছে।
eGFP mRNA-এর জন্য, এনজাইমেটিক ক্যাপিং দ্বারা প্রস্তুত একটি mRNA প্রাক-পণ্য, উচ্চ স্তরে একটি eGFP ফ্লুরোসেন্স সিগন্যাল (সবুজ প্রতিপ্রভ) 293 ঘন্টা ধরে 24T কোষ স্থানান্তর করার পরে পর্যবেক্ষণ করা যেতে পারে, যা ওয়েস্টার্ন ব্লট (WB) দ্বারা সনাক্ত করা হয়, এটি প্রমাণ করে যে টার্গেট প্রোটিন বর্ধিত সবুজ ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন (ইজিএফপি) দক্ষতার সাথে ভিট্রোতে প্রকাশ করা যেতে পারে।
293T কোষে এনজাইমেটিক ক্যাপড eGFP mRNA এর প্রকাশ
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
কোন
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
