N-Glycosylation سائٹ کا تجزیہ گلائکین کے افعال کو سمجھنے کے لیے اہم ہے۔ Yaohai Bio-Farma N-Glycosylation سائٹ کے لیے انزیمیٹک کلیویج کے بعد Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) کا استعمال کرتا ہے۔
ہم مختلف بڑے مالیکیولز کی پروٹین کی ساختی خصوصیات میں شامل رہے ہیں، بشمول ریکومبیننٹ سبونائٹ ویکسینز، نینو باڈیز/وی ایچ ایچز/ سنگل ڈومین اینٹی باڈیز (ایس ڈی اے بی ایس)، اینٹی باڈی فریگمنٹس، ہارمونز/پیپٹائڈس، سائٹوکائنز، گروتھ فیکٹرز (جی ایف)، انزائمز، کولاجز، وغیرہ
N-Glycosylation سائٹ کے لیے ریگولیٹری تقاضے
ICH Q6B رہنما خطوط کے مطابق، "گلائکوپروٹینز کے لیے، کاربوہائیڈریٹ مواد (غیر جانبدار شکر، امینو شکر، اور سیالک ایسڈ) کا تعین کیا جاتا ہے۔ مزید برآں، کاربوہائیڈریٹ چینز کی ساخت، اولیگوساکرائڈ پیٹرن (اینٹینری پروفائل)، اور پولی پیپٹائڈ چین کی گلائکوسیلیشن سائٹ (سائٹس) کا ممکنہ حد تک تجزیہ کیا جاتا ہے۔
تجزیاتی طریقہ
تجزیہ |
طریقے |
N-glycosylation سائٹ |
انزیمیٹک کلیویج کے بعد مائع کرومیٹوگرافی-ماس سپیکٹرو میٹری (LC-MS) |
طریقہ کار
1. ٹرپسن یا دیگر پروٹیز کا استعمال کرتے ہوئے پروٹین کا انزائم ہاضمہ
2. الگ الگ ٹکڑے گلائکوپیپٹائڈس
3. LC-MS کے ذریعے N-glycosylation سائٹ کی تصدیق کریں۔
4 ڈیٹا کا تجزیہ کریں۔