MRNA শক্তিশালীতা পরীক্ষার গুরুত্ব
MRNA ভ্যাকসিন এবং চিকিৎসার দ্রুত উন্নয়নের সাথে, mRNA-এর শক্তিশালীতা (তাদের জৈব গতিবিধি নির্ধারণ) পরীক্ষা করার জন্য বিশেষ প্যানেলের বিশ্লেষণ পদ্ধতির প্রয়োজন হয়, যা mRNA-এর অনুবাদ দক্ষতা জড়িত। এই পদ্ধতিগুলি সাধারণত সেল ট্রান্সফেশন এবং লক্ষ্য প্রোটিনের ফাংশনাল পরীক্ষার উপর ভিত্তি করে।
যাওহাই বায়ো-ফার্মা mRNA ঔষধি বা LNP পণ্যের জন্য সেল-ভিত্তিক শক্তিশালীতা পরীক্ষা প্রদান করে, যাতে সেল ট্রান্সফেশন (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 সেল ইত্যাদি) এবং ELISA বা ওয়েস্টার ব্লটিং (WB) পরীক্ষা অন্তর্ভুক্ত রয়েছে।
শক্তিশালীতা পরীক্ষার জন্য নিয়ন্ত্রণ আবেদন
WHO-এর ব্যবস্থাপনা বিবেচনা অনুযায়ী, "প্রতি ব্যাচ ফাইনাল ভ্যাকসিনের শক্তি নির্ধারণ করতে হবে একটি উপযুক্ত পরিমাণগত এবং যাচাইকৃত ফাংশনাল পদ্ধতি(গুলো) ব্যবহার করে। সম্ভাব্য in vitro শক্তি পরীক্ষা ঘটনাগুলো cell-based transfection systems বা cell-free assays অন্তর্ভুক্ত করতে পারে।" এবং USP একটি "cell-based assay" mRNA-এর শক্তি পরীক্ষা করতে সুপারিশ করেছে, অর্থাৎ, লক্ষ্য প্রোটিনের এক্সপ্রেশন।
প্রক্রিয়া
ধাপ 1. mRNA বা mRNA-LNP দ্বারা Cell-based Transfection
সেলগুলি কালচার করা হয় এবং mRNA বা mRNA-LNP দ্বারা ট্রান্সফেক্ট করা হয়। বিস্তারিতভাবে, mRNA একটি ট্রান্সফেকশন রিজেন্ট সঙ্গে মিশিয়ে ট্রান্সফেকশন করা হয়, যখন mRNA-LNP সরাসরি সেলে ট্রান্সফেকশন করা হয়। ২৪-৪৮ ঘন্টা পরে, এক্সপ্রেস প্রোটিন সহ সুপারনটেন্টকে সেন্ট্রিফিউজিং দ্বারা পরিষ্কার করুন।
ধাপ 2. লক্ষ্য প্রোটিনের Functional Assays
এলাইজা বা ডব্লিউবি এসেসমেন্ট করুন যে লক্ষ্য প্রোটিনগুলির ফাংশনাল বাইন্ডিং মূল্যায়ন করে।
কেস স্টাডি
সেল-ভিত্তিক মাশroom RNA নমুনার শক্তিশালীতা এসেসমেন্ট
য়াওহাই-বায়োফার্মা এমআরএনএ-এর জন্য সেল-ভিত্তিক শক্তিশালীতা এসেসমেন্ট পদ্ধতি উন্নয়ন করেছে, যা সেল কালচার, সেল ট্রান্সফেকশন এবং প্রোটিন ফাংশনাল এসেসমেন্ট অন্তর্ভুক্ত। আমরা eGFP এমআরএনএ, mCherry এমআরএনএ, লুসিফেরেস এমআরএনএ, স্পাইক প্রোটিন এমআরএনএ ২৯৩টি সেলে ট্রান্সফেক্ট করেছি এবং ফ্লোরেসেন্স, লুমিনেসেন্ট বা রঙিন সংকেত, WB, ELISA এর মাধ্যমে লক্ষ্য প্রোটিন সনাক্ত করেছি।
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
