سیلف ایمپلیفائنگ ایم آر این اے (سا آر این اے) جسے ریپلیکن آر این اے بھی کہا جاتا ہے، وٹرو ٹرانسکرپشن (IVT) mRNA سیکوینسز اور وائرل ریپلیکیس جینز کو الفا وائرس یا فلاوی وائرس سے اخذ کرتا ہے۔ وائرل ریپلیکیس جینز ایم آر این اے کو خود کو بڑھاوا دینے کی اجازت دیتے ہیں، جس کے نتیجے میں پروٹین کے اظہار میں اضافہ ہوتا ہے اور نان ایمپلیفائنگ ایم آر این اے کے مقابلے میں آر این اے کی کم از کم مطلوبہ خوراک ہوتی ہے۔ ایک اور پہلو یہ ہے کہ saRNA نسبتاً بڑا مالیکیول ہے (14 kb سے زیادہ)۔
یاوہائی بائیو فارما نے ایم آر این اے کی ترکیب کی ٹیکنالوجیز کا ایک سیٹ قائم کیا ہے تاکہ نان ایمپلیفائنگ ایم آر این اے اور سیلف ایمپلیفائنگ ایم آر این اے (1000 nt ~ 14000 nt) فراہم کیا جا سکے، جیسے کہ ترتیب ڈیزائن اور اصلاح، IVT، پیوریفیکیشن، لائوفیلائزیشن اور لپڈ نینو پارٹیکل (انپلیفائنگ) . تمام پروڈکٹس کو کوالٹی کنٹرول کے سخت معیارات کے تحت جاری کیا جاتا ہے۔
تصویر 1 IVT mRNAs کی ساختی خصوصیات: روایتی، سرکلر اور سیلف ایمپلیفائنگ mRNA۔
سیلف ایمپلیفائنگ آر این اے میں چار غیر ساختی پروٹین (جسے nsP1، nsP2، nsP3، اور nsP4 نامزد کیا گیا ہے) پر مشتمل ہے، جو الفا وائرسز، وینزویلا کے ایکوائن انسیفلائٹس وائرس (VEEV) سے ماخوذ ہیں۔ ان میں سے، nsP1 دوہری انزیمیٹک سرگرمیوں کی نمائش کرتا ہے، یعنی GTase اور N7MTase، جبکہ nsP2 RTPase سرگرمی رکھتا ہے، جو Cap 0 ڈھانچہ پیدا کرنے کے لیے IVT mRNA کو کیپ کرنے کے لیے اہم ہے۔ مزید برآں، nsP2 ایک پروٹیز اور ہیلیکیس کے طور پر کام کرتا ہے، جو پورے NSP کمپلیکس کی پیچیدہ پروسیسنگ میں سہولت فراہم کرتا ہے۔ nsP3 کا قطعی فعل مضحکہ خیز رہتا ہے، پھر بھی یہ متنوع میزبان سیل پروٹینز کے ساتھ تعاملات میں مشغول رہتا ہے، اس طرح میزبان کی طرف سے نصب اینٹی وائرل ردعمل کو کم کرنے میں معاون ہوتا ہے۔
ایک الفا وائرس سب جینومک پروموٹر (SGP) خطہ دلچسپی کے جین (GOI) سے پہلے واقع ہے۔ ایس جی پی عنصر وائرل این ایس پی پروٹینز کو انکوڈنگ کی ترتیب کے پڑھنے کو نظرانداز کرکے GOI ٹرانسکرپشن کے آغاز میں سہولت فراہم کرتا ہے۔
تصویر 2 یاوہائی بائیو فارما RNASci پلیٹ فارم کے eGFP saRNA کی ترکیب اور سیل اسیس۔
saRNA کی ترکیب پروٹوکول mRNA کی طرح ہے: اپنی مرضی کے مطابق mRNA ترکیب