এমআরএনএ-র ব্যাপক উৎপাদনের ক্ষেত্রে, ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন (আইভিটি) একটি আরও দক্ষ এবং পরিপক্ক পদ্ধতি। IVT প্রতিক্রিয়া টেমপ্লেট হিসাবে T7 প্রোমোটার ধারণকারী লিনিয়ারাইজড প্লাজমিড ডিএনএ গ্রহণ করে, এবং mRNA টি 7 আরএনএ পলিমারেজের উপস্থিতিতে সাবস্ট্রেট হিসাবে নিউক্লিওসাইড ট্রাইফসফেটস (এনটিপি) দিয়ে সংশ্লেষিত হয়।
নিউক্লিওটাইড পরিবর্তন হল mRNA-এর অন্বেষণে একটি অগ্রগতি, যেখানে অপরিবর্তিত mRNA অণুগুলি অন্তর্নিহিত অনাক্রম্যতা সক্রিয় করতে অন্তঃকোষীয় RNA সেন্সর দ্বারা স্বীকৃত হয়। ভিভো ইমিউনোজেনিসিটি এবং অনুবাদ দক্ষতায় mRNA-এর বিবেচনার জন্য, IVT প্রক্রিয়া সাধারণত নির্দিষ্ট ধরণের পরিবর্তিত NTP-কে নিয়োগ করে এবং সাধারণ পরিবর্তিত নিউক্লিওটাইডগুলি হল সিউডোরিডাইন (Ψ), N1-মিথাইল-সিউডোরিডাইন (N1Ψ), এবং 5-মিথাইলসাইটোসিন (5mC)।
এমআরএনএর ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন প্রক্রিয়ায়
ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন (IVT) প্রতিক্রিয়া চিত্র
পরিষেবার বিবরণ
ঐচ্ছিক পরিষেবা | পরিষেবা বিশদ | প্রসবের সময়কাল (কাজের দিন) |
ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন (IVT) | IVT, ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন | 1 |
| নিউক্লিওটাইড পরিবর্তন (Ψ/N1Ψ/5mC, ইত্যাদি) |
| DNA টেমপ্লেট অপসারণ (DNase I) |
IVT শর্ত অপ্টিমাইজেশান - ঐচ্ছিক | IVT প্রতিক্রিয়া উপাদান নকশা এবং অপ্টিমাইজেশান | 2-5 |
আমাদের বৈশিষ্ট্য
- বৈচিত্র্যময় নিউক্লিওটাইড পরিবর্তন কৌশল
ভিভোতে এমআরএনএ স্থায়িত্ব এবং প্রোটিন এক্সপ্রেশন উন্নত করুন।
- কঠোর পরীক্ষা ডিজাইন এবং অপ্টিমাইজেশান
mRNA টুকরা প্রস্তুতি 10kb পর্যন্ত অর্জন করা যেতে পারে।
IVT প্রতিক্রিয়া শর্ত অনুকূল করে, প্রতিলিপি হার 1:200 পর্যন্ত হয়।
একটি পরীক্ষামূলক পরিবেশের মাধ্যমে RNase এর কঠোর নিয়ন্ত্রণ এবং ভোগ্যপণ্য কার্যকরভাবে mRNA অবক্ষয় প্রতিরোধ করতে পারে।
কেস স্টাডি
বর্তমান IVT প্রতিক্রিয়া সিস্টেমটি প্রায় 100 এনটি দৈর্ঘ্যের সিন্থেটিক সিস্টেমের জন্য মোটামুটিভাবে অপ্টিমাইজ করা হয়েছে, ইচ্ছাকৃত দৈর্ঘ্যের mRNAগুলির জন্য নয়। এমআরএনএ ক্রম যত দীর্ঘ হবে, প্রতিলিপি করা তত বেশি কঠিন এবং অবনতির ঝুঁকি তত বেশি।
প্রায় 10 কেবি দৈর্ঘ্যের সাথে কাস্টমাইজড এমআরএনএ সিকোয়েন্স প্রস্তুত করার জন্য, ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা সফলভাবে 1:135 এর উচ্চ ট্রান্সক্রিপশন অনুপাত সহ উচ্চ-মানের নমুনা প্রস্তুত করেছে এবং 135 μg লিনিয়ারাইজড প্লাজমিডের পরে প্রাথমিকভাবে বিশুদ্ধ mRNA পণ্যগুলির 1 μg প্রাপ্ত করেছে। কঠোর পরীক্ষামূলক নকশা, প্রতিক্রিয়া অবস্থার ক্রমাগত অপ্টিমাইজেশন এবং RNase-এর কঠোর নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে ভিট্রোতে প্রতিলিপি করা হয়েছিল।
এমআরএনএ আইডেন্টিফাই (আগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
কোন
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
