বৃত্তাকার mRNA (circRNA) ব্যাপকভাবে জিন বা প্রোটিন ফাংশন গবেষণায় ব্যবহৃত হয়েছে। ইতিমধ্যে, এটি mRNA-এর মতোই প্রফিল্যাকটিক এবং থেরাপিউটিক বায়োলজিক্সের বিকাশে জনপ্রিয়।
ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা উচ্চ-মানের RNA প্রদানের জন্য সার্কআরএনএ সংশ্লেষণ প্রযুক্তির একটি সেট স্থাপন করেছে, যেমন সিকোয়েন্স ডিজাইন এবং অপ্টিমাইজেশান, ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন (IVT), সার্কুলারাইজেশন/সাইক্লাইজেশন, পরিশোধন এবং লিপিড ন্যানো পার্টিকেল (LNP) এনক্যাপসুলেশন। সমস্ত পণ্য কঠোর মান নিয়ন্ত্রণ (QC) মান অধীনে মুক্তি.
রৈখিক mRNA-এর সাথে তুলনা করে, বৃত্তাকার RNA (circRNA) গঠনে আরও স্থিতিশীল এবং বর্তমান নিউক্লিক অ্যাসিড ড্রাগ গবেষণায় এটি একটি প্রধান হট স্পট। সংক্রামক রোগের প্রতিষেধক ভ্যাকসিন, থেরাপিউটিক অনকোলজি ভ্যাকসিন, থেরাপিউটিক অনকোলজি ড্রাগস, প্রোটিন রিপ্লেসমেন্ট থেরাপি, রিজেনারেটিভ মেডিসিন, সেল এবং জিন থেরাপি (CGT) সহ কোডিং সার্কআরএনএ বা নন-কোডিং সার্কআরএনএ, বিভিন্ন ক্ষেত্রে এটির বিস্তৃত অ্যাপ্লিকেশন রয়েছে। , আণবিক স্পঞ্জ ভূমিকা এবং RNA aptamer.
প্রক্রিয়া | ঐচ্ছিক পরিষেবা | পরিষেবা বিশদ | প্রসবের সময়কাল (দিন) |
সার্কআরএনএ সিকোয়েন্স ডিজাইন এবং অপ্টিমাইজেশান | কোডিং সিকোয়েন্সের ডিজাইন এবং অপ্টিমাইজেশন | সিডিএস কোডন অপ্টিমাইজেশান | 1 |
নন-কোডিং সিকোয়েন্সের ডিজাইন এবং অপ্টিমাইজেশন | ইন্ট্রন এবং এক্সন সিকোয়েন্স, হোমোলগাস আর্ম এবং স্পেসারের ডিজাইন এবং অপ্টিমাইজেশন | 1-2 | |
বৃত্তাকার প্লাজমিড প্রস্তুতি | জিন সংশ্লেষণ | জিন সংশ্লেষণ (তৃতীয় পক্ষ) | 7-10 |
প্লাজমিড প্রশস্তকরণ | প্লাজমিড প্রশস্তকরণ | 2 | |
প্লাজমিড নিষ্কাশন | |||
লিনিয়ারাইজড প্লাজমিড প্রস্তুতি | প্লাজমিড লাইনারাইজেশন এবং পরিশোধন | প্লাজমিড লিনিয়ারাইজেশন | 1 |
লিনিয়ারাইজেশন ডিএনএ বিশুদ্ধকরণ | |||
ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন এবং সাইক্লাইজেশন | ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন এবং সাইক্লাইজেশন | ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন এবং সাইক্লাইজেশন প্রতিক্রিয়া | 1-2 |
RNase R হজম | |||
অপ্টিমাইজেশান-ঐচ্ছিক | প্রতিক্রিয়া রচনা, সময় অপ্টিমাইজেশান | 2-5 | |
সার্কআরএনএ পরিশোধন | প্রচলিত পরিশোধন পদ্ধতি | লিথিয়াম ক্লোরাইড বৃষ্টিপাত | 1 |
চৌম্বক পুঁতি পরিশোধন | 1 | ||
অত্যন্ত বিশুদ্ধ সার্কআরএনএ পরিশোধন | প্রিপারেটিভ হাই পারফরমেন্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) | 1-2 | |
বাফার এক্সচেঞ্জ | Ultrafiltration | 1 | |
সার্কআরএনএ লাইওফিলাইজেশন | নমুনা ভর্তি | ভর্তি | 2-3 |
লাইওফিলাইজেশন | প্রি-ফ্রিজিং | ||
প্রাথমিক শুকানো (পরমানন্দ) | |||
সেকেন্ডারি শুকানো (ডিসোর্পশন) | |||
সার্কআরএনএ-এলএনপি এনক্যাপসুলেশন | এলএনপি এনক্যাপসুলেশন | উপাদান এবং তরল pretreatment | 2 |
মাইক্রোফ্লুইডিক ডিভাইস মিক্সিং | |||
বাফার এক্সচেঞ্জ | স্পর্শক প্রবাহ পরিস্রাবণ | 1 | |
জীবাণুমুক্ত করা | পরিস্রাবণ | ||
প্লাজমিড ডিএনএর গুণমান নিয়ন্ত্রণ | একাগ্রতা/বিশুদ্ধতা | আল্ট্রাভায়োলেট (UV) স্পেকট্রোফটোমেট্রি | 1-2 |
প্লাজমিড গঠন | অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস (AGE) | ||
কৈশিক ইলেক্ট্রোফোরেসিস (CE)-ঐচ্ছিক | |||
প্লাজমিড শনাক্ত করুন | সীমাবদ্ধতা এনজাইম সনাক্তকরণ/AGE | ||
সার্কআরএনএর গুণমান নিয়ন্ত্রণ | একাগ্রতা/বিশুদ্ধতা | আল্ট্রাভায়োলেট (UV) স্পেকট্রোফটোমেট্রি | - |
বিশুদ্ধতা | অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস (AGE)/ই-জেল | 0.5 | |
HPLC-ঐচ্ছিক | 1 | ||
সার্কআরএনএ-এলএনপির গুণমান নিয়ন্ত্রণ | এনক্যাপসুলেশন দক্ষতা | রিবো গ্রিন পদ্ধতি | 1 |
কণা আকার | ডাইনামিক লাইট স্ক্যাটারিং (DLS) | 1 | |
পলিডিসপারসিটি সূচক | ডাইনামিক লাইট স্ক্যাটারিং (DLS) | 1 | |
জেটা পটেনশিয়াল | ডাইনামিক লাইট স্ক্যাটারিং (DLS) | 1 | |
কোষ-ভিত্তিক শক্তি পরীক্ষা | সেল ট্রান্সফেকশন | কোষ প্রলেপ, কোষ স্থানান্তর | 4 |
লক্ষ্য প্রোটিন সনাক্তকরণ | ফ্লুরোসেন্স পর্যবেক্ষণ, ওয়েস্টার্ন ব্লট/ইলিসা | 1-3 |
আমরা উন্নত সবুজ ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন circRNA (eGFP circRNA), mCherry circRNA, luciferase circRNA কে 293T কোষে স্থানান্তরিত করেছি এবং ফ্লুরোসেন্স, লুমিনেসেন্ট বা রঙের সংকেত, ওয়েস্টার্ন ব্লট (WB), এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসোর (ইএলআইএসআইএসএ) এর মাধ্যমে লক্ষ্য প্রোটিন সনাক্ত করেছি।
ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা দ্বারা সার্কআরএনএ নমুনার কোষ-ভিত্তিক শক্তি পরীক্ষা