ایم آر این اے پوٹینسی پرکھ کی اہمیت
ایم آر این اے ویکسین اور علاج کی تیز رفتار ترقی کے ساتھ، طاقت کو جانچنے کے لیے تجزیہ کے طریقوں کے ایک مخصوص پینل کی ضرورت ہے (ان کی حیاتیاتی سرگرمی کی وضاحت)، جس میں ایم آر این اے کی ترجمہی کارکردگی شامل ہے۔ یہ طریقے عام طور پر سیل ٹرانسفیکشن اور ٹارگٹ پروٹین کے فنکشنل اسیس پر مبنی ہوتے ہیں۔
Yaohai Bio-Pharma mRNA منشیات کے مادوں یا LNP مصنوعات کے لیے سیل پر مبنی پوٹینسی اسسز پیش کرتا ہے، بشمول سیل ٹرانسفیکشن (293T، HepG2، HeLa، K562، U937، Raw264.7 سیلز، وغیرہ) اور ELISA یا ویسٹرن بلاٹنگ (WB) اسیسز۔
پوٹینسی اسسز کے لیے ریگولیٹری تقاضے
ڈبلیو ایچ او کے ریگولیٹری تحفظات کے مطابق، "فائنل ویکسین کے ہر لاٹ کی طاقت کا تعین مناسب مقداری اور توثیق شدہ فنکشنل طریقہ (طریقے) کے ذریعے کیا جانا چاہیے۔ ممکنہ طور پر وٹرو پوٹینسی اسسیس میں سیل پر مبنی ٹرانسفیکشن سسٹم یا سیل فری اسسیس شامل ہو سکتے ہیں۔ اور یو ایس پی نے ایم آر این اے کی طاقت کو جانچنے کے لیے ایک "سیل پر مبنی پرکھ" کی سفارش کی، یعنی ہدف پروٹین کا اظہار۔
ضابطے
مرحلہ 1۔ mRNA یا mRNA-LNP کے ساتھ سیل بیسڈ ٹرانسفیکشن
خلیات mRNA یا mRNA-LNP کے ساتھ مہذب اور منتقل ہوتے ہیں۔ تفصیل میں، mRNA کو ٹرانسفیکشن ری ایجنٹ کے ساتھ ملانے کے بعد تبدیل کیا جاتا ہے، جبکہ mRNA-LNP براہ راست خلیوں میں منتقل ہوتا ہے۔ 24-48 گھنٹوں کے بعد، سینٹرفیوگریشن کے ذریعے اظہار شدہ پروٹین پر مشتمل سپرنٹنٹ کو واضح کریں۔
مرحلہ 2۔ ٹارگٹ پروٹین کے فنکشنل اسسیس
ٹارگٹ پروٹینز کے فنکشنل بائنڈنگ کا اندازہ لگانے کے لیے ELISA یا WB Asses انجام دیں۔
کیس سٹڈی
ایم آر این اے نمونوں کے سیل پر مبنی پوٹینسی اسیسز
Yaohai-BioPharma نے mRNA کے لیے سیل پر مبنی پوٹینسی پرکھ کا طریقہ تیار کیا ہے، جس میں سیل کلچر، سیل ٹرانسفیکشن اور پروٹین فنکشنل اسسیس شامل ہیں۔ ہم نے eGFP mRNA، mCherry mRNA، luciferase mRNA، spike پروٹین mRNA کو 293T خلیوں میں منتقل کیا، اور فلوروسینس، luminescent یا رنگین سگنل، WB، ELISA کے ذریعے ہدف پروٹین کا پتہ لگایا۔
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
نہیں
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
