N-Glycosylation سائٹ کا تجزیہ غیر ضروری حروف کے لیے گلائکینز کے فنکشنز کو سمجھنے کے لیے اہم ہے۔ Yaohai Bio-Pharma enzymatic cleavage کے بعد Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) استعمال کرتا ہے N-Glycosylation سائٹ کے لیے۔
ہم مختلف بڑے مolecules کی پروٹین سٹرکچرل کاریکٹرائزیشن میں شریک رہے ہیں، جن میں ریکومبنٹ سبیونٹ واکسن، نانوبائیز/VHHs/ سینگل-ڈومین اینٹی بڈیز (sdAbs)، اینٹی بڈی فریگمنٹس، هارمونز/پیپٹائیڈز، سائٹوکائنز، گروتھ فیکٹرز (GF)، انزایمز، کالاجینز، اور دیگر شامل ہیں۔
N-Glycosylation سائٹ کے لیے منظمیاتی متطلبات
ICH Q6B Guidelines کے مطابق، "glycoproteins کے لیے، کاربوہائیڈریٹ کان텐ٹ (neutral sugars، amino sugars، اور sialic acids) معلوم کیا جاتا ہے۔ مزید یہ، پولیپیپٹائیڈ چین کے کاربوہائیڈریٹ چینز کی ساخت، الیگوساکارائیڈ پیٹرن (antennary profile)، اور glycosylation سائٹ(s) کو زیادہ سے زیادہ حد تک تحلیل کیا جاتا ہے۔
تحلیلی طریقہ
تجزیہ |
طریقے |
N-گلیکوسیلیشن سائٹ |
انزائیمیٹک کلیویج کے بعد لیکوئیڈ کرومیٹوگرافی-مس سپیکٹرومیٹری (LC-MS) |
روند
1. پروٹین کو ٹرائپسن یا دیگر پروٹیئیس کے استعمال سے انزیمی ہضم
2. فراگمنٹ گلیکوپیپٹائڈز کو الگ کریں
3. LC-MS کے ذریعہ N-گلیکوسیلیشن سائٹ تصدیق کریں
4. ڈیٹا تحلیل کریں